劉琪等
摘要:采用中性蛋白酶對(duì)海馬粉進(jìn)行酶解獲得酶解液,并對(duì)酶解液的抗氧化活性、抑菌活性和抗疲勞活性進(jìn)行了測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,海馬酶解液對(duì)DPPH的清除率為:雄海馬45.2%,雌海馬36%;清除羥自由基率為:雄海馬81.7%,雌海馬80.0%;超氧陰離子清除率為:雄海馬46.0%,雌海馬34.4%。海馬酶解液同時(shí)具有抑菌活性,通過(guò)濾紙片法可以看出海馬酶解液對(duì)大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強(qiáng),而對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性較弱。海馬酶解液還具有抗疲勞活性,通過(guò)小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)海馬中性蛋白酶酶解液的抗疲勞活性,實(shí)驗(yàn)組游泳時(shí)間平均為143 min,而對(duì)照組的游泳時(shí)間為91 min,相比之下實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組高出52 min。進(jìn)一步的研究結(jié)果還表明,海馬酶解液具有增加小鼠游泳耐力、增加小鼠血清中SOD活力、降低血清中MDA和尿素以及降低血乳酸的作用。
關(guān)鍵詞:海馬;中性蛋白酶;抗氧化活性;抑菌活性;抗疲勞活性
利用海洋生物資源進(jìn)行藥物開發(fā)的系統(tǒng)研究始于20世紀(jì)60年代。70-80年代開始了大規(guī)模篩選,并發(fā)現(xiàn)了多種有生物活性的化合物,到20世紀(jì)90年代,則有多個(gè)海洋生物新藥進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)。海馬(Hippocampus)作為刺魚目海龍科動(dòng)物,還是一種具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的名貴中藥,具有強(qiáng)身健體、補(bǔ)腎壯陽(yáng)、舒筋活絡(luò)、消炎止痛、鎮(zhèn)靜安神、止咳平喘等藥用功能,在中藥經(jīng)典著作中均有記載,歐洲從18世紀(jì)就已經(jīng)開始將海馬入藥。海馬中含有豐富的氨基酸、蛋白質(zhì)、微量元素及高碳多烯不飽和脂肪酸;具有抗癌作用、性激素樣作用、抗疲勞作用和提高機(jī)體免疫力、提高心肌細(xì)胞的收縮功能等,有待在食品、醫(yī)藥等方面進(jìn)行研究開發(fā)[1]。
目前,市場(chǎng)上有許多關(guān)于海馬壯陽(yáng)功效的產(chǎn)品,如泌陽(yáng)春海馬膠囊,實(shí)驗(yàn)表明具有明顯提高機(jī)體性功能的藥理作用[1]。但是關(guān)于海馬的抗氧化活性和抗疲勞活性報(bào)道的較少,報(bào)道較多的是海馬的性激素樣作用,例如用5種海馬的乙醇提取物,研究表明,灌服5種海馬的乙醇提取物后,雄性小鼠的精子數(shù)和精子成活率增加,但對(duì)正常小鼠的性腺和性器官幾乎無(wú)影響。
本實(shí)驗(yàn)先利用中性蛋白酶對(duì)海馬進(jìn)行酶解,對(duì)海馬酶解液進(jìn)行抗氧化活性、抑菌活性和抗疲勞活性分別進(jìn)行了測(cè)定。
1實(shí)驗(yàn)部分
1.1儀器與試劑
1.1.1試劑與材料海馬(克氏海馬)為雌、雄海馬,均購(gòu)自大連美羅大藥房;硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸、氫氧化鈉、硼酸溶液、冰醋酸均為分析純;中性蛋白酶(250 g,Beijing Solarbio);乙腈(色譜純,百靈威科技有限公司); N,N-二甲基甲酰胺(分析純,天津博迪化工股份有限公司)。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus),變形桿菌(Bacterium Proteus),枯草桿菌(Bacillus Subtilis),大腸桿菌(Escherichia coli),產(chǎn)氣桿菌(clostridium perfingens)均來(lái)自大連海洋大學(xué)食品工程學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室;超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20130406)、丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20130406)、尿素氮(BUN)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20130410)、乳酸(LD)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20130417) 購(gòu)于南京建成生物研究所。DPPH,濃H2SO4,Tris-HCl緩沖溶液,95%乙醇,水楊酸,鹽酸,鄰苯三酚,磷酸二氫鈉,磷酸氫二鈉,中性蛋白酶,胰蛋白酶酶解,牛肉膏,瓊脂,無(wú)水乙醇,氯化鈉,葡萄糖,鹽酸,氫氧化鈉等均為分析純,20只昆明小鼠(清潔級(jí),大連醫(yī)科大學(xué)提供),PBS緩沖液,鼠糧,木屑,鉛絲。緩沖溶液和實(shí)驗(yàn)室用水均用Milli-Q凈化處理器制備。
