分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)及其在水稻定向改良上的應(yīng)用研究進(jìn)展

吳昊+陳濤+姚姝等

摘要：綜述了分子標(biāo)記的概念、特點(diǎn)、種類(lèi)，對(duì)分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)的優(yōu)勢(shì)和影響因素進(jìn)行了介紹，同時(shí)對(duì)其在質(zhì)量性狀（稻米品質(zhì)、抗病、抗蟲(chóng)性等）改良和數(shù)量性狀（稻米產(chǎn)量、抗逆性、株型等）改良兩方面的研究進(jìn)展進(jìn)行了歸納，并對(duì)研究中出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行了分析，對(duì)其應(yīng)用前景進(jìn)行了展望。

關(guān)鍵詞：分子標(biāo)記輔助選擇；水稻；質(zhì)量性狀；數(shù)量性狀；定向改良；研究進(jìn)展

中圖分類(lèi)號(hào)： S511.035文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）02-0022-06

收稿日期：2013-07-02

基金項(xiàng)目：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)（編號(hào)：CARS-01-47）；農(nóng)業(yè)部超級(jí)晚稻新品種選育和示范項(xiàng)目；江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號(hào)：CX（12）1003]；江蘇省科技支撐計(jì)劃（編號(hào)：BE2013301）。

作者簡(jiǎn)介：吳昊（1988—），男，河南駐馬店人，碩士，主要從事水稻遺傳育種研究。E-mail：wuhao11219@gmail.com。

通信作者：王才林（1959—），男，江蘇無(wú)錫人，博士，研究員，博士生導(dǎo)師，主要從事水稻遺傳育種研究。Tel：（025）84390307；E-mail：clwang@jaas.ac.cn。水稻（Oryza sativa L.）是世界上大多數(shù)人的主要食物，在除南極洲和北極洲之外的各大洲均有種植，面積超過(guò)1.5億hm2[1]，但主要產(chǎn)區(qū)在亞洲。20世紀(jì)60年代，國(guó)際水稻研究所（IRRI）推動(dòng)的“綠色革命”以及我國(guó)雜交水稻的研制成功大幅度提高了水稻產(chǎn)量。然而在過(guò)去的10多年里，水稻產(chǎn)量停滯不前。為了填補(bǔ)不斷增加的世界人口所造成的糧食缺口，進(jìn)一步提高水稻產(chǎn)量是育種工作者們刻不容緩的任務(wù)。但是，傳統(tǒng)的育種方法主要是依據(jù)作物在田間的表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)和選擇，要求育種工作者具有非常豐富的育種經(jīng)驗(yàn)，而且需要長(zhǎng)達(dá)數(shù)年的時(shí)間。另外，對(duì)一些數(shù)量性狀的直接選擇還受到許多條件的限制。因此，提高選擇效率并減少育種過(guò)程中的盲目性成為進(jìn)一步拓展品種生產(chǎn)力的關(guān)鍵[2]。

近20年來(lái)迅速發(fā)展起來(lái)的基于DNA的分子標(biāo)記技術(shù)為育種工作提供了嶄新的途徑。國(guó)內(nèi)外育種工作者對(duì)分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)（molecular marker-assisted selection，MAS）做了很多有益的嘗試，并以此改良或育成了不少品種，其中一些已開(kāi)始在生產(chǎn)上應(yīng)用。本文綜述了分子標(biāo)記輔助選擇的概念、特點(diǎn)、種類(lèi)，重點(diǎn)介紹了分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)在改良水稻質(zhì)量性狀、數(shù)量性狀兩方面的研究進(jìn)展和利用現(xiàn)狀，同時(shí)討論了該技術(shù)存在的問(wèn)題，并展望了其應(yīng)用前景。

1DNA分子標(biāo)記和分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)

1.1DNA分子標(biāo)記的概念及特點(diǎn)

在遺傳學(xué)的發(fā)展中，先后出現(xiàn)了形態(tài)標(biāo)記、細(xì)胞標(biāo)記、生化標(biāo)記和分子標(biāo)記[3]。相對(duì)于傳統(tǒng)的形態(tài)標(biāo)記來(lái)說(shuō)，分子標(biāo)記有著眾多的優(yōu)勢(shì)。最近利用分子標(biāo)記進(jìn)行水稻品種的改良上有很多的報(bào)道，這些報(bào)道主要涉及強(qiáng)調(diào)了分子標(biāo)記在一般作物改良及雜種優(yōu)勢(shì)育種中的應(yīng)用及其使用限制[4-9]。DNA分子標(biāo)記較以往的形態(tài)標(biāo)記具有減少育種時(shí)間、表現(xiàn)為中性、操作簡(jiǎn)便高效、能更準(zhǔn)確地選擇復(fù)雜性狀等特點(diǎn)。

1.2DNA分子標(biāo)記的種類(lèi)

根據(jù)王軍等的研究[10-13]，并作部分增添和刪改，將分子標(biāo)記劃分為3代4類(lèi)（表1）。 第1代分子標(biāo)記是以Southern雜交為核心的分子標(biāo)記技術(shù)。第2代分子標(biāo)記技術(shù)主要分為2類(lèi)：第1類(lèi)為基于PCR（polymerase chain reaction，多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）的DNA分子標(biāo)記，根據(jù)所用引物的差異，該類(lèi)標(biāo)記又分為隨機(jī)引物PCR標(biāo)記、特異引物PCR標(biāo)記2種；第2類(lèi)為基于PCR與限制性酶切技術(shù)結(jié)合的DNA標(biāo)記。第3代分子標(biāo)記技術(shù)是基于單核苷酸多態(tài)性的DNA分子標(biāo)記。

1.3分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)

分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)是將上述分子標(biāo)記應(yīng)用于作物育種或改良的一種手段[14]，其基本原理是利用與目標(biāo)基因緊密連鎖或共分離的分子標(biāo)記對(duì)選擇個(gè)體進(jìn)行目標(biāo)基因以及全基因組篩選，從而減少連鎖累贅，以獲得所需的個(gè)體，達(dá)到提高育種效率的目的[15-16]。主要分子標(biāo)記原理及特點(diǎn)見(jiàn)表2。MAS是分子標(biāo)記技術(shù)用于作物改良的重要領(lǐng)域，是常規(guī)育種技術(shù)和現(xiàn)代生物技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物。

1.3.1分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)的優(yōu)越性通過(guò)大量理論研究發(fā)現(xiàn)，相比常規(guī)的育種技術(shù)，MAS有很大的優(yōu)越性。輔助選擇可以在植物發(fā)育的任何階段進(jìn)行，而且不受基因表達(dá)和環(huán)境因素的影響；共顯性標(biāo)記可區(qū)分純合基因型和雜合基因型，所以能在分離世代的早期進(jìn)行選擇；對(duì)一些表型鑒定困難的性狀（如抗病性、抗逆性等）也可進(jìn)行基因型鑒定；可聚合多個(gè)控制不同性狀的基因以提高育種效率，延長(zhǎng)品種使用年限[17]。

