賀江等
摘要:為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性,通過單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行研究,采用自由基體外清除試驗(yàn)對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行探討。結(jié)果表明,在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下,真姬菇多糖提取得率可達(dá)5.68%;真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果,當(dāng)濃度為1.0 mg/mL時,其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。
關(guān)鍵詞:真姬菇;真菌多糖;超聲波輔助提??;抗氧化活性
中圖分類號: TS201.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)04-0232-03
收稿日期:2013-08-10
基金項(xiàng)目:湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(編號:2012);湖南文理學(xué)院博士啟動項(xiàng)目(編號:2011);湖南省教育廳科研項(xiàng)目(編號:12C0828)。
作者簡介:賀江(1983—),男,江西萍鄉(xiāng)人,講師,主要從事食品安全與食品生物技術(shù)相關(guān)研究。E-mail:hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富,許多食用菌以其獨(dú)特的營養(yǎng)價(jià)值和藥用功能而深受消費(fèi)者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等,味道鮮美,肉厚質(zhì)嫩,具有獨(dú)特的蟹香味;是北溫帶地區(qū)的一種優(yōu)良食用菌,于20世紀(jì)80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進(jìn)行廣泛栽培。已有研究表明,從真姬菇子實(shí)體中提取的以β-1,3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預(yù)防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前,真姬菇大多作為高營養(yǎng)價(jià)值的烹飪食材供消費(fèi)者享用;但從食用菌中提取多糖等活性成分,并開發(fā)出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發(fā)與利用的一種有效途徑[3-4]。目前,真姬菇多糖提取工藝相關(guān)的研究報(bào)道較少。因此,本研究以真姬菇為研究材料,采用目前廣泛應(yīng)用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進(jìn)行多糖提取,重點(diǎn)探討其提取工藝,并進(jìn)一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行初步研究。本研究的開展,有望為真姬菇資源的開發(fā)與利用提供一定參考。
1材料與方法
1.1材料與試劑
真姬菇子實(shí)體(干品,產(chǎn)地古田縣);濃硫酸、苯酚(5%)、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純;DPPH、ABTS等均為優(yōu)級純。
1.2儀器與設(shè)備
KH5200超聲波提取設(shè)備(超聲功率為200 W)、UV-1750 紫外可見分光光度計(jì)(日本島津)、電熱鼓風(fēng)干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、萬能粉碎機(jī)、電子天平、高速離心機(jī)、渦旋振蕩器以及其他常規(guī)玻璃儀器。
1.3方法
1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實(shí)體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎,過100目篩;準(zhǔn)確稱取2.00 g干粉樣品,以蒸餾水為提取溶劑,按設(shè)定的一系列提取條件進(jìn)行提取后,樣液4 000 r/min離心 10 min;上清液加入3倍體積95%乙醇進(jìn)行沉淀,離心收集沉淀,并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次,即得粗多糖;將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL,采用苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量的測定。
1.3.2工藝參數(shù)對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下,設(shè)置一系列料液比(1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50,g ∶mL)、提取溫度(30、40、50、60、70 ℃)和提取時間(15、30、45、60、75 min)對真姬菇多糖進(jìn)行提取,以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響,每個處理重復(fù)3次。
1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優(yōu)化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后,進(jìn)一步對每個因素分別選取3個水平,采用L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn),以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,正交試驗(yàn)的因素和水平如表1所示。
3結(jié)論
本研究通過單因素試驗(yàn)探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響,并在此基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計(jì)對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明,在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下,真姬菇多糖提取得率最高,可達(dá)5.68%。本研究還進(jìn)一步采用自由基體外清除試驗(yàn)對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明,真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果,當(dāng)濃度為 1.0 mg/mL 時,其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。本研究結(jié)果可為我國真姬菇資源的開發(fā)和利用提供一定的基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn):
[1]孫培龍,魏紅福,楊開,等. 真姬菇研究進(jìn)展[J]. 食品科技,2005(9):54-57.
[2]李順峰,劉興華,張麗華,等. 真姬菇子實(shí)體多糖的提取工藝優(yōu)化[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào),2008,24(2):281-284.
[3]周國英,蘭貴紅,何小燕. 食用菌多糖研究開發(fā)進(jìn)展[J]. 實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2004,11(1):203-204.
[4]王麗霞,杜德清. 食用菌多糖研究進(jìn)展[J]. 浙江林業(yè)科技,2005,25(5):49-53,56.
[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數(shù)優(yōu)化研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(2):316-317.
[6]史碧波,王雪波,羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機(jī)械,2012,28(2):152-154,218.
[7]樊懿娜,趙婷,周葉,等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(25):15256-15257.
[8]Faller A L K,F(xiàn)ialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis,2010,23(6):561-568.
[9]熊建華,閔嗣璠,董開發(fā),等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發(fā),2011,32(11):135-138.
