劉 文，孫 悅，于浚玫

(1.天津市安定醫(yī)院，天津 300222； 2.天津市藥品檢驗所，天津 300074)

氣相色譜法測定琥珀酸甲潑尼龍中殘留的有機溶劑*

劉 文1，孫 悅2，于浚玫1

(1.天津市安定醫(yī)院，天津 300222； 2.天津市藥品檢驗所，天津 300074)

目的：建立琥珀酸甲潑尼龍中4種殘留有機溶劑的分離測定方法。方法：采用頂空進樣毛細管氣相色譜法，應(yīng)用DB-I石英毛細管柱(30 m×0.53 mm ，0.5 μm )，載氣為氮氣，氫火焰離子化檢測器(FID)，程序升溫，柱溫40 ℃保持10 min，以2 ℃/min的速度升至80 ℃，保持5 min，再以40 ℃/min的速度升至230 ℃，保持10 min。結(jié)果：4種有機溶劑均能得到有效分離，在所考查的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r為0.998 4～0.999 9，平均回收率為97.9%～102.2%。結(jié)論：本方法靈敏、簡便快速、結(jié)果準確，可用于琥珀酸甲潑尼龍中殘留有機溶劑的檢測。

氣相色譜法，琥珀酸甲潑尼龍，殘留有機溶劑

琥珀酸甲潑尼龍，別名甲基潑尼松龍琥珀酸酯[1]，為人工合成的糖皮質(zhì)激素,主要用于甲潑尼龍琥珀酸鈉針的原料藥，有抗炎、免疫抑制及抗過敏活性，用于風濕性疾病、膠原疾病、皮膚疾病、過敏狀態(tài)、眼部疾病、胃腸道疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、水腫狀態(tài)等的對癥治療，作為免疫抑制劑而治療腫瘤、休克等。由于生產(chǎn)工藝原因，琥珀酸甲潑尼龍生產(chǎn)過程會引入一定量的有機溶劑，而不同的工藝帶進的殘留溶劑也各不相同，這些殘留溶劑根據(jù)毒性不同會對人體產(chǎn)生不同程度的傷害，應(yīng)予控制。目前，國內(nèi)僅有兩家生產(chǎn)企業(yè)持有琥珀酸甲潑尼龍批準文號，我們在參考其合成工藝的前提下，對其產(chǎn)品中的有機溶劑進行了考查，將甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺作為控制對象，采用二甲基亞砜作為溶劑，建立了一次色譜過程[2]同時測定上述溶劑的毛細管氣相色譜法。實驗結(jié)果顯示，該方法簡便、快捷，結(jié)果準確，重現(xiàn)性良好。

1 儀器與試劑

Agilent 7890A氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測器。甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺均為分析純試劑，二甲基亞砜為色譜純試劑。琥珀酸甲潑尼龍樣品3批(批號為M1595、M2225、N0036)由國內(nèi)某公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件 色譜柱：DB-Ⅰ石英毛細管柱(100%二甲基聚硅氧烷為固定液，30 m×0.53 mm，0.5 μm)，柱溫： 40 ℃維持10 min，以2 ℃/min的速度升溫至80 ℃，維持5 min，再以40 ℃/min的速度升溫至230 ℃，維持10 min； 氣化室：200 ℃；檢測器：FID，250 ℃；載氣：氮氣；分流比：10∶1；流速：1 ml/min；進樣量：1 μl。色譜圖見圖1。

1.甲醇 2.丙酮 3.乙酸乙酯4.N,N-二甲基甲酰胺 5.二甲基亞砜

2.2對照品貯備溶液的配制 精取甲醇126.4 μl(相當于100 mg)、丙酮189.9 μl(相當于150 mg)、乙酸乙酯89.0 μl(相當于80 mg)、N,N-二甲基甲酰胺93.2 μl(相當于88 mg)，置100 ml量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻。

2.3線性關(guān)系考查 精密量取對照品貯備溶液0.5、2.5、4.0、5.0、6.0和10 ml分別置于50 ml量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，制成一系列濃度的對照溶液；精密量取上述溶液1 μl，注入氣相色譜儀，依“2.1”項下色譜條件測定，以對照品溶液濃度為橫坐標(C)，對照品峰面積為縱坐標(A)，進行線性回歸。結(jié)果見表1。