1.3.2影響分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)的主要因素MAS雖是提高選擇效率的一種有效方法，但由于其研究設(shè)計(jì)的內(nèi)容廣泛，有很多遺傳和生物學(xué)的因素影響其效率，如基因與標(biāo)記間表1分子標(biāo)記的分類(lèi)及名稱(chēng)

代別類(lèi)別種類(lèi)縮寫(xiě)全稱(chēng)第1代RFLPrestriction fragment length polymorphism，限制性?xún)?nèi)切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性第2代第1類(lèi)第1種RAPDrandom amplified polymorphic DNA，DNA隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性ISSRinter-simple sequence repeats，內(nèi)部簡(jiǎn)單重復(fù)序列AP-PCRarbitrarily primed polymerase chain reaction，任意引物PCRDAFDNA amplification fingerprinting，DNA擴(kuò)增指紋印記第2種SSRsimple sequence repeats，簡(jiǎn)單重復(fù)序列STSsequence-tagged site，序列標(biāo)記位點(diǎn)SCARsequence-characterized amplified region，序列特異性擴(kuò)增區(qū)SPARsingle primer amplification reaction，單引物擴(kuò)增反應(yīng)SSCPsingle strand conformation polymorphism，DNA單鏈構(gòu)象多態(tài)性ddFdideoxy fingerprints，雙脫氧化指紋法第2類(lèi)AFLPamplified fragment length polymorphism，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性CAPScleaved amplified polymorphic sequence，酶切擴(kuò)增多態(tài)性序列第3代SNPsingle nucleotide polymorphisms，單核苷酸多態(tài)性

2分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)在水稻品種改良上的應(yīng)用

2.1分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)在水稻質(zhì)量性狀改良上的應(yīng)用

2.1.1稻米食味品質(zhì)改良劉巧泉等經(jīng)過(guò)回交轉(zhuǎn)育并結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)向特青品種導(dǎo)入Wx基因，在保持原有親本主要農(nóng)藝性狀的基礎(chǔ)上選育了3個(gè)優(yōu)質(zhì)品系，改良品系胚乳突變基因表達(dá)量明顯下降，稻米中直鏈淀粉含量減少[18]。周屹鋒等以具有中等直鏈淀粉含量的優(yōu)質(zhì)保持系宜香1B為優(yōu)質(zhì)源，與協(xié)青早B雜交、回交和自交，在分離早世代以特異性分子標(biāo)記對(duì)直鏈淀粉含量進(jìn)行檢測(cè)和選擇，最終選育出具有中等直鏈淀粉含量的的秈型三系不育系浙農(nóng)3A[19]。許勇等以分子標(biāo)記輔助選擇對(duì)協(xié)優(yōu)57的父母本的Wx基因進(jìn)行改良，利用改良后的親本進(jìn)行配組，其后代雜交稻米的AC值降到中等偏低水平，蒸煮食味品質(zhì)明顯改善[20]。夏明元等利用Wx基因的CAPS標(biāo)記對(duì)4384/舟903//4384的雜交后代進(jìn)行單株選擇，經(jīng)過(guò)7代的選育，獲得92個(gè)Wx基因純合的株系，從中選出2個(gè)產(chǎn)量較高及直鏈淀粉含量適中的品系[21]。李浩杰等以美國(guó)光身稻Lemont為優(yōu)質(zhì)基因供體親本，優(yōu)良保持系岡46B為輪回親本，利用與Wx基因緊密連鎖的分子標(biāo)記484/485進(jìn)行目標(biāo)基因型選擇，同時(shí)進(jìn)行岡46B的背景選擇，選出具有中等直鏈淀粉含量且綜合性狀與輪回親本岡46B相似的個(gè)體，從而提高育種效率[22]。

2.1.2抗病性水稻條紋葉枯病（rice stripe disease，RSD）是由灰飛虱作為傳毒媒介的水稻條紋葉枯病毒（rice stripe virus，RSV）引起的病毒病。因此水稻對(duì)該病的抗性可分為對(duì)病毒的抗性和對(duì)介體昆蟲(chóng)的抗性，其中對(duì)病毒的抗性更為重要[23]。目前，已經(jīng)定位的水稻條紋葉枯病抗性相關(guān)的QTL有40多個(gè)，它們分布于第1、2、3、5、6、7、8、10、11等9條染色體[24-33]。然而這些QTL中能實(shí)際用于生產(chǎn)的卻很少，目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)上應(yīng)用的條紋葉枯病抗性品種大多是利用來(lái)自秈稻Modan的位于第11染色體上的Stv-bi基因[34]。潘學(xué)彪等為了改良武育粳3號(hào)的條紋葉枯病抗性，在連續(xù)回交和自交過(guò)程中，以緊密連鎖的雙側(cè)分子標(biāo)記Stv-bi對(duì)其進(jìn)行選擇，在短期內(nèi)育成抗條紋葉枯病的武陵粳1號(hào)，大幅度提高了其條紋葉枯病抗性水平[35]。陳峰等利用與Stv-bi緊密連鎖的分子標(biāo)記進(jìn)行輔助選擇，結(jié)合條紋葉枯病田間抗性鑒定及農(nóng)藝性狀分析，通過(guò)回交改良，獲得攜帶Stv-bi的改良品系6個(gè)[36]。李波利用與抗病基因qSTV-11b、qSTV-11c連鎖的分子標(biāo)記對(duì)武育粳3號(hào)、武運(yùn)粳8號(hào)和武運(yùn)粳7號(hào)進(jìn)行輔助選擇，改良受體親本的抗性，并選育對(duì)條紋葉枯病具有抗性的新品種[37]。馬寧以抗病品種鎮(zhèn)稻 88為供體親本、武育粳3號(hào)為輪回受體親本，采用連續(xù)回交并結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇的方法，將抗條紋葉枯病基因轉(zhuǎn)移到武育粳3號(hào)中，育成武育粳3號(hào)改良系[38]。

水稻白葉枯病（bacterial leaf blight，BB）是由革蘭氏陰性菌黃單胞菌水稻變種（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）引起的細(xì)菌性病害，化學(xué)方法難以奏效，種植抗病品種則是最經(jīng)濟(jì)、有效的防治方法。目前已有32個(gè)抗白葉枯病基因被鑒定，分別位于第1、4、5、6、8、11、12染色體上[39]。其中，Xa1、Xa5、Xa13、 Xa21、Xa26、Xa27已被克隆。王興春等以受微效多基因控制白葉枯病抗性的五豐占2號(hào)和主基因Xa5控制的IRBB5為材料，成功地聚合了白葉枯病抗性主基因和微效多基因[40]。薛慶中等利用MAS成功地選育了抗白葉枯病的水稻恢復(fù)系[41]。彭應(yīng)財(cái)?shù)劝寻兹~枯病抗性基因Xa21導(dǎo)入到強(qiáng)優(yōu)恢復(fù)系輻恢838中，選育出抗白葉枯病恢復(fù)系中恢218[42]。蘭艷榮等利用抗性基因Xa21、Xa7，成功改良了華201S的白葉枯病抗性[43]。