[10]秦秀麗,李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(5):378-380.endprint
摘要:為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性,通過單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行研究,采用自由基體外清除試驗(yàn)對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行探討。結(jié)果表明,在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下,真姬菇多糖提取得率可達(dá)5.68%;真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果,當(dāng)濃度為1.0 mg/mL時,其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。
關(guān)鍵詞:真姬菇;真菌多糖;超聲波輔助提取;抗氧化活性
中圖分類號: TS201.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)04-0232-03
收稿日期:2013-08-10
基金項(xiàng)目:湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(編號:2012);湖南文理學(xué)院博士啟動項(xiàng)目(編號:2011);湖南省教育廳科研項(xiàng)目(編號:12C0828)。
作者簡介:賀江(1983—),男,江西萍鄉(xiāng)人,講師,主要從事食品安全與食品生物技術(shù)相關(guān)研究。E-mail:hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富,許多食用菌以其獨(dú)特的營養(yǎng)價(jià)值和藥用功能而深受消費(fèi)者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等,味道鮮美,肉厚質(zhì)嫩,具有獨(dú)特的蟹香味;是北溫帶地區(qū)的一種優(yōu)良食用菌,于20世紀(jì)80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進(jìn)行廣泛栽培。已有研究表明,從真姬菇子實(shí)體中提取的以β-1,3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預(yù)防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前,真姬菇大多作為高營養(yǎng)價(jià)值的烹飪食材供消費(fèi)者享用;但從食用菌中提取多糖等活性成分,并開發(fā)出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發(fā)與利用的一種有效途徑[3-4]。目前,真姬菇多糖提取工藝相關(guān)的研究報(bào)道較少。因此,本研究以真姬菇為研究材料,采用目前廣泛應(yīng)用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進(jìn)行多糖提取,重點(diǎn)探討其提取工藝,并進(jìn)一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行初步研究。本研究的開展,有望為真姬菇資源的開發(fā)與利用提供一定參考。
1材料與方法
1.1材料與試劑
真姬菇子實(shí)體(干品,產(chǎn)地古田縣);濃硫酸、苯酚(5%)、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純;DPPH、ABTS等均為優(yōu)級純。
1.2儀器與設(shè)備
KH5200超聲波提取設(shè)備(超聲功率為200 W)、UV-1750 紫外可見分光光度計(jì)(日本島津)、電熱鼓風(fēng)干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、萬能粉碎機(jī)、電子天平、高速離心機(jī)、渦旋振蕩器以及其他常規(guī)玻璃儀器。
1.3方法
1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實(shí)體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎,過100目篩;準(zhǔn)確稱取2.00 g干粉樣品,以蒸餾水為提取溶劑,按設(shè)定的一系列提取條件進(jìn)行提取后,樣液4 000 r/min離心 10 min;上清液加入3倍體積95%乙醇進(jìn)行沉淀,離心收集沉淀,并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次,即得粗多糖;將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL,采用苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量的測定。
1.3.2工藝參數(shù)對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下,設(shè)置一系列料液比(1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50,g ∶mL)、提取溫度(30、40、50、60、70 ℃)和提取時間(15、30、45、60、75 min)對真姬菇多糖進(jìn)行提取,以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響,每個處理重復(fù)3次。
1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優(yōu)化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后,進(jìn)一步對每個因素分別選取3個水平,采用L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn),以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,正交試驗(yàn)的因素和水平如表1所示。
3結(jié)論
本研究通過單因素試驗(yàn)探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響,并在此基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計(jì)對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明,在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下,真姬菇多糖提取得率最高,可達(dá)5.68%。本研究還進(jìn)一步采用自由基體外清除試驗(yàn)對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明,真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果,當(dāng)濃度為 1.0 mg/mL 時,其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。本研究結(jié)果可為我國真姬菇資源的開發(fā)和利用提供一定的基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn):
[1]孫培龍,魏紅福,楊開,等. 真姬菇研究進(jìn)展[J]. 食品科技,2005(9):54-57.
[2]李順峰,劉興華,張麗華,等. 真姬菇子實(shí)體多糖的提取工藝優(yōu)化[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào),2008,24(2):281-284.
[3]周國英,蘭貴紅,何小燕. 食用菌多糖研究開發(fā)進(jìn)展[J]. 實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2004,11(1):203-204.
[4]王麗霞,杜德清. 食用菌多糖研究進(jìn)展[J]. 浙江林業(yè)科技,2005,25(5):49-53,56.
[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數(shù)優(yōu)化研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(2):316-317.
[6]史碧波,王雪波,羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機(jī)械,2012,28(2):152-154,218.
[7]樊懿娜,趙婷,周葉,等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(25):15256-15257.
[8]Faller A L K,F(xiàn)ialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis,2010,23(6):561-568.
[9]熊建華,閔嗣璠,董開發(fā),等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發(fā),2011,32(11):135-138.