1.1.2儀器與設(shè)備Milli-Q超純水凈化儀(Millipore公司,美國(guó))。高速多功能粉碎機(jī)(上海冰都有限公司)。Pb-10型pH計(jì)(德國(guó)賽得利斯Sartorius)。TGL-16M高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司),數(shù)顯恒溫水浴鍋(常州國(guó)華電器有限公司)。消化爐(Buchi Digestion Unit K-424),蒸餾儀(Buchi Distillation Unit K-350)。SP-752紫外分光光度計(jì)(上海光譜有限公司),旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠),YXQ-SG42-280手提式壓力蒸汽滅菌鍋,超凈工作臺(tái)(SW-CJ-1F),電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠)。
1.2海馬樣品的制備及溶液配制方法
將海馬雌雄分開,剪碎,用高速粉碎機(jī)將其粉碎,得到雌雄海馬粉末樣品,碎屑,稱重,將其裝入棕色廣口瓶中,備用。
準(zhǔn)確稱取0.500 0 g的海馬粉末,加入配制好的磷酸鹽緩沖溶液100 mL,加入一定量的酶,在水浴鍋里反應(yīng)一定時(shí)間,反應(yīng)完后放入100 ℃的水浴鍋中滅酶10 min,等冷卻到室溫后將酶解液過(guò)0.45 μm濾膜過(guò)濾,4 ℃冰箱中保存,作為樣品儲(chǔ)備液備用。
1.3海馬中蛋白質(zhì)以及灰分含量的測(cè)定
1.3.1海馬中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定將海馬樣品進(jìn)行消化:將樣品進(jìn)行分組,雄海馬粉末,雄海馬碎屑,雌海馬粉末,雌海馬碎屑。分別準(zhǔn)確稱取海馬樣品0.500 0 g,小心移入干燥潔凈的500 mL消化管,然后加入研細(xì)的硫酸銅0.500 0 g,硫酸鉀10.000 0 g和濃硫酸20 mL,空白組除了不加樣品外其他和實(shí)驗(yàn)組一樣,輕輕搖勻后放入電路中加熱,至液體變?yōu)樗{(lán)綠色透明后停止。
樣品的蒸餾與滴定:分別將消化完全的消化液冷卻后,完全轉(zhuǎn)入100 mL容量瓶中,加蒸餾水至刻度,搖勻。準(zhǔn)確移取消化稀釋液10 mL于蒸餾儀內(nèi)的消化管中,再加入10 mL,400 g/L氫氧化鈉溶液使其呈強(qiáng)堿性。蒸餾儀中的冷凝管下端預(yù)先插入盛有10 mL,40 g/L硼酸吸收液的液面下,吸收液中帶有混合指示劑,蒸餾5 min后停止。餾出液用0.1 mol/L HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。
結(jié)果計(jì)算:海馬種中蛋白質(zhì)的含量按下式計(jì)算:
1.3.2海馬中灰分含量的測(cè)定分別準(zhǔn)確稱取雄海馬粉末、碎屑各1 g,雌海馬粉末、碎屑各1 g于已知質(zhì)量的坩堝中,經(jīng)預(yù)處理后的海馬置于調(diào)溫電爐上以小火加熱使試樣充分碳化至無(wú)煙為止。將碳化好裝有試樣的坩堝用坩堝鉗移至高溫爐中,在(550±25)℃下灼燒4 h,待高溫爐爐溫降至200 ℃以下后取出坩堝,冷卻至室溫。
結(jié)果計(jì)算:海馬中灰分的含量按下式計(jì)算:
1.4海馬酶解液的活性研究
1.4.1海馬酶解液抗氧化活性的研究海馬酶解液清除DPPH的能力:準(zhǔn)確量取2 mL海馬酶解液,然后加入2 mL所配制的DPPH溶液并混合均勻后,25 ℃水浴反應(yīng)30 min,移入比色皿中517 nm測(cè)其吸光度Ai,同時(shí)測(cè)定2 mL樣液加入2 mL乙醇25 ℃水浴反應(yīng)30 min后的吸光度Aj,2 mL的DPPH加2 mL的乙醇25 ℃反應(yīng)30 min的吸光度A0。則海馬酶解液的DPPH清除率按下式計(jì)算:
海馬酶解液清除羥自由基的能力:準(zhǔn)確量取海馬酶解液2 mL,然后加入3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL,最后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.75%的雙氧水2 mL啟動(dòng)反應(yīng),在37 ℃反應(yīng)30 min,以蒸餾水為參比,在510 nm下測(cè)吸光度,考慮到樣本本身的吸光度Ai,取蒸餾水2 mL,3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL和樣液2 mL作為本底吸收Aj, 取蒸餾水2 mL,3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL,最后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.75%的雙氧水2 mL啟動(dòng)反應(yīng),37 ℃反應(yīng)30 min的吸光度A0。則海馬酶解液對(duì)羥基自由基的清除率按下式計(jì)算:
