梁旭鋒等

摘 要：

選取德國DR公司生產(chǎn)的28種除草劑標準物質，將其配制成混合標準溶液后轉移至20 mL帶聚四氟乙烯襯蓋的棕色螺口樣品瓶中，于-18℃避光貯存，采用液相色譜串聯(lián)質譜法測試各組分量值隨貯存時間的變化。結果表明：在90天內，標準物質各組分量值的標準偏差在12～73 μg/L范圍內，最大相對標準偏差為3.04%（n=5），測量結果的相對不確定度小于5.60%。在置信度為95%時，標準物質各組分量值在（1 000±113） μg/L范圍內，測量的偏差不顯著。在不超過標準物質的有效期內，稀釋混合分裝后的標準物質可保存90天。

關鍵詞：除草劑；混合標準溶液；標準物質；穩(wěn)定性

中圖分類號：TQ450.2+1 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2014）04-0106-04

標準物質是現(xiàn)代殘留分析檢測整體質量控制過程中非常關鍵的因素。分析檢測用標準物質在管理、儲運、使用過程中因溫度、濕度、光線、pH值、溶液濃度、時間、稀釋溶液性質、混合物的數(shù)量等一系列因素的影響而表現(xiàn)出不同的穩(wěn)定性，由于以上因素導致的降解或化合物之間的相互作用均有可能造成檢測結果的錯誤。采用質譜方法進行多殘留檢測是近年來研究熱點[1～6]。系統(tǒng)化地研究不同種類的標準物質在不同狀態(tài)下的穩(wěn)定性，無論對實驗室分析檢測質量控制，標準物質的生產(chǎn)、研發(fā)、制備還是加強農(nóng)產(chǎn)品質量安全關鍵控制技術均具有重要意義。

通過查閱文獻，國內外對農(nóng)藥標準物質穩(wěn)定性研究的文章較少[7～12]。實驗室對該類標準物質的使用，首選的是固體標準物質，大多數(shù)采用直接稱量法配制儲備液，然后混合稀釋配制成混合溶液，最后采用體積比稀釋法配制工作溶液，一次用量少時僅為幾十微升，剩余的絕大部分混合溶液通常轉移至20 mL樣品瓶或其他小體積容器中密閉低溫保存，作為儲備液繼續(xù)使用。這種密封方法從嚴格意義上不能滿足標準物質的貯存要求，會因溶劑揮發(fā)而使剩余的混合溶液不能繼續(xù)使用[13]。但在短期內，該類混合溶液仍能維持其作為標準物質的計量特性[12]。本文針對分析檢測實驗室對除草劑標準物質的使用現(xiàn)狀，依據(jù)標準物質的穩(wěn)定性檢驗方法[14]，選用德國DR公司生產(chǎn)的28種除草劑標準物質，稀釋混合，在特定條件下貯存，采用液相色譜串聯(lián)質譜法對其使用時效進行評價。

1 試驗方法

1.1 儀器

液相色譜串聯(lián)質譜儀（Agilent 1100-API 4000）；電子天平（美國METTLER TOLEDO公司XP105）； 2、20 mL帶四氟乙烯襯蓋的棕色螺口樣品瓶（美國Agilent公司）；25 mL容量瓶（CNW公司）；10、100 μL微量注射器（德國Eppendorf公司）。

1.2 標準物質和主要試劑

28種除草劑標準物質均購自德國DR公司，純度大于92.5%，不確定度為0.5%，證書提供的有效期為包裝后2年；甲醇、乙腈均為色譜純（購自美國TEDIA公司）；甲酸、乙酸銨均為優(yōu)級純（購自德國CNW公司）；水為GB/T 6682-1992規(guī)定的一級水。

5 mmol/L乙酸銨+0.1%甲酸水溶液：稱取385.4 mg無水乙酸銨到1 000 mL容量瓶中，加入1 mL甲酸用水稀釋至刻度，超聲混勻。

1.3 標準溶液的配制

單標儲備溶液的配制：分別稱取經(jīng)折算適量標準物質（精確至0.1mg），分別用甲醇溶解定容至25 mL容量瓶中，溶液濃度為100 mg/L，-18℃冰箱保存。