稻瘟病是由子囊菌引起的真菌性病害，是世界性的主要稻病之一。應(yīng)用抗病品種防治相對(duì)化學(xué)防治來(lái)說(shuō)不會(huì)污染環(huán)境，是如今防治稻瘟病的主要方法。自20世紀(jì)60年代日本開(kāi)展稻瘟病基因的遺傳研究以來(lái)，至今水稻中已經(jīng)有80多個(gè)抗稻瘟病基因被標(biāo)記定位，其中13個(gè)已經(jīng)克隆[44]。被鑒定的廣譜抗性基因包括Pi1、Pi2、Pi3、Pi9、Pi33、Piz、Piz-t、Pigm（t）等[45]。利用與這些基因連鎖的分子標(biāo)記，通過(guò)MAS已經(jīng)育成了許多抗病品種。王忠華等應(yīng)用與Pi-ta連鎖的共顯性標(biāo)記對(duì)350個(gè)雜交F3代株系進(jìn)行早期篩選，得到118個(gè)含Pi-ta的抗病純合株系[46]。劉士平等利用位于第11染色體上的與Pi1緊密連鎖的SSR標(biāo)記對(duì)保持系珍汕97進(jìn)行改良，得到17株含Pi1的純合株系[47]。倪大虎等分別將Pi9導(dǎo)入不同水稻恢復(fù)系M12和閩恢3139中。這些育成的改良品系經(jīng)抗性鑒定，抗瘟性均得到顯著提高[48-49]。陳志偉等將稻瘟病抗性基因Pi1導(dǎo)入受體親本珍汕97B、金山B-1、金山 S-1 等保持系中，用與Pi1基因緊密連鎖的分子標(biāo)記RM224和MRG4766同時(shí)對(duì)雜種后代Pi1基因進(jìn)行MAS選擇的準(zhǔn)確率高達(dá)100%，中選單株抗病性明顯提高[50]。

2.1.3抗蟲(chóng)性不同生物型的稻褐飛虱在侵染具有不同抗性基因的水稻時(shí)會(huì)表現(xiàn)出不同程度的致害性。迄今為止，已報(bào)道的水稻抗褐飛虱基因共27個(gè)，定位的有21個(gè)，其中Bph14已被成功克隆[51]。胡杰等利用分子標(biāo)記輔助選擇將水稻抗褐飛虱基因Bph14、Bph15同時(shí)導(dǎo)入到汕優(yōu)63的親本明恢63、珍汕97B中，以改良汕優(yōu)63的褐飛虱抗性[52]。李信通過(guò)分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)將抗褐飛虱基因Qbp1、Qbp2導(dǎo)入到明恢63、珍汕97中，提高明恢63、珍汕97對(duì)稻褐飛虱的抗性[53]。梁云濤利用MAS，將對(duì)我國(guó)稻褐飛虱生物群體表現(xiàn)為高抗的Bph18（t）基因?qū)氲絻?yōu)質(zhì)雜交水稻恢復(fù)系 9311、測(cè)253中，選育優(yōu)質(zhì)高抗的水稻中間材料[54]。李進(jìn)波等以藥用野生稻滲入系B5為供體親本，以9311、1826為受體親本，利用MAS結(jié)合田間農(nóng)藝性狀的選擇，獲得了目標(biāo)基因Bph14、Bph15純合的穩(wěn)定株系[55]。孫榮科等以攜帶Bph2、Bph3的水稻品系ME1為供體親本與雜交稻親本進(jìn)行雜交、回交和自交，結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇，成功獲得了雙基因純合的株系[56]。

稻癭蚊同樣具有不同的生物型。目前國(guó)際上已鑒定出9個(gè)稻癭蚊抗性基因，分別命名為Gm1至Gm9，不同的基因抗不同的生物型。目前抗性育種進(jìn)程中主要利用的是Gm6基因。柳武革等通過(guò)雜交、多次回交和自交結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)，將Gm6基因?qū)霃V恢998中，篩選獲得6個(gè)抗性株系[57]。黃炳超等利用與Gm6緊密連鎖的分子標(biāo)記，成功從豐銀占/大秋其F3家系中，鑒定出15個(gè)抗稻癭蚊的株系，隨后從抗蚊青占/桂99的F4和F6家系中分別鑒定出21個(gè)和7個(gè)抗稻癭蚊株系，并成功地將Gm6基因轉(zhuǎn)入雜交稻的恢復(fù)系[58]。

稻螟蟲(chóng)（包括二化螟、三化螟、稻縱卷葉螟）是水稻的主要害蟲(chóng)，但由于自然界缺乏優(yōu)良的抗蟲(chóng)資源，水稻抗螟蟲(chóng)育種研究進(jìn)展不大。近年來(lái)，隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的成功應(yīng)用，抗螟蟲(chóng)水稻品種培育已成為可能。研究表明，種植帶有Bt基因的品種可以有效控制螟蟲(chóng)的危害。楊子賢等利用常規(guī)回交育種方法并結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇將Bt基因?qū)?311中，在BC3F3家系中篩選到8個(gè)家系含純合的Bt基因。抗性鑒定結(jié)果表明，帶有Bt基因的株系及其雜交種沒(méi)有受到螟蟲(chóng)危害[59]。沈圣泉等以克螟稻為Bt抗蟲(chóng)基因供體，采用雜交、回交轉(zhuǎn)育方法，結(jié)合GUS（β-葡萄糖苷酸酶）分子標(biāo)記輔助選擇和田間抗螟蟲(chóng)性選擇技術(shù)，選育出首個(gè)轉(zhuǎn)Bt抗螟蟲(chóng)基因秈型水稻不育系科龍A，其所配雜種F1代仍保持了高抗螟蟲(chóng)特性[60]。

2.1.4多個(gè)質(zhì)量性狀基因的聚合基因聚合是將多個(gè)有利基因通過(guò)選育途徑聚合到一個(gè)品種中，這些基因可以控制相同的性狀，也可控制不同的性狀，基因聚合突破了回交育種改良個(gè)別性狀的局限，使品種在多個(gè)性狀上同時(shí)得到改良，產(chǎn)生更具有實(shí)用價(jià)值的育種材料[61]。隨著利用水稻抗病蟲(chóng)基因育成水稻品種的不斷推廣，新的病原菌小種或害蟲(chóng)生物型不斷出現(xiàn)，促使抗病蟲(chóng)品種需要不斷更新[62]。但由于各種病原微生物和害蟲(chóng)類(lèi)型的易變性，采用單基因品種控制病蟲(chóng)害就存在較大的風(fēng)險(xiǎn)，容易因單基因抗性喪失帶來(lái)較大的病蟲(chóng)害發(fā)生；而且不同抗病蟲(chóng)基因間還存在一定的協(xié)同作用，聚合多個(gè)不同類(lèi)型的抗病蟲(chóng)基因?qū)⑹墙鉀Q水稻病蟲(chóng)害問(wèn)題的切實(shí)有效的方法[63]。

