王加良 夏洪蓮 胡春陽

雷諾嗪應(yīng)用于健康人體的藥代動(dòng)力學(xué)研究※

王加良 夏洪蓮 胡春陽

目的 研究雷諾嗪在健康人體中的藥代動(dòng)力學(xué)。方法選取8名健康志愿者作為研究對(duì)象，其中5名口服雷諾嗪緩釋片，3名口服安慰劑，應(yīng)用LC-MS/MS法（液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）檢測(cè)每名受試者的血藥濃度，并對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果雷諾嗪血藥濃度線性變化范圍在5.3～4000.8ng/m l內(nèi)，定量下限值為5.3ng/m l，日間及日內(nèi)精密度均＜15%。藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)：CL為（0.104±0.047）L/h、V為（0.73±0.34）L、t1/2為（3.12±1.48）h、Cmax為（1.28 ±0.51）mg/m l。結(jié)論LC-MS/MS法具有靈敏度高、操作便捷的特點(diǎn)，可用于檢測(cè)雷諾嗪緩釋片在健康人體中的藥代動(dòng)力學(xué)。

藥代動(dòng)力學(xué)；液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；雷諾嗪

雷諾嗪是一種PFOX（部分脂肪酸氧化酶）抑制劑，是臨床治療慢性心絞痛的常用藥物[1]。雷諾嗪可對(duì)部分脂肪酸代謝加以抑制，促進(jìn)葡糖糖氧化代謝，使心臟需氧量減少，從而緩解、預(yù)防心絞痛，并且這一作用過程還不會(huì)對(duì)患者的血流動(dòng)力學(xué)及心率產(chǎn)生影響[2]。另外，雷諾嗪還能對(duì)INa（晚鈉離子電流）發(fā)揮阻滯作用，從而使缺血心肌細(xì)胞的鈣超載狀態(tài)加以改善，降低心肌耗氧量，并對(duì)心室復(fù)極化情況加以改善[3]。血雷諾嗪濃度的測(cè)定方法包括蛋白沉淀、固相萃取等方法，但這些方法都較為復(fù)雜，本研究應(yīng)用了LC-MS/MS法進(jìn)行血雷諾嗪濃度檢測(cè)，并對(duì)其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行了計(jì)算，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取 8名健康志愿者作為研究對(duì)象，男5名，女3名，年齡在22～28歲，平均（23.2 ±1.6）歲，體重在58～71kg，平均（61.2±7.6）kg，身高在166～182cm，平均（169.8±7.3）cm，體質(zhì)量指數(shù)（BM I）平均值為（21.6±2.0）kg/cm2。隨機(jī)分為研究組（5名）和對(duì)照組（3名），經(jīng)心電圖、尿常規(guī)、血常規(guī)、血生化檢查，均顯示正常。受試者均知情同意，并自愿簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 儀器與藥品 儀器：Shimadzu 20AD型高效液相色譜分析儀（日本島津公司），Sciex QTRAP 5500型三重四極桿——線性離子阱串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國AB公司）。藥品：由大連中信制藥生產(chǎn)的雷諾嗪緩釋片（500mg/片）、安慰劑（雷諾嗪對(duì)照品，99.46%），由中國藥品生物制品檢定所生產(chǎn)的氯胺地平對(duì)照品。

1.2.2 給藥及檢測(cè)方法 兩組受試者均在試驗(yàn)前1d晚上開始禁食（12h），次日早晨，研究組受試者空腹服用雷諾嗪緩釋片，劑量為1500mg，以250m l溫開水送服；對(duì)照組空腹服用安慰劑，2h后可開始飲水，服藥4h后統(tǒng)一進(jìn)餐。服藥前及服藥后0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、8.0h，均采集5.0m l靜脈血，置于肝素化試管保存，離心10min（轉(zhuǎn)速3000r/min）后，取下層血漿，并置于可控溫冰箱中保存（-80℃）。

1.2.2.1 色譜條件 Waters Xterra RPC18色譜柱（3.5μm，2.10mm×100.00mm），流動(dòng)相為乙腈（-7mmol/m l）醋酸銨水溶液（90:20），柱溫40℃，流速0.25m l/min，進(jìn)樣量5μl。