混合溶液的配制：分別移取250 μL儲備液，混合并用甲醇定容至25 mL，各組分濃度均為1 mg/L，轉移至20 mL棕色樣品瓶中，擰緊瓶蓋，貼好標簽作為混合溶液于-18℃保存。以此作為短期穩(wěn)定性評價對象。

評價樣品配制：分別在不同保存時間取出混合溶液，同時取出5個2 mL樣品瓶，準確加入990 μL甲醇，擰緊瓶蓋；分別用10 μL微量注射器依次準確移取10 μL的混合溶液至樣品瓶中，迅速換蓋后搖勻。上述混合溶液稱之為評價樣品，評價樣品濃度為10 μg/L。

1.4 儀器測定

1.4.1 色譜條件 色譜柱：Phenomenex C18， 2.6 μm， 100×2.10 mm ；流速：250 μL/min；柱溫：43℃；進樣量：10 μL；流動相A：乙腈；流動相B：5 mmol/L乙酸銨+0.1%甲酸水溶液。洗脫條件見表1。

2 結果與討論

2.1 標準物質各組分量值隨貯存時間的變化

采用液相色譜串聯(lián)質譜法對其實效性進行評價。儲存7、15、30、60、90、120天后取出，測得各

組分量值隨貯存時間變化的曲線圖，見表3。由表可知，二丙烯草胺、除草定、丁草胺等隨著貯存時間的延長其量值基本保持穩(wěn)定，而氟硫草定、氟吡酰草胺和肟草酮等，其量值呈逐漸增大的趨勢。這是由于氟硫草定等組分沸點較高，而溶劑甲醇沸點較低，低沸點組分具有較高的蒸汽壓，易蒸發(fā)逃逸。

2.2 測試方法的精密度及不確定度

各組分經(jīng)5次測量的標準偏差在12～73 μg/L范圍內，最大相對標準偏差為3.04%。采用χ2檢驗對測試方法的精密度進行評價[17]，在置信度為95%時，測試方法滿足標準物質評價測試方法的精密度要求[14]。

依據(jù)相關的不確定度評定方法[12，18～21]計算，該類最大合成相對不確定度為0.056。計算所得的數(shù)值，是對所有測量不確定度分量做最大估計得出的，具體到每一組分的不確定度應較之要小[12]。該值與標準物質證書提供的相對不確定度5%基本一致，表明采用評價方法的準確度滿足標準物質穩(wěn)定性檢驗要求[14]。

2.3 標準物質各組分量值的偏差評估

依據(jù)文獻[12]對標準物質各組分量值的偏差評估，計算出在置信度為95%時，標準物質各組分量值在1 000±113 μg/L范圍內時，測量的偏差不顯著。將此范圍作為標準物質制成混合溶液再密封貯存的時效性判據(jù)。據(jù)表3，除草劑混合標準溶液在前90天，各組分量值在967～1 085 μg/L，表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性；而到了120天，有10個特性量（氟硫草定、氟吡酰草胺等）的值超過了1 113 μg/L，達到了1 000±113 μg/L范圍的下限。表明該標準物質稀釋混合分裝后在規(guī)定條件下可保存90天。endprint

3 結論

對28種除草劑混合標準溶液配制后再密封的短期穩(wěn)定性評價表明，標準物質稀釋混合分裝后再密封于20 mL聚四氟乙烯襯蓋棕色螺口樣品瓶，于-18℃避光貯存，在標準物質的有效期內，隨著貯存時間的延長，沸點較低的組分，如二丙烯草胺、除草定、丁草胺等，其量值基本保持穩(wěn)定，而沸點較高的組分，如氟硫草定、氟吡酰草胺和肟草酮等，其量值呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢。由于溶劑甲醇沸點較低，低沸點組分具有較高的蒸汽壓，溶劑蒸發(fā)逃逸引起溶質濃縮是標準物質的特性量值增大的主要因素。在標準物質的有效期內，置信度為95%時，甲醇作為溶劑于-18℃避光貯存可保存90天。

參 考 文 獻：

[1] 中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 19648-2006 水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法[S].