王春連等利用與抗白葉枯病基因Xa23緊密連鎖的EST（expressed sequence tag，表達(dá)序列標(biāo)簽）標(biāo)記，培育出了3個(gè)含Xa23的水稻恢復(fù)系[64]。Yoshimura等通過(guò)RFLP和RAPD標(biāo)記將來(lái)自不同組合的5個(gè)白葉枯病抗性基因Xal、Xa3、Xa4、Xas、Xa10聚合在一起[65]。Hittalmani等利用分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)將抗稻瘟病基因Pi1、Pi-z5、Pi-ta聚合到同一個(gè)水稻品系BI124中，含有2個(gè)或3個(gè)抗性基因的植株比含單個(gè)基因的抗性更強(qiáng)[66]。Narayanan等先通過(guò)分子標(biāo)記輔助選擇將稻瘟病抗性基因Pi1、Pi-z5聚合到C039中，再將白葉枯病抗性基因Xa21轉(zhuǎn)到已經(jīng)聚合了稻瘟病抗性基因的C039植株中，最后得到同時(shí)含有Pi1、Pi-z5、Xa21的植株，這些植株對(duì)稻瘟病和白葉枯病的抗性有很大提高[67]。陳圣等利用分子標(biāo)記輔助選擇將高抗水稻白葉枯病的Xa23基因、廣譜高抗稻瘟病的Pi9基因、抗水稻螟蟲(chóng)和稻縱卷葉螟的Bt基因聚合到同一株系中，獲得了與3種基因抗性水平相當(dāng)?shù)募兒现晗礫68]。

2.2分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)在改良水稻數(shù)量性狀上的應(yīng)用

2.2.1產(chǎn)量性狀莊杰云等應(yīng)用兩種定位方法，比較了不同世代水稻產(chǎn)量性狀的QTL檢測(cè)結(jié)果，結(jié)果顯示對(duì)產(chǎn)量這一性狀而言，重要的加性效應(yīng)的QTL能夠在不同世代得到穩(wěn)定檢測(cè)[69]。中國(guó)水稻研究所通過(guò)分子標(biāo)記輔助選擇與常規(guī)測(cè)恢相結(jié)合，選育出強(qiáng)優(yōu)恢復(fù)系R8006；應(yīng)用秈粳特異標(biāo)記檢測(cè)，選育出秈粳中間型恢復(fù)系R9308[70]。國(guó)家雜交水稻工程中心在馬來(lái)西亞普通野生稻中鑒定出2個(gè)主效高產(chǎn)QTLyld1.1和yld1.2的單株作基因供體，經(jīng)連續(xù)回交并多代自交，采用分子標(biāo)記輔助選擇與田間選擇相結(jié)合，育成攜帶野生稻高產(chǎn)QTL的強(qiáng)優(yōu)晚稻恢復(fù)系Q611[71]。Tanksley等利用分子標(biāo)記輔助選擇實(shí)現(xiàn)了多個(gè)QTL從野生近緣種向優(yōu)良的栽培稻品種的轉(zhuǎn)移[72]。

2.2.2水稻抗逆性狀的改良隨著全球變暖等氣候條件變化的加劇，中國(guó)旱災(zāi)發(fā)生的頻率和范圍也在加大，干旱已成為制約中國(guó)水稻生產(chǎn)的重要因素[73]，因此，水稻抗旱品種的培育對(duì)減少旱災(zāi)的影響、提高水稻產(chǎn)量具有十分重要的意義。迄今為止，已定位出水稻抗旱性相關(guān)的QTL超過(guò)680個(gè)，其中與根形態(tài)性狀相關(guān)的QTL有228 個(gè)，與生理特征（脫落酸、滲透調(diào)節(jié)、相對(duì)含水量）相關(guān)的QTL有40個(gè)，其他與植株抗旱性相關(guān)的QTL有418個(gè)[74-75]。Li 等描述了通過(guò)建立等基因?qū)胂颠M(jìn)行抗旱性基因定位和利用分子技術(shù)進(jìn)行抗旱性品種選育的方法，如DTY3.1、DTY1.1、DTY12.1等與干旱脅迫下產(chǎn)量性狀緊密連鎖的標(biāo)記被有效用于抗旱分子輔助育種中，可以對(duì)雜交后代進(jìn)行有效抗旱分子篩選[76]。劉立峰對(duì)定位群體中的粳型抗旱供體親本IRAT109與粳型旱敏感的水稻品種越富、津稻1187進(jìn)行雜交、回交，并利用分子標(biāo)記輔助選擇對(duì)其產(chǎn)生的4個(gè)低世代育種群體進(jìn)行篩選，獲得了抗旱相關(guān)性狀QTL的優(yōu)良近等基因系[77]。

水稻的多個(gè)生長(zhǎng)期都是低溫敏感期，如芽期、苗期、孕穗期和抽穗期等。全國(guó)低溫、冷害造成的損失每年大概 30億～50億kg。近幾十年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，水稻耐冷性QTLs分析有了較大進(jìn)展，成為了一種進(jìn)行耐冷性基因定位的主要方法[78]。劉之熙等以北海PL5（孕穗期耐冷性極強(qiáng)）為供體親本，與晚稻品種湘晚秈29號(hào)、湘晚秈31號(hào)及臺(tái)中101號(hào)（孕穗期不耐冷）雜交，在F3代利用CAPS標(biāo)記進(jìn)行輔助選擇，從3個(gè)F3群體中，共選出攜帶純合耐冷基因的個(gè)體12株，并將其作為改良晚秈稻孕穗期耐冷性的中間材料[79]。

鹽害是導(dǎo)致水稻減產(chǎn)的重要原因之一，而我國(guó)土壤的鹽堿化直接制約了水稻生產(chǎn)的穩(wěn)定發(fā)展。培育耐鹽水稻品種，深入開(kāi)展水稻耐鹽性研究，通過(guò)遺傳改良提高水稻的耐鹽性，是保證鹽堿稻作區(qū)糧食的安全生產(chǎn)和改善生態(tài)環(huán)境的有效途徑之一。目前，已定位的耐鹽性QTL 達(dá)70多個(gè)[80]。已經(jīng)克隆的抗鹽性基因包括有抗水分脅迫基因CMO、BADH、mtlD、gutD、SAMDC；另一類(lèi)是抗離子毒害的基因SKC1[81]。2005年，中國(guó)水稻研究所開(kāi)始通過(guò)轉(zhuǎn)基因和常規(guī)育種相結(jié)合的方法在水稻中聚合這兩類(lèi)耐鹽基因，已獲得一系列的含不同抗鹽途徑的耐鹽水稻品系越光-SKC1/BADH-12、秀水11-SKC1/BADH-23，能在1.0%的NaCl 濃度脅迫后恢復(fù)正常生長(zhǎng)[82]。