1.4.2海馬酶解液的抑菌活性
培養(yǎng)基的制作:取牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,NaCl 5 g,瓊脂15~20 g,水1 L,調(diào)pH值到7.0~7.2之間,加熱融化,然后在121 ℃滅菌20 min后備用。
菌懸液的配制:從經(jīng)過(guò)活化的菌體斜面上挑取一環(huán)菌體接種于相應(yīng)的液體培養(yǎng)基上,放入恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,分別吸取各供試液0.5 mL,加入無(wú)菌水稀釋,備用。
平涂法接種:在無(wú)菌操作臺(tái)里,將融化好的培養(yǎng)基均勻的倒在平板上,等培養(yǎng)基冷卻好后,在培養(yǎng)皿的底部用記號(hào)筆劃出均勻的區(qū)域,點(diǎn)燃酒精燈,將三角玻璃棒進(jìn)行滅菌,在將酒精燈旁分別用移液槍取出100 μL的五種菌懸液,用三角玻璃棒將菌懸液均勻的涂布在培養(yǎng)基上。
濾紙片法測(cè)海馬酶解液的抑菌活性:經(jīng)平涂接種發(fā)后,當(dāng)培養(yǎng)基上的菌懸液完全滲透到培養(yǎng)基上時(shí),用無(wú)菌鑷子將小濾紙片輕輕的貼在平板上,濾紙片一旦貼上就不可拿起,然后取酶解液樣品和75%乙醇(作為陽(yáng)性對(duì)照)各10 μL滴在濾紙片上,每個(gè)平板貼6張濾紙片,一張為空白對(duì)照,每張濾紙片的間距不得少于24 mm。待干后將放有樣品的培養(yǎng)皿倒過(guò)來(lái)放在恒溫培養(yǎng)箱里培養(yǎng)24 h后觀察抑菌圈的大小。
1.4.3海馬酶解液的抗疲勞活性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)與給藥:昆明種小鼠20只,體重18~22 g。隨機(jī)分為兩組,分組后飼養(yǎng)觀察3 d,剔除不合格個(gè)體后按小鼠體重平均分為兩組給藥,空白對(duì)照組灌胃PBS緩沖液0.2 mL/d,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃中性蛋白酶的海馬酶解液0.2 mL/d。連續(xù)灌胃15 d,實(shí)驗(yàn)期間小鼠自由攝食飲水。
酶解液對(duì)小鼠游泳時(shí)間的影響以及體內(nèi)指標(biāo)的變化:給藥第15 d后,末次灌胃半小時(shí)后進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)。小鼠負(fù)重為小鼠體重5%的鉛絲,將兩組小鼠分別放入兩個(gè)水溫(25±1) ℃、水深40 cm的水槽中同時(shí)游泳,記錄小鼠從入水至運(yùn)動(dòng)疲勞發(fā)生時(shí)的游泳時(shí)間。以小鼠頭部沒(méi)入水面以下7 s不再上浮判定為疲勞。
1.4.3.1小鼠血清SOD和MDA的測(cè)定小鼠連續(xù)灌胃15 d,在末次灌胃30 min后,小鼠自由游泳5 min后取出,斷頭取血。血樣置冰箱靜置后,3 500 r/min離心10 min,取上清液,分別按照SOD測(cè)定試劑盒MDA測(cè)定試劑盒說(shuō)明書方法測(cè)定實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血清中SOD和MDA含量。
1.4.3.2小鼠肌乳酸、血清尿素含量的計(jì)算取斷頭取血的血樣,3 500 r/min離心10 min,取上清液,按照LD測(cè)定試劑盒說(shuō)明書方法測(cè)定LD。按照BUN測(cè)定試劑盒說(shuō)明書方法測(cè)定斷頭取血所得的血清中BUN含量。
2結(jié)果與討論
2.1海馬中蛋白質(zhì)含量測(cè)定
海馬中蛋白質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1,由結(jié)果可以看出雄海馬粉末蛋白質(zhì)含量為55.83%,雌海馬粉末的蛋白質(zhì)含量為49.00%。蛋白質(zhì)在人體含量的多少?zèng)Q定了物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的高低的重要指標(biāo),從表中可以看出海馬蛋白質(zhì)含量高達(dá)52.42%,但是本實(shí)驗(yàn)采用的蛋白質(zhì)含量的測(cè)定方法為凱氏定氮法,屬于元素分析的范疇,因此,從測(cè)定結(jié)果看蛋白質(zhì)含量較高,但是考慮到海馬體內(nèi)還含有其他的含氮生物分子,該結(jié)果只是作為隨后的氨基酸分析的依據(jù)。