表1 回歸方程與線性范圍(n=6)

2.4最低檢測限 精密量取對照品貯備溶液0.5 ml置50 ml量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，再逐步稀釋。分別精密量取各稀釋溶液1 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖,通過信噪比找出最小檢出限,甲醇、丙酮、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺的最低檢出限分別為5、3、 1.6及4.4 μg/ml。

2.5精密度試驗 精密量取“2.2”項下對照品貯備溶液5 ml 置50 ml量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，共配制6份溶液，分別精密量取1 μl，連續(xù)進樣，考查精密度。依“2.1”項下色譜條件測定，以峰面積計算，結(jié)果甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺峰面積的RSD分別為0.8%、0.5%、1.5%和0.5%(n=6)。

2.6重復(fù)性試驗 取6份“2.8”項下加入對照溶液0.5 ml的樣品溶液，各精密量取1 μl，連續(xù)進樣，考查重復(fù)性。依”2.1”項下方法測定，以峰面積計算，結(jié)果甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺峰面積的RSD分別為0.9%、1.0%、0.7%和1.4%(n=6)。

2.7穩(wěn)定性試驗 取樣品測定項下對照品溶液及樣品溶液，經(jīng)24 h進樣，考查溶液的穩(wěn)定性。上述溶液中，甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺峰面積基本無變化，表明測定結(jié)果24 h內(nèi)穩(wěn)定，結(jié)果見表2。

2.8回收率試驗 精密量取對照品貯備溶液0.4、0.5和0.6 ml各3份, 分置已加入0.5 g樣品的5 ml量瓶中，加二甲基亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成含對照品相當于檢查限度80%、100%和120%的溶液。另取本品約0.5 g，精密稱定，置5 ml量瓶中，用二甲基亞砜溶解并稀釋至刻度，作為回收率測定的空白溶液。同時配制相應(yīng)濃度的對照品溶液。依”2.1”項下色譜條件測定，按外標法計算回收率，結(jié)果見表3-表6。

表2 穩(wěn)定性試驗結(jié)果

表3 甲醇回收率試驗結(jié)果

表4 丙酮回收率試驗結(jié)果

表5 乙酸乙酯回收率試驗結(jié)果

表6 N,N-二甲基甲酰胺回收率試驗結(jié)果

2.9樣品測定 取本品約1.0 g，精密稱定，置10 ml量瓶中，加二甲基亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。依”2.1”項下色譜條件測定，檢出甲醇、丙酮、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺，結(jié)果見表7。

表7 樣品測定結(jié)果(n=6) %

注：-為未檢出

3 討論

3.1N,N-二甲基甲酰胺為含氮堿性化合物[3]，頂空進樣系統(tǒng)對其有所吸附，而其沸點也較高，達到153 ℃，采用頂空試驗后發(fā)現(xiàn)，不同濃度的對照溶液在采用120 ℃作為頂空瓶平衡溫度進樣后，N,N-二甲基甲酰胺峰面積線性關(guān)系較差，無法取得準確的定量結(jié)果，因此不適宜采用頂空方式測定。

3.2由于所檢測的有機殘留溶劑比較常見，因此本文在色譜柱的選擇上主要考查了6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷、5%-二苯基-95%二甲基聚硅氧烷和100%二甲基聚硅氧烷及三種非極性至中等極性的毛細管柱，比較而言，100%二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細管柱分離效果比較好，因此選其作為試驗的色譜柱。此外對于色譜柱的膜厚對樣品的分離也進行了考查，0.5 μm可以滿足檢測需要。

1 薛志軍，邱小忠.COPD患者焦慮抑郁癥狀與糖皮質(zhì)激素相關(guān)性研究[J].臨床肺科雜志，2010，15(9)：1304-1305

2 錢玨,劉文華.毛細管氣相色譜法檢測頭孢西丁鈉原料藥中的殘留溶劑[J].臨床合理用藥雜志,2011,4(12):14-15

3 張秋菊,裴付軍,郭毅.GC法測定鹽酸索他洛爾中有機溶劑殘留量[J].齊魯藥事,2011,30(7):392-393

2014-03-10

R927.11

A

1006-5687(2014)04-0013-03