[2] 中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 20769-2008 水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法[S].

[3] Wang J，Leung D，Determination of 142 pesticides in fruit- and vegetable- based infant foods by liquid chromatography/electrospray ionization-tandem mass spectrometry and estimation of measurement uncertainty[J]. J. AOAC Int.，2009，92（1）：279-301.

[4] Avramides E J.Long-term stability of pure standards and stock standard solutions for the determination of pesticide residues using gas chromatography[J].J. Chromatogr. A，2005，1080（2）：166-176.

[5] 嚴錦申，李俊麗，趙莉，等. 農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀及檢測技術的研究進展[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學，2013，45（6）：134-137，152.

[6] 胡梅，王駿，張卉，等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質譜測定蒜苔中多菌靈和噻菌靈的殘留量[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學，2010，4：89-91.

[7] 楊麗莉，母應鋒，胡恩宇，等.有機磷農(nóng)藥標準溶液穩(wěn)定性的研究[J].環(huán)境科學與管理，2006，31（8）：173-175.

[8] 繆德仁，劉玉龍，張曉然，等.多環(huán)芳烴類標準物質使用時效性評價[J].巖礦測試，2010，29（2）：109-112.

[9] 田呈瑞，田洪磊，蔡靜.濃縮果汁中甲胺磷殘留農(nóng)藥穩(wěn)定性的研究[J].食品工業(yè)科技，2005，26（3）：70-71.

[10]陸繼偉，苗水，毛秀紅，等.氣相色譜-質譜聯(lián)用法分析50種農(nóng)藥混合標準品溶液的穩(wěn)定性[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011，21（8）：1854-1857，1860.

[11]丁錦春，黃向榮，蔡躍.氣相色譜分析有機氯農(nóng)藥混合標準溶液的穩(wěn)定性[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2000，10 （3）： 295-296.

[12]劉玉龍，夏凡，張洪志.揮發(fā)性有機污染物標準物質使用的短期穩(wěn)定性評價[J].巖礦測試，2012，31（4）：647-652.

[13]邵明武，湯樺，陳大舟.關于多組分痕量有機污染物溶液標準物質研制的體會[J].計量技術，2007（3）：61-63.

[14]國家標準物質研究中心.JJG 1006-94，一級標準物質技術規(guī)范[S].

[15]Lide D R.CRC Handbook of chemistry and physics[M].89th Edition （Internet Version 2009）. Boca Raton，F(xiàn)L： CRC Press/Taylor and Francis，2009.

[16]全國認證認可標準化技術委員會.GB-T 27404-2008 實驗室質量控制規(guī)范食品理化檢測[S].

[17]Roper P， Burke S， Lawn R.標準物質及其在分析化學中的應用[M].李紅梅，劉 菲，李孟婉，譯.北京：中國計量出版社，2006.

[18]盧曉華.標準物質在化學測量結果不確定度評定中的應用舉例[J].中國計量，2008，1：68-69.

[19]中國合格評定國家認可委員會.CNAS-GL06：2006化學分析中不確定度的評估指南[S].

[20]陳曉翔，鄒永德，王長安，等.液相色譜串聯(lián)質譜法測定動物源食品中克倫特羅殘留量的不確定度評定[J].計量學報，2012，33（4）：372-376.

[21]馬康，楊亞楠，邢金京，等.誘惑紅溶液標準物質的研制及不確定度評定[J].分析測試學報， 2012，31（3）：296-301.endprint

3 結論

對28種除草劑混合標準溶液配制后再密封的短期穩(wěn)定性評價表明，標準物質稀釋混合分裝后再密封于20 mL聚四氟乙烯襯蓋棕色螺口樣品瓶，于-18℃避光貯存，在標準物質的有效期內，隨著貯存時間的延長，沸點較低的組分，如二丙烯草胺、除草定、丁草胺等，其量值基本保持穩(wěn)定，而沸點較高的組分，如氟硫草定、氟吡酰草胺和肟草酮等，其量值呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢。由于溶劑甲醇沸點較低，低沸點組分具有較高的蒸汽壓，溶劑蒸發(fā)逃逸引起溶質濃縮是標準物質的特性量值增大的主要因素。在標準物質的有效期內，置信度為95%時，甲醇作為溶劑于-18℃避光貯存可保存90天。

參 考 文 獻：

[1] 中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 19648-2006 水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法[S].