2.2海馬中灰分含量測(cè)定
海馬中灰分含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明,雌雄海馬的灰分分別為12.3%,12.6%。雌雄海馬的灰分含量相差不大,雌雄海馬灰分的平均含量為12.45%。
2.3海馬中性蛋白酶酶解液的活性研究
2.3.1海馬酶解液抗氧化活性
2.3.1.1海馬酶解液對(duì)DPPH的清除率從表3可以看出海馬酶解液對(duì)DPPH有一定的清除能力,其清除能力與多肽和水解的氨基酸有關(guān)。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)DPPH的平均清除率為45.2%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)DPPH的平均清除率為36.0%。
2.3.1.2海馬酶解液對(duì)羥基自由基的清除率通過(guò)表4可以看出海馬酶解液對(duì)·OH有顯著的清除效果。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)·OH的清除率為81.7%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)·OH的清除率為80.03%;可以看出,雄海馬酶解液對(duì)·OH的清除率要好于雌海馬酶解液。
2.3.1.3海馬酶解液對(duì)超氧陰離子自由基的清除率通過(guò)表5可以看出,海馬酶解對(duì)O2-有一定的清除能力。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)O2-的清除率為46.0%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)O2-的清除率為34.4%。通過(guò)比較表3-12兩組數(shù)據(jù)可以看出,雄海馬酶解液對(duì)O2-的清除率要高于雌海馬酶解液。
34.42.3.2抑菌活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)表6的數(shù)據(jù)可以看出,海馬酶解液對(duì)大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強(qiáng),而對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性不是很強(qiáng)。其中對(duì)變形桿菌抑制作用最強(qiáng)的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;對(duì)枯草桿菌抑制作用最強(qiáng)的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;對(duì)產(chǎn)氣桿菌的抑制,雌雄海馬的中性蛋白酶酶解液作用強(qiáng)度基本相同;對(duì)大腸桿菌的抑制作用最強(qiáng)的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;但是每一種樣品都不可能對(duì)所有菌種均有抑制作用,整體來(lái)看海馬中性蛋白酶酶解液有一定的抑菌活性,可以用于進(jìn)一步的研究。
從上面四組表格可以看出這樣一個(gè)共性:雄海馬的抗氧化活性和抑菌活性均優(yōu)于雌海馬,原因可能是雄海馬有育兒的義務(wù),體內(nèi)的優(yōu)質(zhì)蛋白要高與雌海馬。這與前面測(cè)得的雄海馬的蛋白質(zhì)含量高于雌海馬的結(jié)果是一致的。
2.3.3抗疲勞活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果灌服海馬酶解液對(duì)小鼠游泳時(shí)間的影響見(jiàn)表7,可以看出,連續(xù)灌服海馬酶解液15 d對(duì)小鼠的體重略有變化,但是不是很顯著。從表中可以看出,灌服海馬酶解液的實(shí)驗(yàn)組小鼠的游泳時(shí)間達(dá)到143 min,極顯著高與對(duì)照組93 min。小鼠游泳時(shí)間的延長(zhǎng),表明海馬酶解液能延緩運(yùn)動(dòng)性疲勞出現(xiàn)的時(shí)間。但是僅憑運(yùn)動(dòng)時(shí)間還不足以說(shuō)明海馬酶解液具有運(yùn)動(dòng)性抗疲勞的作用,還需要一些生化指標(biāo)來(lái)說(shuō)明。
2.3.3.1海馬酶解液對(duì)小鼠血清SOD、MDA的影響總超氧化物歧化酶(Total Superoxide Dismutase,T-SOD)是一種新型的酶制劑,廣泛存在于需氧原核生物和真核生物中,能夠清除體內(nèi)的活性氧自由基。在機(jī)體代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的活性氧和自由基,它可攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸,引起脂質(zhì)過(guò)氧化作用,并因此形成脂質(zhì)過(guò)氧化物。如醛基、酮基、羥基以及新的氧自由基等。可見(jiàn)超氧化物歧化酶對(duì)機(jī)體起到保護(hù)免受損傷的作用。同時(shí)可測(cè)定丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)的含量以此來(lái)反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的程度,間接地反映出細(xì)胞損傷的程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表8。