2.2.3其他數(shù)量性狀的改良水稻的株型是其產(chǎn)量的影響因素之一，而直立密穗是高產(chǎn)的合適株型。程朝平等以?xún)?yōu)良秈稻品種東南恢602（彎穗型）為母本、DW135（直立密穗）為父本配制雜交組合，設(shè)計(jì)合成InDel（insertion deletion length polymorphism，插入缺失長(zhǎng)度多態(tài)性）標(biāo)記，通過(guò)該標(biāo)記進(jìn)行輔助選擇，最終選出了含有直立密穗基因的純合株系[83]。

為了選育香稻恢復(fù)系，杜雪樹(shù)等以廣東香稻品種美香占為香味基因供體、自育抗性恢復(fù)系豐986和R476為受體，通過(guò)比較編碼BAD2（betaine-aldehyde dehydrogenase，甜菜堿醛脫氫酶）的fgr基因序列和9311序列設(shè)計(jì)功能性STS標(biāo)記Aro，并在回交和復(fù)交的分離世代利用Aro標(biāo)記開(kāi)展香味基因的分子標(biāo)記輔助選擇育種，最終選育出農(nóng)藝性狀較好的香型恢復(fù)系C349 和C354[84]。

3分子標(biāo)記輔助選擇的問(wèn)題與展望

分子標(biāo)記輔助選擇是當(dāng)今水稻育種中不可或缺的一部分，在培育超級(jí)稻、抗病蟲(chóng)及稻米品質(zhì)、農(nóng)藝性狀改良等方面表現(xiàn)出了極大的潛力。從上述的例子也可以看到，分子標(biāo)記輔助選擇能夠達(dá)到較高的準(zhǔn)確性。但從某些方面來(lái)說(shuō)，分子標(biāo)記輔助選擇在現(xiàn)階段也顯露出了一些不足。首先，目前基因定位的工作進(jìn)度還不夠快，育種工作者準(zhǔn)備用分子標(biāo)記輔助選擇的基因有些尚未定位或連鎖并不緊密；已經(jīng)精確定位的，隨即可用的以PCR為基礎(chǔ)的標(biāo)記還不多，而且也不一定在群體的雙親間表現(xiàn)多態(tài)。其次，分子標(biāo)記輔助選擇在改良數(shù)量性狀方面的應(yīng)用不如最初設(shè)想的那么廣泛，主要是因?yàn)樗巨r(nóng)藝性狀基因發(fā)掘不足，大量的遺傳信息處于零散的狀態(tài)，而且對(duì)不同遺傳背景和環(huán)境條件下的QTL研究不夠系統(tǒng)全面，如今已定位的DNA分子標(biāo)記與目的基因間的遺傳距離多數(shù)超過(guò)5.0 cmol，QTL定位的準(zhǔn)確性和精確度達(dá)不到分子標(biāo)記輔助選擇的要求。針對(duì)這些問(wèn)題，在今后的育種工作中所構(gòu)建的群體要盡可能既是遺傳研究群體，又是育種群體實(shí)現(xiàn)基因定位與育種同步進(jìn)行；尋找與目標(biāo)基因緊密連鎖的兩側(cè)的分子標(biāo)記；充分發(fā)掘QTL的信息等。

我們相信，在不遠(yuǎn)的將來(lái)，隨著分子生物學(xué)新成果和新技術(shù)的不斷出現(xiàn)以及基因組學(xué)、生物信息學(xué)等研究的深入發(fā)展，分子標(biāo)記輔助選擇將會(huì)在品種改良中大展宏圖，這必將對(duì)我國(guó)的作物改良作出革命性的貢獻(xiàn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]Khush G S. What it will take to feed 5.0 billion rice consumers in 2030[J]. Plant Mol Biol，2005，59（1）：1-6.

[2]方宣鈞，吳為人，李維明.作物DNA標(biāo)記輔助選擇育種[M]. 北京：科學(xué)出版社，2001：11-84.

[3]周宇爝. 分子標(biāo)記發(fā)展簡(jiǎn)史[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2009（11）：264-270.

[4]白玉. DNA分子標(biāo)記技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（24）：7422-7425.

[5]關(guān)強(qiáng)，張?jiān)聦W(xué)，徐香玲，等. DNA分子標(biāo)記的研究進(jìn)展及幾種新型分子標(biāo)記技術(shù)[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（1）：102-104.

[6]阮成江，何禎祥，欽佩. 中國(guó)植物遺傳連鎖圖譜構(gòu)建研究進(jìn)展[J]. 西北植物學(xué)報(bào)，2002，22（6）：1526-1536.

[7]賈繼增. 分子標(biāo)記種質(zhì)資源鑒定和分子標(biāo)記育種[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，1996，29（4）：2-11.

[8]何風(fēng)華. DNA分子標(biāo)記及其在植物遺傳育種上的應(yīng)用[J]. 生物學(xué)教學(xué)，2004，29（1）：8-10.

[9]白建榮，郭秀榮，侯變英. 分子標(biāo)記的類(lèi)型、特點(diǎn)及在育種中的應(yīng)用[J]. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，1999，27（4）：33-38.

[10]王軍，謝皓，郭二虎，等. DNA分子標(biāo)記及其在谷子遺傳育種中的應(yīng)用[J]. 北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，20（1）：76-80.

[11]王曉梅，楊秀榮. DNA分子標(biāo)記研究進(jìn)展[J]. 天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2000，7（1）：21-24.

[12]吳春太，葉水英，李雄，等. 新型的分子標(biāo)記——SNPs[J]. 景德鎮(zhèn)高專(zhuān)學(xué)報(bào)，2003，18（4）：8-9，49.

[13]鄒喻蘋(píng)，葛頌. 新一代分子標(biāo)記——SNPs及其應(yīng)用[J]. 生物多樣性，2003，11（5）：370-382.

[14]Dudley J W. Molecular markers in plant improvement：manipulation of genes affecting quantitative traits[J]. Crop Science，1993（33）：660-668.

[15]Lee M. DNA markers and plant breeding programs[J]. Advances in Agronomy，1995，55：265-344.

[16]Mohan M，Nair S，Bhagwat A，et al. Genome mapping molecular markers and marker-assisted selection in crop plants[J]. Mol Breeding，1997（3）：87-103.

[17]張文龍，陳志偉，楊文鵬，等. 分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)及其在作物育種上的應(yīng)用研究[J]. 種子，2008，27（4）：39-43.