[2] 中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 20769-2008 水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法[S].

[3] Wang J，Leung D，Determination of 142 pesticides in fruit- and vegetable- based infant foods by liquid chromatography/electrospray ionization-tandem mass spectrometry and estimation of measurement uncertainty[J]. J. AOAC Int.，2009，92（1）：279-301.

[4] Avramides E J.Long-term stability of pure standards and stock standard solutions for the determination of pesticide residues using gas chromatography[J].J. Chromatogr. A，2005，1080（2）：166-176.

[5] 嚴錦申，李俊麗，趙莉，等. 農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀及檢測技術的研究進展[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學，2013，45（6）：134-137，152.

[6] 胡梅，王駿，張卉，等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質譜測定蒜苔中多菌靈和噻菌靈的殘留量[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學，2010，4：89-91.

[7] 楊麗莉，母應鋒，胡恩宇，等.有機磷農(nóng)藥標準溶液穩(wěn)定性的研究[J].環(huán)境科學與管理，2006，31（8）：173-175.

[8] 繆德仁，劉玉龍，張曉然，等.多環(huán)芳烴類標準物質使用時效性評價[J].巖礦測試，2010，29（2）：109-112.

[9] 田呈瑞，田洪磊，蔡靜.濃縮果汁中甲胺磷殘留農(nóng)藥穩(wěn)定性的研究[J].食品工業(yè)科技，2005，26（3）：70-71.

[10]陸繼偉，苗水，毛秀紅，等.氣相色譜-質譜聯(lián)用法分析50種農(nóng)藥混合標準品溶液的穩(wěn)定性[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011，21（8）：1854-1857，1860.

[11]丁錦春，黃向榮，蔡躍.氣相色譜分析有機氯農(nóng)藥混合標準溶液的穩(wěn)定性[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2000，10 （3）： 295-296.

[12]劉玉龍，夏凡，張洪志.揮發(fā)性有機污染物標準物質使用的短期穩(wěn)定性評價[J].巖礦測試，2012，31（4）：647-652.

[13]邵明武，湯樺，陳大舟.關于多組分痕量有機污染物溶液標準物質研制的體會[J].計量技術，2007（3）：61-63.

[14]國家標準物質研究中心.JJG 1006-94，一級標準物質技術規(guī)范[S].

[15]Lide D R.CRC Handbook of chemistry and physics[M].89th Edition （Internet Version 2009）. Boca Raton，F(xiàn)L： CRC Press/Taylor and Francis，2009.

[16]全國認證認可標準化技術委員會.GB-T 27404-2008 實驗室質量控制規(guī)范食品理化檢測[S].

[17]Roper P， Burke S， Lawn R.標準物質及其在分析化學中的應用[M].李紅梅，劉 菲，李孟婉，譯.北京：中國計量出版社，2006.

[18]盧曉華.標準物質在化學測量結果不確定度評定中的應用舉例[J].中國計量，2008，1：68-69.

[19]中國合格評定國家認可委員會.CNAS-GL06：2006化學分析中不確定度的評估指南[S].

[20]陳曉翔，鄒永德，王長安，等.液相色譜串聯(lián)質譜法測定動物源食品中克倫特羅殘留量的不確定度評定[J].計量學報，2012，33（4）：372-376.