從表8的數(shù)據(jù)可知,實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中SOD活力比對(duì)照組高了13.5%。實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中MDA含量比對(duì)照組降低了42.53%。運(yùn)動(dòng)可以引起脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)從而產(chǎn)生自由基,自由基對(duì)肌肉細(xì)胞造成損害,從而產(chǎn)生疲勞。SOD酶能清除超氧陰離子自由基(O2-·),保護(hù)細(xì)胞免受損傷,因此能夠降低疲勞的程度。灌服海馬酶解液的小鼠血清中SOD含量明顯增加,因此有助于減少自由基的堆積,延緩疲勞。MDA是脂質(zhì)自由基氧化產(chǎn)物之一,它的高低間接反應(yīng)了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。灌服海馬酶解液的小鼠血清中MDA含量的減少,也表明海馬酶解液有助于降低自由基氧化過(guò)程,抵抗機(jī)體的疲勞。因此,灌服海馬酶解液的小鼠延緩了疲勞的出現(xiàn)。
2.3.3.2海馬酶解液對(duì)小鼠肌乳酸含量及血清尿素的影響尿素是人體內(nèi)蛋白代謝的主要終產(chǎn)物,它構(gòu)成了血液中絕大部分的非蛋白氮。血中尿素氮來(lái)源于肝臟,通過(guò)腎臟隨尿液排除體外。腎臟功能衰竭、腎炎、泌尿道梗阻等可使血液尿素氮含量升高。而乳酸含量越多,疲勞程度越重[2]。結(jié)果見(jiàn)表9。
從表9的數(shù)據(jù)可知,實(shí)驗(yàn)組小鼠乳酸含量比對(duì)照組降低4.8%。實(shí)驗(yàn)組小鼠血清尿素含量比對(duì)照組降低3.0%。動(dòng)物劇烈運(yùn)動(dòng)后,無(wú)氧糖酵解過(guò)程產(chǎn)生的乳酸堆積,是產(chǎn)生疲勞的一個(gè)重要原因。灌服海馬酶解液的實(shí)驗(yàn)組乳酸堆積程度小于對(duì)照組,提示海馬酶解液具有加速乳酸清除代謝的作用。血清中尿素含量隨著運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的增加而增加,機(jī)體對(duì)負(fù)荷適應(yīng)能力越強(qiáng),血清中尿素含量就越少。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,灌服海馬酶解液的實(shí)驗(yàn)組血清中尿素含量低于對(duì)照組,表明海馬酶解液在一定程度上可以提高小鼠運(yùn)動(dòng)負(fù)荷能力,抵抗疲勞。
3結(jié)論
海馬的粉末經(jīng)過(guò)中性蛋白酶酶解后含有豐富的多肽和氨基酸,這些多肽和氨基酸具有抗氧化活性。實(shí)驗(yàn)證明海馬酶解液對(duì)DPPH的清除率為:雄海馬45.2%,雌海馬36%;清除羥自由基率為:雄海馬81.7%,雌海馬80.0%;超氧陰離子清除率為:雄海馬46.0%,雌海馬34.4%。海馬酶解液同時(shí)具有抑菌活性。通過(guò)濾紙片法可以看出海馬酶解液對(duì)大腸桿菌,產(chǎn)氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強(qiáng),而對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性不是很強(qiáng)。海馬酶解液還具有抗疲勞活性。通過(guò)小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)海馬中性蛋白酶酶解液的抗疲勞活性,實(shí)驗(yàn)組游泳時(shí)間平均為143 min,而對(duì)照組的游泳時(shí)間為91 min,相比之下實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組高出52 min。研究結(jié)果還表明了海馬酶解液具有增加小鼠游泳耐力、增加小鼠血清中SOD活力、降低血清中MDA和尿素以及降低血乳酸的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,海馬可作為海洋藥物開發(fā)的潛在優(yōu)質(zhì)原料。
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(收稿日期:2015-05-14)