1.2.2.2 質(zhì)譜條件 ESI（電噴霧離子源）、正離子方式檢測(cè)、MRM（多反應(yīng)監(jiān)測(cè)）。離子噴射電壓、溫度分別為4500V、550℃，氣簾氣壓208kPa，GS1（源內(nèi)氣體1）壓力380kPa，GS2（氣體2）壓力415kPa。采用 LC-MS/MS法（液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）對(duì)血液樣本中的雷諾嗪濃度進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行計(jì)算。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法本次研究采用軟件Win Nonlin 5.2處理血藥濃度相關(guān)數(shù)據(jù)，對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行計(jì)算。

2 結(jié)果

雷諾嗪血藥濃度線性變化范圍在 5.3～4000.8 ng/m l內(nèi)，定量下限值為5.3ng/m l，日間及日內(nèi)精密度均＜15%?？诜?1500mg雷諾嗪緩釋片的各項(xiàng)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較，見表1。

表1 口服1500mg雷諾嗪緩釋片的各項(xiàng)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較 (±s)

表1 口服1500mg雷諾嗪緩釋片的各項(xiàng)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較 (±s)

項(xiàng)目 參數(shù)12.68±4.02 12.26±4.04 17.72±8.30 17.51±8.30 0.104±0.047 0.73±0.34 5.01±1.48 3.12±1.48 1.28±0.51 MRT0-∞(h) MRT0-48(h) AUC0-∞(mg/h·m l) AUC0-48(mg/h·m l) CL(L/h) V(L) t1/2(h) tmax(h) Cmax(mg/m l)

3 討論

本次研究對(duì)文獻(xiàn)[4]中的血藥濃度檢測(cè)方法進(jìn)行了創(chuàng)新、改進(jìn)。結(jié)果顯示，在優(yōu)化條件后，實(shí)施固相萃取，具有較高的穩(wěn)定性和回收率，同時(shí)所需血漿樣本量少、無基質(zhì)效應(yīng)、線性范圍寬[5]。在本次研究中，對(duì)不同比例的甲醇-乙腈-水、乙腈-水、甲醇-水流動(dòng)相加以優(yōu)化，結(jié)果表明，在流動(dòng)相中加入乙酸銨和乙酸可提高響應(yīng)，同時(shí)能更好地將內(nèi)源性物質(zhì)和雷諾嗪分離開來，該方法快速、靈敏、準(zhǔn)確，定量下限值為 5.3ng/m l，能較好地滿足雷諾嗪血藥濃度檢測(cè)要求。通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，健康人體在服用1500mg雷諾嗪緩釋片后，在3.12h時(shí)可達(dá)到血藥濃度峰值，t1/2為 5.01h，這一結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致。

[1] 侯文靜,李揚(yáng),胡欣,史愛欣.雷諾嗪在健康人體的藥代動(dòng)力學(xué)[J].中國臨床藥理學(xué)雜志,2013(5):342-344,349.

[2] 李長(zhǎng)軍,于艷玲,楊清敏,等.鹽酸雷諾嗪緩釋片處方優(yōu)化及犬體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)的研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),2010(9):1170-1176.

[3] 譚親友,朱榮華,李煥德,等.HPLC-MS/MS法測(cè)定雷諾嗪血藥濃度及其緩釋制劑的藥代動(dòng)力學(xué)研究[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2012(5):549-553.

[4] 廖明琪.雷諾嗪光學(xué)異構(gòu)體手性拆分、藥動(dòng)學(xué)及藥效學(xué)研究[D].蘭州大學(xué),2013.

[5] 王源,陳笑艷,孫昨明,等.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定人血漿中雷諾嗪及其三種代謝產(chǎn)物[C].中國藥學(xué)會(huì)、煙臺(tái)市人民政府、2011年中國藥學(xué)大會(huì)暨第11屆中國藥師周論文集,2011.

R969.1

A

1673-5846(2014)05-0216-02

牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院，黑龍江牡丹江 157011

黑龍江省教育廳科研項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：12521579。黑龍江省衛(wèi)生廳科研項(xiàng)目，編號(hào)2011-304