[18]劉巧泉，蔡秀玲，李錢(qián)峰，等. 分子標(biāo)記輔助選擇改良特青及其雜交稻米的蒸煮與食味品質(zhì)[J]. 作物學(xué)報(bào)，2006，32（1）：64-69.

[19]周屹峰，趙霏，任三娟，等. 具中等直鏈淀粉含量的秈型優(yōu)質(zhì)不育系浙農(nóng)3A的選育[J]. 雜交水稻，2010，25（4）：14-17，95.

[20]許勇，倪大虎，陸徐忠，等. 分子標(biāo)記輔助改良雜交稻協(xié)優(yōu)57及其父母本的蒸煮食味品質(zhì)[J]. 生物學(xué)雜志，2011，28（2）：9-12.

[21]夏明元，李進(jìn)波，張建華，等. 利用分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)選育具有中等直鏈淀粉含量的早稻品種[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，23（2）：183-186.

[22]李浩杰，李平，高方遠(yuǎn)，等. SSR標(biāo)記輔助改良岡46B直鏈淀粉含量的研究[J]. 作物學(xué)報(bào)，2004，30（11）：1159-1163.

[23]Chen T，Zhang Y D，Zhu Z，et al. Research progress of resistant genetics and breeding against rice stripe disease[J]. Jiangsu Agric Sci，2006（2）：1-4.

[24]Washio O，Toriyama K，Ezuka A，et al. Studies on the breeding of rice varieties resistant to stripe disease：Ⅱ. genetic study on resistance to stripe disease in Japanese upland rice[J]. Ikushugaku zasshi，1968，18（2）：96-101.

[25]林含新，林奇田，魏太云，等. 水稻品種對(duì)水稻條紋葉枯病毒及其介體灰飛虱的抗性鑒定[J]. 福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，29（4）：452-455.

[26]Nemoto H，Ishikawa K，Shimura E. The resistance to rice stripe virus and small brown plant hopper in rice variety IR50[J]. Breeding Science，1994，44（1）：13-18.

[27]陳濤，朱鎮(zhèn)，張亞?wèn)|，等. 水稻品種愛(ài)知106抗條紋葉枯病性的遺傳分析[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2007，23（1）：11-14.

[28]周彤，范永堅(jiān)，程兆榜，等. 水稻抗條紋葉枯病鑒定方法的研究[J]. 植物保護(hù)，2008，34（6）：77-80.

[29]邢祖頤，何家齊，劉志武，等. 秈粳稻雜交種的研究——抗條紋葉枯病育種[J]. 作物學(xué)報(bào)，1985，11（1）：1-7.

[30]Hayano-Saito Y，Tsuji T，F(xiàn)ujii K，et al.Localization of the rice stripe disease resistance gene，Stv-bi，by graphical genotyping and linkage analyses with molecular markers[J]. Theoretical and Applied Genetics，1998，96（8）：1044-1049.

[31]Maeda H，Nemoto H，Yagi T，et al. QTL analysis for rice stripe disease resistance using recombinant inbred lines（RILs）derived from crossing between Mlilyang23 and Akihikari[C]//Prospects of rice genetics and breeding for the 21st Century-Paper collection of international rice genetics and breeding symposium，Beijing：China Agricultural Science Technology Press，1999：53-57.

[32]Hayano-Saito Y，Satio K，Nakamura S，et al. Fine physical mapping of the rice stripe resistance gene locus，Stv-bi[J]. Theoretical and Applied Genetics，2000，101：59-63.

[33]丁秀蘭，江玲，張迎信，等. 利用回交重組自交群體檢測(cè)水稻條紋葉枯病抗性位點(diǎn)[J]. 作物學(xué)報(bào)，2005，31（8）：1041-1046.

[34]潘學(xué)彪，梁國(guó)華，陳宗祥，等. 江蘇抗水稻條紋葉枯病育種策略[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005（5）：22-23.

[35]潘學(xué)彪，陳宗祥，左示敏，等. 以分子標(biāo)記輔助選擇育成抗條紋葉枯病水稻新品種“武陵粳1號(hào)”[J]. 作物學(xué)報(bào)，2009，35（10）：1851-1857.

[36]陳峰，張士永，朱文銀，等. 分子標(biāo)記輔助選擇改良圣稻13和圣稻14的條紋葉枯病抗性[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，43（16）：3271-3279.

[37]李波. 分子標(biāo)記輔助選擇改良粳稻條紋葉枯病抗性[D]. 揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué)，2008.

[38]馬寧. 水稻抗條紋葉枯病分子標(biāo)記輔助選擇育種研究[D]. 揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué)，2008.

[39]毛凌華，聶元元，李瑤，等. 水稻白葉枯病抗性基因及其分子標(biāo)記輔助選擇育種研究進(jìn)展[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，23（8）：115-117.

[40]王興春，楊長(zhǎng)登，李西明，等. 分子標(biāo)記輔助選擇與花藥培養(yǎng)相結(jié)合快速聚合水稻白葉枯病抗性基因[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2004，18（1）：7-10.

[41]薛慶中，張能義，熊兆飛，等. 應(yīng)用分子標(biāo)記輔助選擇培育抗白葉枯病水稻恢復(fù)系[J]. 浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1998，24（6）：19-20.

[42]彭應(yīng)財(cái)，李文宏，樊葉揚(yáng)，等. 利用分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)育成抗白葉枯病雜交稻協(xié)優(yōu)218[J]. 雜交水稻，2003，18（5）：5-7.

[43]蘭艷榮，王俊義，王弋，等. 分子標(biāo)記輔助選擇改良水稻光溫敏核不育系華201S的白葉枯病抗性[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2011，25（2）：169-174.

[44]楊勤忠，林 菲，馮淑杰，等. 水稻稻瘟病抗性基因的分子定位及克隆研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，42（5）：1601-1615.

[45]吳俊，劉雄倫，戴良英，等. 水稻廣譜抗稻瘟病基因研究進(jìn)展[J]. 生命科學(xué)，2007，19（2）：233-238.

[46]王忠華，賈育林，吳殿星，等. 水稻抗稻瘟病基因Pi-ta的分子標(biāo)記輔助選擇[J]. 作物學(xué)報(bào)，2004，30（12）：1259-1265.

[47]劉士平，李信，汪朝陽(yáng)，等. 利用分子標(biāo)記輔助選擇改良珍汕97的稻瘟病抗性[J]. 植物學(xué)報(bào)，2003，45（11）：1346-1350.

[48]倪大虎，易成新，李莉，等. 利用分子標(biāo)記輔助選擇聚合水稻基因Xa21和Pi9（t）[J]. 分子植物育種，2005，3（3）：329-334.

