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      淋巴細(xì)胞免疫療法治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的療效分析

      2014-08-07 09:05王天紅
      中國(guó)醫(yī)藥科學(xué) 2014年8期
      關(guān)鍵詞:復(fù)發(fā)性流產(chǎn)妊娠結(jié)局

      王天紅

      [摘要] 目的 探討不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)臨床治療中淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療的臨床價(jià)值。 方法 選取2010~2012年我院診治的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者50例,隨機(jī)分為兩組,分別行無(wú)特殊處理和淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療,同時(shí)對(duì)主動(dòng)免疫治療患者封閉抗體陰性與陽(yáng)性的妊娠結(jié)局進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。 結(jié)果 觀察組患者流產(chǎn)率顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。主動(dòng)免疫治療后封閉抗體陽(yáng)性患者妊娠成功率為88.5%,陰性患者妊娠成功率為57.1%,陽(yáng)性組顯著高于陰性組(P<0.05)。 結(jié)論 淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療能過(guò)有效治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn),具有良好的臨床效果,而封閉抗體檢測(cè)能夠?qū)θ焉锝Y(jié)局有積極的預(yù)測(cè)作用。

      [關(guān)鍵詞] 淋巴細(xì)胞免疫療法;復(fù)發(fā)性流產(chǎn);封閉抗體;妊娠結(jié)局

      [中圖分類(lèi)號(hào)] R714.1???[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B???[文章編號(hào)] 2095-0616(2014)08-197-03

      Efficacy analysis of lymphocyte immunotherapy in treatment of recurrent miscarriage

      WANG?Tianhong

      Department of Obstetrics and Gynecology,Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College,Guangzhou510150,China

      [Abstract] Objective To investigate the clinical value of lymphocyte active immunotherapy in the clinical treatment of unexplained recurrent miscarriage. Methods Fifty patients with recurrent abortion admitted to our hospital from 2010 to 2012 were selected, randomLy divided into two groups and received non-special treatment and lymphocyte active immunotherapy respectively.Meanwhile,the pregnancy outcomes of the patients with negative and positive blocking antibodies who received active immunotherapy were observed. Results The observation group had lower abortion rate than the control group (P<0.05).After active immunotherapy, the successful pregnancy rate of the patients with positive blocking antibodies was 88.5% and that of those with negative blocking antibodies was 57.1%,with the positive group significantly higher than the negative group (P<0.05). Conclusion Lymphocyte active immunotherapy can effectively treat recurrent miscarriage and shows favorable clinical effects.Blocking antibody detection is of positive predictive effect for pregnancy outcomes.

      [Key words] Lymphocyte immunotherapy;Recurrent miscarriage;Blocking antibody;Pregnancy outcomes

      復(fù)發(fā)性流產(chǎn)是持續(xù)發(fā)生兩次或以上自然流產(chǎn),由于病因較為復(fù)雜,可能包括解剖、遺傳、感染以及內(nèi)分泌等多方面的原因,而還有將近50%的患者無(wú)法明確病因[1]。這一部分無(wú)法明確原因的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)成為原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)[2]。在近年來(lái)醫(yī)學(xué)的發(fā)展中,生殖免疫學(xué)研究不斷深入,有觀點(diǎn)認(rèn)為超過(guò)40%的不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與免疫因素有關(guān)[3]。而主動(dòng)免疫療法是近年來(lái)較為常用的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)治療方案,本研究通過(guò)丈夫與男性無(wú)關(guān)第三個(gè)體的淋巴細(xì)胞行主動(dòng)免疫療法,探討復(fù)發(fā)性流產(chǎn)免疫治療的有效性。

