蘭 衛(wèi), 郭玉婷, 耿 直, 倪 健
(1新疆名醫(yī)名方與特色方劑學自治區(qū)重點實驗室, 烏魯木齊 830011; 2北京中醫(yī)藥大學中藥學院, 北京 100029;3新疆醫(yī)科大學對口協(xié)作辦公室, 烏魯木齊 830011)
德國洋甘菊(MatricariachamomiliaL.)又稱母菊,為菊科母菊屬一年生草本植物。洋甘菊為德國洋甘菊干燥的花或全草,維吾爾語稱“巴木乃”,性味一級干、二級熱,味微苦、甘香,主產(chǎn)我國新疆山區(qū),是新疆特色地產(chǎn)藥材[1]。據(jù)國家衛(wèi)生部藥品標準(維吾爾藥分冊)記載具有補益神經(jīng)、止痛消腫、發(fā)汗通便、利尿通經(jīng)的功效。用于機體異常腐敗體液,頭痛久治不愈,大便秘結,汗出不暢,小便不利,月經(jīng)不通等病癥[2]。
目前,國內對洋甘菊化學成分的含量測定研究甚少,本文用乙醇提取,水飽和正丁醇萃取提取純化洋甘菊中的總皂苷,高氯酸顯色,紫外分光光度法測定總皂苷的含量,為洋甘菊的成分含量研究奠定基礎。
1.1儀器UV-2550 紫外光譜儀(島津公司)。
1.2試藥洋甘菊藥材2012年5月采自新疆昆侖山北麓和田地區(qū)策勒縣博斯坦鄉(xiāng),樣品由策勒縣人民政府提供,經(jīng)新疆醫(yī)科大學中醫(yī)學院中藥資源教研室李永和主任中藥師鑒定為德國洋甘菊(Matricariachamomilia)的頭狀花序。
人參皂苷Rb1對照品(中國藥品生物制品檢定所);其他試劑均為分析純。
2.1洋甘菊供試品溶液的制備取洋甘菊藥材粉末約5.0 g,精密稱定,置索氏提取器內,加甲醇50 mL,80℃,提取1 h;回收溶劑至干,加蒸餾水10 mL超聲分散,用等量水飽和的正丁醇萃取4次;合并萃取液,再用正丁醇飽和水溶液洗滌3次,每次10 mL,水浴蒸干;加入10 mL丙酮分散,過濾,殘渣用甲醇溶液定容至 50 mL,制得樣品溶液[3]。
2.2標準曲線繪制參考測定藥材中人參皂苷Rb1的相關文獻,以人參皂苷Rb1對照品溶液的濃度為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪制人參皂苷Rb1對照品溶液標準曲線,得回歸方程為:A=0.065 3C-0.0125,r=0.999 8,表明樣品質量濃度在4.0~12.0 μg/mL范圍內與吸光度線性關系良好。系列濃度人參皂苷 Rb1對照品溶液的吸光度見表1。
2.3精密度實驗對照品溶液0.5 mL,測定6次吸光度,分別為0.316、0.327、0.319、0.307、0.311、0.301,計算RSD 為2.94%。
2.4重復性實驗取洋甘菊樣品6份,測定供試品溶液的吸光度,分別為0.515、0.507、0.520、0.501、0.497、0.527,RSD為2.86%。
表1 系列濃度人參皂苷 Rb1對照品溶液的吸光度
2.5顯色穩(wěn)定性實驗分別在0、0.5、1.0、1.5、2、2.5 h測定對照品溶液吸光度,分別為0.317、0.336、0.325、0.310、0.298、0.035,結果表明在2.5 h內測定結果較穩(wěn)定,RSD為4.35%。
2.6加樣回收率實驗精密稱取洋甘菊粉末0.2、0.3、0.5 mg ,各2份,分別精密加入人參皂苷Rb1溶液 0.3 mL,按照供試品處理方法依法配置溶液,測定吸光度,計算回收率。經(jīng)計算,平均回收率為100.4%,RSD為2.09%,結果見表2。
表2 加樣回收率實驗
2.7樣品含量測定測定樣品吸光度,參照標準曲線,計算結果,通過用乙醇提取、水飽和正丁醇萃取提取純化洋甘菊中的總皂苷;高氯酸顯色,紫外分光光度法測定總皂苷的含量。測得洋甘菊總皂苷的含量為8.02%,見表3。
表3 洋甘菊總皂苷的含量測定
皂苷(saponins) 是一類比較復雜的化合物, 廣泛存在于植物界。皂苷主要有免疫調節(jié)作用、護腦、護心及延緩衰老作用、抗腫瘤作用、擴張心腦血管作用、降壓的作用和鎮(zhèn)靜、安神作用[4]。
本實驗中采用高氯酸法,最大波長明顯,反應相對穩(wěn)定。本實驗經(jīng)過方法學考察后所采用高氯酸顯色測定德國洋甘菊總皂苷含量的方法穩(wěn)定,重復性好,可作為洋甘菊中總皂苷的含量測定方法,為德國洋甘菊藥材的質量控制提供參考依據(jù)。
參考文獻:
[1] 新疆衛(wèi)生廳.維吾爾藥標準(上冊)[S].烏魯木齊:新疆科技衛(wèi)生出版社,1993:255.
[2] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會編.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準維吾爾藥分冊[S].烏魯木齊:新疆科技衛(wèi)生出版社,1999:76.
[3] 張彥麗,韓艷春,阿依吐倫·斯馬義.分光光度法測定維吾爾藥昆侖雪菊中總皂苷的含量[J].西北藥學雜志,2011,26(2):87-88.
[4] 樊永蓉,廖慶文.中草藥中皂苷類有效成分藥理作用研究現(xiàn)狀[J].湖南中醫(yī)藥導報,2003,9(11):52-53.