[49]陳建民，付志英，權(quán)寶權(quán)，等. 分子標(biāo)記輔助培育雙抗稻瘟病和白葉枯病雜交稻恢復(fù)系[J]. 分子植物育種，2009，7（3）：465-470.

[50]陳志偉，官華忠，吳為人，等. 稻瘟病抗性基因Pi-1連鎖SSR標(biāo)記的篩選和應(yīng)用[J]. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2005，34（1）：74-77.

[51]楊震，彭選明，彭偉正，等. 水稻褐飛虱抗性基因研究進(jìn)展[J]. 生物技術(shù)通報(bào)，2011（8）：15-20.

[52]胡杰，李信，吳昌軍，等. 利用分子標(biāo)記輔助選擇改良雜交水稻的褐飛虱和稻瘟病抗性[J]. 分子植物育種，2010，8（6）：1180-1187.

[53]李信. 應(yīng)用分子標(biāo)記輔助選擇改良水稻對(duì)稻瘟病、褐飛虱的抗性[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[54]梁云濤. 水稻抗白葉枯病基因Xa30（t）分子標(biāo)記定位和抗病蟲(chóng)基因聚合研究[D]. 南寧：廣西大學(xué)，2008：1-69.

[55]李進(jìn)波，夏明元，戚華雄，等. 水稻抗褐飛虱基因Bph14和Bph15的分子標(biāo)記輔助選擇[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，9（10）：2132-2137.

[56]孫榮科，陳喬，李孝瓊，等. 分子標(biāo)記輔助聚合抗褐飛虱基因選育雜交水稻抗性品種初步研究[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，40（6）：654-657.

[57]柳武革，王豐，肖漢祥，等. 利用分子標(biāo)記輔助選擇改良水稻恢復(fù)系的稻癭蚊抗性[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2010，24（6）：581-586.

[58]黃炳超，肖漢祥，呂利華，等. 抗稻癭蚊新基因Gm6在分子標(biāo)記抗性育種中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，37（1）：76-80.

[59]楊子賢，姜恭好，徐才國(guó)，等. 利用分子標(biāo)記輔助選擇改良9311對(duì)白葉枯病和螟蟲(chóng)抗性[J]. 分子植物育種，2004，2（4）：473-480.

[60]沈圣泉，舒慶堯，吳殿星，等. 利用分子標(biāo)記輔助選擇育成抗螟蟲(chóng)秈稻不育系科龍A[J]. 雜交水稻，2008，23（2）：15-18.

[61]茍作旺，楊芳萍，楊文雄.作物分子標(biāo)記輔助選擇育種研究進(jìn)展[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)科技，2007（1）：21-24.

[62]章琦. 水稻白葉枯病抗性基因鑒定進(jìn)展及其利用[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2005，19（5）：453-459.

[63]張啟軍，呂川根，虞德容，等. 水稻抗病基因聚合育種研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2008，24（8）：57-62.

[64]王春連，戚華雄，潘海軍，等. 水稻抗白葉枯病基因Xa23的EST標(biāo)記及其在分子育種上的利用[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005，38（10）：1996-2001.

[65]Yoshimura S，Yoshinmura A，Iwata N，et al. Tagging and combining bacterial blight resistance genes in rice using RAPD and RFLP markers[J]. Molecular Breeding，1995，1（4）：375-387.

[66]Hittalmani S，Parco A，Mew T V，et al. Fine mapping and DNA marker-assisted pyramiding of the three major genes for blast resistance in rice[J]. Theoretical and Applied Genetics，2000，100：1121-1128.

[67]Narayanan N N，Baisakh N，Oliva N P，et al.Molecular breeding：marker-assisted selection combined with biolistic transformation for blast and bacterial blight resistance in Indica rice（cv. CO39）[J]. Mol Breeding，2004，14（1）：61-71.

[68]陳圣，倪大虎，陸徐忠，等. 分子標(biāo)記輔助選擇聚合Xa23、Pi9和Bt基因[J]. 生物學(xué)雜志，2009，26（3）：7-9.

[69]莊杰云，鄭康樂(lè). 水稻產(chǎn)量性狀遺傳機(jī)理及分子標(biāo)記輔助高產(chǎn)育種[J]. 生物技術(shù)通報(bào)，1998（1）：1-9.

[70]程式華，莊杰云，曹立勇，等. 超級(jí)雜交稻分子育種研究[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2004，18（5）：3-9.

[71]楊益善，鄧啟云，陳立云，等. 野生稻高產(chǎn)QTL的分子標(biāo)記輔助育種進(jìn)展[J]. 雜交水稻，2005，20（5）：1-5.

[72]Tanksley S D，Nelson J C. Advanced backcross QTL analysis：a method for the simultaneous discovery and transfer of valuable QTLs from unadapted germplasm into elite breeding lines[J]. Theoretical and Applied Genetics，1996，92（2）：191-203.

[73]Zhang Q. Strategies for developing Green Super Rice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2007，104（42）：16402-16409.

[74]聶元元，蔡耀輝，付紅，等. 栽培稻抗旱性相關(guān)性狀QTL定位及分子育種研究進(jìn)展[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，23（7）：89-92，101.

[75]Atlin G N，Kumar R，Venuprasad R. Genetic analysis of rain fed lowland rice drought tolerance under naturally-occurring stress in eastern India：Heritability and QTL effects[J]. Field Crops Research，2007，103（1）：42-52.

[76]Li Z K，Luo L J，Mei H W，et al.A “defeated” rice resistance gene acts as a QTL against a virulent strain of Xanthomonas oryzae pv. oryzae[J]. Mol Gen Genet，1999，261（1）：58-63.

[77]劉立峰.旱稻抗旱相關(guān)性狀QTL的分子標(biāo)記輔助選擇研究[D]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005.

[78]Zhang Z H，Su L，Li W，et al. A major QTL conferring cold tolerance at the early seedling stage using recombinant inbred lines of rice（Oryza sativa L.）[J]. Plant Science，2005，168（2）：527-534.

[79]劉之熙，劉云開(kāi)，詹慶才. 水稻孕穗期耐冷基因的CAPs標(biāo)記輔助選擇[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2008，34（2）：127-131.

[80]陳永華，嚴(yán)欽泉，肖國(guó)櫻. 水稻耐淹澇的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2005，21（12）：151-153，159.

[81]Fukao T，Bailey-Serres J. Submergence tolerance conferred by Sub1A is mediated by SLR1 and SLRL1 restriction of gibberellin responses in rice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2008，105（43）：16814-16819.

[82]胡時(shí)開(kāi)，陶紅劍，錢(qián)前，等. 水稻耐鹽性的遺傳和分子育種的研究進(jìn)展[J]. 分子植物育種，2010，8（4）：629-640.

[83]程朝平，劉成德，楊德衛(wèi)，等. 分子標(biāo)記輔助選擇秈型直立恢復(fù)系[J]. 分子植物育種，2011，9（5）：561-566.