      1?資料與方法

      1.1?一般資料

      選取我院2010年1月~2012年12月門(mén)診診治的原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者50例,患者均經(jīng)封閉抗體檢測(cè)為陰性。患者年齡21~37歲,平均(29.8±3.2)歲;流產(chǎn)次數(shù)為2~4次,其中2次流產(chǎn)31例,3次流產(chǎn)12例,4次流產(chǎn)7例。排除生殖系統(tǒng)畸形、染色體異常、感染、內(nèi)分泌異常、自身抗體陽(yáng)性以及自身免疫性疾病的原因。所有患者均經(jīng)系統(tǒng)化檢查與病史診斷,確定入選標(biāo)準(zhǔn)為:(1)持續(xù)發(fā)生2次或2次以上自然流產(chǎn),不存在死胎或死產(chǎn)的病史;(2)經(jīng)染色體檢查確定夫婦均正常,不存在家族性遺傳病史,胚胎染色體的核型為正常;(3)行胰島素、甲狀腺與生殖系統(tǒng)內(nèi)分泌檢查,結(jié)果均正常,基礎(chǔ)體溫測(cè)定為雙相性;(4)患者不存在生殖系統(tǒng)器質(zhì)性病變或畸形;(5)抗核抗體、核抗原抗體、狼瘡抗凝因子、抗心磷脂抗體等自身抗體檢驗(yàn)結(jié)果均為正常;(6)行支原體、衣原體以及TORCH檢查確定無(wú)生殖道感染;(7)丈夫行常規(guī)精液檢查無(wú)異常,夫婦血性均不存在不合,抗體效價(jià)>1∶128;(8)行封閉抗體或?yàn)殛幮訹4-6]。將患者隨機(jī)分為兩組,觀察組患者25例行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療,對(duì)照組25例患者未行特別處理。兩組患者一般資料以統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理,各項(xiàng)指標(biāo)差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。觀察組患者均在淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療2周后再次檢測(cè)封閉抗體,根據(jù)封閉抗體檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分組,治療后轉(zhuǎn)陽(yáng)性的15例患者為陽(yáng)性組,治療后封閉抗體檢測(cè)結(jié)果仍未陰性的35例患者為陰性組,對(duì)比兩組患者的妊娠結(jié)局。

      1.2?供血者篩查與封閉抗體檢測(cè)

      在行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療之前,供血者均行肝腎功能、血常規(guī)、肝炎病毒檢驗(yàn)(乙肝兩對(duì)半、丙肝病毒抗體、丁肝病毒抗原與抗體、戊肝病毒抗體)、梅毒篩查以及AIDS全套病毒抗體篩查,排除通過(guò)血液傳染疾病的可能性。同時(shí)與患者進(jìn)行知情溝通,讓患者了解免疫治療可能存在的風(fēng)險(xiǎn),所有患者或家屬均簽署知情同意書(shū)。如果配偶血源篩查不合格,則選擇無(wú)關(guān)第三個(gè)體的血緣。

      封閉抗體檢測(cè)方法為流式細(xì)胞術(shù),采集患者配偶外周抗凝全血100μL加入鼠抗人CD3、CD4、CD8單克隆抗體20μL,再加入患者血清或正常男性AB型血清50μL,孵育30min,加入紅細(xì)胞溶解液3mL,PBS洗滌1次,以流式細(xì)胞儀客觀分析。打印出加女性血清及加AB型血清的配偶T淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞比例,并按下列公式計(jì)算封閉效率。封閉效率=加AB型血清CD比例-加女性血清CD比例(%)。封閉抗體陽(yáng)性值:正常生育者封閉效率(X-1.96s),大于此值者為封閉抗體陽(yáng)性。

      1.3?治療方法

      抽取患者配偶的30mL靜脈血液,進(jìn)行2%的肝素抗凝處理,放置在保存淋巴細(xì)胞分離液(淋巴細(xì)胞分離液的比重為1.020)的離心試管中,確保淋巴細(xì)胞分離液與抗凝處理后的血液之間界面的清晰。將試管以每分鐘250轉(zhuǎn)的速度離心處理25min,取出淋巴細(xì)胞層,以磷酸鹽緩沖液清洗2次后,職稱(chēng)籬笆細(xì)胞混懸液,將細(xì)胞濃度調(diào)整為(20~40)×106/mL,以0.5~0.8mL淋巴細(xì)胞混懸液在患者兩側(cè)前臂皮下注射,注射點(diǎn)4~6個(gè)。每?jī)纱沃委熤虚g間隔時(shí)間為3~4周,以3次為1個(gè)療程。在完成1療程的治療后,鼓勵(lì)患者在12周內(nèi)受孕,在未確定妊娠之前,每隔5~6周行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療1次。在確定患者妊娠后,每隔3周行淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療1次,持續(xù)到患者妊娠第20周。妊娠超過(guò)12周,經(jīng)B型超聲檢查不存在異常,且無(wú)分娩活嬰作為妊娠成功。

      1.4?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

      本組數(shù)據(jù)采用SPSS15.0軟件包進(jìn)行處理,計(jì)數(shù)資料比較采用x2檢驗(yàn),計(jì)量資料采用()表示,組間比較進(jìn)行t檢驗(yàn),均以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2?結(jié)果