[10]秦秀麗,李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(5):378-380.endprint
摘要:為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性,通過單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行研究,采用自由基體外清除試驗(yàn)對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行探討。結(jié)果表明,在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下,真姬菇多糖提取得率可達(dá)5.68%;真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果,當(dāng)濃度為1.0 mg/mL時,其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。
關(guān)鍵詞:真姬菇;真菌多糖;超聲波輔助提??;抗氧化活性
中圖分類號: TS201.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)04-0232-03
收稿日期:2013-08-10
基金項(xiàng)目:湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(編號:2012);湖南文理學(xué)院博士啟動項(xiàng)目(編號:2011);湖南省教育廳科研項(xiàng)目(編號:12C0828)。
作者簡介:賀江(1983—),男,江西萍鄉(xiāng)人,講師,主要從事食品安全與食品生物技術(shù)相關(guān)研究。E-mail:hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富,許多食用菌以其獨(dú)特的營養(yǎng)價(jià)值和藥用功能而深受消費(fèi)者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等,味道鮮美,肉厚質(zhì)嫩,具有獨(dú)特的蟹香味;是北溫帶地區(qū)的一種優(yōu)良食用菌,于20世紀(jì)80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進(jìn)行廣泛栽培。已有研究表明,從真姬菇子實(shí)體中提取的以β-1,3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預(yù)防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前,真姬菇大多作為高營養(yǎng)價(jià)值的烹飪食材供消費(fèi)者享用;但從食用菌中提取多糖等活性成分,并開發(fā)出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發(fā)與利用的一種有效途徑[3-4]。目前,真姬菇多糖提取工藝相關(guān)的研究報(bào)道較少。因此,本研究以真姬菇為研究材料,采用目前廣泛應(yīng)用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進(jìn)行多糖提取,重點(diǎn)探討其提取工藝,并進(jìn)一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行初步研究。本研究的開展,有望為真姬菇資源的開發(fā)與利用提供一定參考。
1材料與方法
1.1材料與試劑
真姬菇子實(shí)體(干品,產(chǎn)地古田縣);濃硫酸、苯酚(5%)、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純;DPPH、ABTS等均為優(yōu)級純。
1.2儀器與設(shè)備
KH5200超聲波提取設(shè)備(超聲功率為200 W)、UV-1750 紫外可見分光光度計(jì)(日本島津)、電熱鼓風(fēng)干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、萬能粉碎機(jī)、電子天平、高速離心機(jī)、渦旋振蕩器以及其他常規(guī)玻璃儀器。
1.3方法
1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實(shí)體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎,過100目篩;準(zhǔn)確稱取2.00 g干粉樣品,以蒸餾水為提取溶劑,按設(shè)定的一系列提取條件進(jìn)行提取后,樣液4 000 r/min離心 10 min;上清液加入3倍體積95%乙醇進(jìn)行沉淀,離心收集沉淀,并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次,即得粗多糖;將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL,采用苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量的測定。
1.3.2工藝參數(shù)對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下,設(shè)置一系列料液比(1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50,g ∶mL)、提取溫度(30、40、50、60、70 ℃)和提取時間(15、30、45、60、75 min)對真姬菇多糖進(jìn)行提取,以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響,每個處理重復(fù)3次。
1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優(yōu)化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后,進(jìn)一步對每個因素分別選取3個水平,采用L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn),以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,正交試驗(yàn)的因素和水平如表1所示。
3結(jié)論
本研究通過單因素試驗(yàn)探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響,并在此基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計(jì)對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明,在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下,真姬菇多糖提取得率最高,可達(dá)5.68%。本研究還進(jìn)一步采用自由基體外清除試驗(yàn)對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明,真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果,當(dāng)濃度為 1.0 mg/mL 時,其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。本研究結(jié)果可為我國真姬菇資源的開發(fā)和利用提供一定的基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn):
[1]孫培龍,魏紅福,楊開,等. 真姬菇研究進(jìn)展[J]. 食品科技,2005(9):54-57.
[2]李順峰,劉興華,張麗華,等. 真姬菇子實(shí)體多糖的提取工藝優(yōu)化[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào),2008,24(2):281-284.
[3]周國英,蘭貴紅,何小燕. 食用菌多糖研究開發(fā)進(jìn)展[J]. 實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2004,11(1):203-204.
[4]王麗霞,杜德清. 食用菌多糖研究進(jìn)展[J]. 浙江林業(yè)科技,2005,25(5):49-53,56.
[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數(shù)優(yōu)化研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(2):316-317.
[6]史碧波,王雪波,羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機(jī)械,2012,28(2):152-154,218.
[7]樊懿娜,趙婷,周葉,等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(25):15256-15257.
[8]Faller A L K,F(xiàn)ialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis,2010,23(6):561-568.
[9]熊建華,閔嗣璠,董開發(fā),等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發(fā),2011,32(11):135-138.
[10]秦秀麗,李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(5):378-380.endprint