[84]杜雪樹(shù)，夏明元，李進(jìn)波，等. 分子標(biāo)記輔助選擇選育香稻恢復(fù)系[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28（6）：651-654.

[68]陳圣，倪大虎，陸徐忠，等. 分子標(biāo)記輔助選擇聚合Xa23、Pi9和Bt基因[J]. 生物學(xué)雜志，2009，26（3）：7-9.

[69]莊杰云，鄭康樂(lè). 水稻產(chǎn)量性狀遺傳機(jī)理及分子標(biāo)記輔助高產(chǎn)育種[J]. 生物技術(shù)通報(bào)，1998（1）：1-9.

[70]程式華，莊杰云，曹立勇，等. 超級(jí)雜交稻分子育種研究[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2004，18（5）：3-9.

[71]楊益善，鄧啟云，陳立云，等. 野生稻高產(chǎn)QTL的分子標(biāo)記輔助育種進(jìn)展[J]. 雜交水稻，2005，20（5）：1-5.

[72]Tanksley S D，Nelson J C. Advanced backcross QTL analysis：a method for the simultaneous discovery and transfer of valuable QTLs from unadapted germplasm into elite breeding lines[J]. Theoretical and Applied Genetics，1996，92（2）：191-203.

[73]Zhang Q. Strategies for developing Green Super Rice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2007，104（42）：16402-16409.

[74]聶元元，蔡耀輝，付紅，等. 栽培稻抗旱性相關(guān)性狀QTL定位及分子育種研究進(jìn)展[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，23（7）：89-92，101.

[75]Atlin G N，Kumar R，Venuprasad R. Genetic analysis of rain fed lowland rice drought tolerance under naturally-occurring stress in eastern India：Heritability and QTL effects[J]. Field Crops Research，2007，103（1）：42-52.

[76]Li Z K，Luo L J，Mei H W，et al.A “defeated” rice resistance gene acts as a QTL against a virulent strain of Xanthomonas oryzae pv. oryzae[J]. Mol Gen Genet，1999，261（1）：58-63.

[77]劉立峰.旱稻抗旱相關(guān)性狀QTL的分子標(biāo)記輔助選擇研究[D]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005.

[78]Zhang Z H，Su L，Li W，et al. A major QTL conferring cold tolerance at the early seedling stage using recombinant inbred lines of rice（Oryza sativa L.）[J]. Plant Science，2005，168（2）：527-534.

[79]劉之熙，劉云開(kāi)，詹慶才. 水稻孕穗期耐冷基因的CAPs標(biāo)記輔助選擇[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2008，34（2）：127-131.

[80]陳永華，嚴(yán)欽泉，肖國(guó)櫻. 水稻耐淹澇的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2005，21（12）：151-153，159.

[81]Fukao T，Bailey-Serres J. Submergence tolerance conferred by Sub1A is mediated by SLR1 and SLRL1 restriction of gibberellin responses in rice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2008，105（43）：16814-16819.

[82]胡時(shí)開(kāi)，陶紅劍，錢(qián)前，等. 水稻耐鹽性的遺傳和分子育種的研究進(jìn)展[J]. 分子植物育種，2010，8（4）：629-640.

[83]程朝平，劉成德，楊德衛(wèi)，等. 分子標(biāo)記輔助選擇秈型直立恢復(fù)系[J]. 分子植物育種，2011，9（5）：561-566.

[84]杜雪樹(shù)，夏明元，李進(jìn)波，等. 分子標(biāo)記輔助選擇選育香稻恢復(fù)系[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28（6）：651-654.

[68]陳圣，倪大虎，陸徐忠，等. 分子標(biāo)記輔助選擇聚合Xa23、Pi9和Bt基因[J]. 生物學(xué)雜志，2009，26（3）：7-9.

[69]莊杰云，鄭康樂(lè). 水稻產(chǎn)量性狀遺傳機(jī)理及分子標(biāo)記輔助高產(chǎn)育種[J]. 生物技術(shù)通報(bào)，1998（1）：1-9.

[70]程式華，莊杰云，曹立勇，等. 超級(jí)雜交稻分子育種研究[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2004，18（5）：3-9.

[71]楊益善，鄧啟云，陳立云，等. 野生稻高產(chǎn)QTL的分子標(biāo)記輔助育種進(jìn)展[J]. 雜交水稻，2005，20（5）：1-5.

[72]Tanksley S D，Nelson J C. Advanced backcross QTL analysis：a method for the simultaneous discovery and transfer of valuable QTLs from unadapted germplasm into elite breeding lines[J]. Theoretical and Applied Genetics，1996，92（2）：191-203.

[73]Zhang Q. Strategies for developing Green Super Rice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2007，104（42）：16402-16409.

[74]聶元元，蔡耀輝，付紅，等. 栽培稻抗旱性相關(guān)性狀QTL定位及分子育種研究進(jìn)展[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，23（7）：89-92，101.

[75]Atlin G N，Kumar R，Venuprasad R. Genetic analysis of rain fed lowland rice drought tolerance under naturally-occurring stress in eastern India：Heritability and QTL effects[J]. Field Crops Research，2007，103（1）：42-52.

[76]Li Z K，Luo L J，Mei H W，et al.A “defeated” rice resistance gene acts as a QTL against a virulent strain of Xanthomonas oryzae pv. oryzae[J]. Mol Gen Genet，1999，261（1）：58-63.

[77]劉立峰.旱稻抗旱相關(guān)性狀QTL的分子標(biāo)記輔助選擇研究[D]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005.

[78]Zhang Z H，Su L，Li W，et al. A major QTL conferring cold tolerance at the early seedling stage using recombinant inbred lines of rice（Oryza sativa L.）[J]. Plant Science，2005，168（2）：527-534.

[79]劉之熙，劉云開(kāi)，詹慶才. 水稻孕穗期耐冷基因的CAPs標(biāo)記輔助選擇[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2008，34（2）：127-131.

[80]陳永華，嚴(yán)欽泉，肖國(guó)櫻. 水稻耐淹澇的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2005，21（12）：151-153，159.

[81]Fukao T，Bailey-Serres J. Submergence tolerance conferred by Sub1A is mediated by SLR1 and SLRL1 restriction of gibberellin responses in rice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2008，105（43）：16814-16819.

[82]胡時(shí)開(kāi)，陶紅劍，錢(qián)前，等. 水稻耐鹽性的遺傳和分子育種的研究進(jìn)展[J]. 分子植物育種，2010，8（4）：629-640.

[83]程朝平，劉成德，楊德衛(wèi)，等. 分子標(biāo)記輔助選擇秈型直立恢復(fù)系[J]. 分子植物育種，2011，9（5）：561-566.

[84]杜雪樹(shù)，夏明元，李進(jìn)波，等. 分子標(biāo)記輔助選擇選育香稻恢復(fù)系[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28（6）：651-654.