      2.1?臨床療效比較

      兩組患者治療后的臨床療效比較,見(jiàn)表1。觀察組患者流產(chǎn)率相比對(duì)照組明顯降低(x2=9.281,P<0.05)。

      表1??兩組患者治療后的臨床療效比較[n(%)]

      組別 n 分娩 流產(chǎn)

      觀察組 25 19(76.0) 6(24.0)

      對(duì)照組 25 10(40.0) 15(60.0)

      2.2?主動(dòng)免疫療法封閉抗體檢驗(yàn)不同結(jié)果的妊娠結(jié)局

      淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后封閉抗體陽(yáng)性與陰性的妊娠結(jié)局統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2。淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后,封閉抗體陽(yáng)性患者共18例,妊娠成功率為88.9%,封閉抗體陰性7例,妊娠成功率為57.1%。封閉抗體陽(yáng)性的患者妊娠成功率顯著高于陰性患者(x2=6.288,P<0.05)。

      表2??淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療后封閉抗體陽(yáng)性與陰性的妊娠結(jié)局統(tǒng)計(jì)[n(%)]

      組別 n 再次流產(chǎn) 妊娠成功

      陽(yáng)性組 18 2(32.0) 16(88.5)

      陰性組 7 3(24.0) 4(57.1)

      2.3?不良反應(yīng)

      所有患者均在主動(dòng)免疫治療后留院觀察30min以上,確定不存在明顯的不良反應(yīng)。在治療結(jié)束后4例患者存在局部皮膚的短期色素沉淀,無(wú)硬結(jié)存留。

      3?討論

      1981年,貝爾和泰勒大膽地采用丈夫和無(wú)關(guān)第三個(gè)體的淋巴細(xì)胞進(jìn)行主動(dòng)免疫治療,結(jié)果接受治療的4名孕婦有3名妊娠成功,生下了健康的嬰兒。由張世訓(xùn)教授領(lǐng)銜的山東省血液中心于1987年率先開(kāi)展了這方面的臨床研究。到目前為止,先后治療210例孕婦,妊娠成功率高達(dá)87.5%。在現(xiàn)代免疫學(xué)的研究中,人類(lèi)胚胎的形成中來(lái)自于父親的基因抗原被視作外來(lái)侵入者,因此在母體中會(huì)產(chǎn)生排異反應(yīng)[7]。在正常的妊娠孕婦體內(nèi),會(huì)自行產(chǎn)生封閉抗體,對(duì)抗自然排異性,保存胚胎的發(fā)育生長(zhǎng)。而當(dāng)母體內(nèi)缺乏封閉抗體時(shí),胚胎會(huì)受到母體自然排異的影響從而無(wú)法正常生長(zhǎng)發(fā)育。淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療能夠通過(guò)配偶的淋巴細(xì)胞移植入患者體內(nèi),刺激患者的免疫系統(tǒng),從而激發(fā)患者體內(nèi)封閉抗體的產(chǎn)生[8]。在患者再次妊娠時(shí),已產(chǎn)生的封閉抗體能夠通過(guò)同源抗原的識(shí)別,進(jìn)行結(jié)合,確保封閉抗體效果的作用,保護(hù)胚胎的正常生長(zhǎng)發(fā)育[9]。

      本次臨床研究中淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療能夠有效提高妊娠成功率,從無(wú)特別處理的52%提高至84%,與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致[10-12]。同時(shí),封閉抗體均為陰性的患者在經(jīng)過(guò)主動(dòng)免疫治療后,陽(yáng)性患者達(dá)到18例,而封閉抗體陽(yáng)性患者的妊娠成功率相比封閉抗體陰性患者明顯提高。證明通過(guò)淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療能夠有效促進(jìn)患者體內(nèi)封閉抗體的產(chǎn)生,提高胚胎的成活率。而封閉抗體為陰性的患者由于體內(nèi)封閉抗體未得到有效的增加,從而提高了再次流產(chǎn)的可能性,證明了封閉抗體對(duì)于復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有明顯的預(yù)測(cè)效果[13-14]。

      綜上所述,淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫療法對(duì)封閉抗體陰性的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有明顯的治療效果,能夠有效促進(jìn)封閉抗體的分泌,提高再次妊娠的成功率,而封閉抗體檢測(cè)能夠?qū)θ焉锝Y(jié)局預(yù)測(cè)有明顯的作用。

      [參考文獻(xiàn)]

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      (收稿日期:2014-01-24)

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