[21]馬康，楊亞楠，邢金京，等.誘惑紅溶液標準物質的研制及不確定度評定[J].分析測試學報， 2012，31（3）：296-301.endprint

3 結論

對28種除草劑混合標準溶液配制后再密封的短期穩(wěn)定性評價表明，標準物質稀釋混合分裝后再密封于20 mL聚四氟乙烯襯蓋棕色螺口樣品瓶，于-18℃避光貯存，在標準物質的有效期內，隨著貯存時間的延長，沸點較低的組分，如二丙烯草胺、除草定、丁草胺等，其量值基本保持穩(wěn)定，而沸點較高的組分，如氟硫草定、氟吡酰草胺和肟草酮等，其量值呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢。由于溶劑甲醇沸點較低，低沸點組分具有較高的蒸汽壓，溶劑蒸發(fā)逃逸引起溶質濃縮是標準物質的特性量值增大的主要因素。在標準物質的有效期內，置信度為95%時，甲醇作為溶劑于-18℃避光貯存可保存90天。

參 考 文 獻：

[1] 中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 19648-2006 水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法[S].

[2] 中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 20769-2008 水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法[S].

[3] Wang J，Leung D，Determination of 142 pesticides in fruit- and vegetable- based infant foods by liquid chromatography/electrospray ionization-tandem mass spectrometry and estimation of measurement uncertainty[J]. J. AOAC Int.，2009，92（1）：279-301.

[4] Avramides E J.Long-term stability of pure standards and stock standard solutions for the determination of pesticide residues using gas chromatography[J].J. Chromatogr. A，2005，1080（2）：166-176.

[5] 嚴錦申，李俊麗，趙莉，等. 農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀及檢測技術的研究進展[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學，2013，45（6）：134-137，152.

[6] 胡梅，王駿，張卉，等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質譜測定蒜苔中多菌靈和噻菌靈的殘留量[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學，2010，4：89-91.

[7] 楊麗莉，母應鋒，胡恩宇，等.有機磷農(nóng)藥標準溶液穩(wěn)定性的研究[J].環(huán)境科學與管理，2006，31（8）：173-175.

[8] 繆德仁，劉玉龍，張曉然，等.多環(huán)芳烴類標準物質使用時效性評價[J].巖礦測試，2010，29（2）：109-112.

[9] 田呈瑞，田洪磊，蔡靜.濃縮果汁中甲胺磷殘留農(nóng)藥穩(wěn)定性的研究[J].食品工業(yè)科技，2005，26（3）：70-71.

[10]陸繼偉，苗水，毛秀紅，等.氣相色譜-質譜聯(lián)用法分析50種農(nóng)藥混合標準品溶液的穩(wěn)定性[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011，21（8）：1854-1857，1860.

[11]丁錦春，黃向榮，蔡躍.氣相色譜分析有機氯農(nóng)藥混合標準溶液的穩(wěn)定性[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2000，10 （3）： 295-296.

[12]劉玉龍，夏凡，張洪志.揮發(fā)性有機污染物標準物質使用的短期穩(wěn)定性評價[J].巖礦測試，2012，31（4）：647-652.

[13]邵明武，湯樺，陳大舟.關于多組分痕量有機污染物溶液標準物質研制的體會[J].計量技術，2007（3）：61-63.

[14]國家標準物質研究中心.JJG 1006-94，一級標準物質技術規(guī)范[S].

[15]Lide D R.CRC Handbook of chemistry and physics[M].89th Edition （Internet Version 2009）. Boca Raton，F(xiàn)L： CRC Press/Taylor and Francis，2009.

[16]全國認證認可標準化技術委員會.GB-T 27404-2008 實驗室質量控制規(guī)范食品理化檢測[S].

[17]Roper P， Burke S， Lawn R.標準物質及其在分析化學中的應用[M].李紅梅，劉 菲，李孟婉，譯.北京：中國計量出版社，2006.

[18]盧曉華.標準物質在化學測量結果不確定度評定中的應用舉例[J].中國計量，2008，1：68-69.

[19]中國合格評定國家認可委員會.CNAS-GL06：2006化學分析中不確定度的評估指南[S].

[20]陳曉翔，鄒永德，王長安，等.液相色譜串聯(lián)質譜法測定動物源食品中克倫特羅殘留量的不確定度評定[J].計量學報，2012，33（4）：372-376.

[21]馬康，楊亞楠，邢金京，等.誘惑紅溶液標準物質的研制及不確定度評定[J].分析測試學報， 2012，31（3）：296-301.endprint