俞志紅 張 敏 李艷紅 孫曉格

(河北省秦皇島市海港醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 秦皇島 066000)

秦皇島市門診婦女人類乳頭瘤病毒感染情況分析

俞志紅 張 敏1李艷紅2孫曉格3

(河北省秦皇島市海港醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 秦皇島 066000)

人類乳頭瘤病毒；宮頸腫瘤；雜合子檢測

宮頸癌作為僅次于乳腺癌的女性最常見惡性腫瘤，越來越受到人們的重視，也成為全球研究的熱點(diǎn)課題之一。宮頸局部感染是宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的高危因素之一，大量研究資料表明，人類乳頭瘤狀病毒(HPV)是宮頸局部感染的重要病原體，其持續(xù)感染與宮頸癌及宮頸癌前病變密切相關(guān)，90%以上的宮頸癌患者發(fā)病是由于HPV特別是高危型HPV感染引起的[1]。雖然高危型HPV的重要型別在不同區(qū)域的分布上存在著一致性，但不同地域仍存在各自的優(yōu)勢型別。本研究通過對545例婦女宮頸分泌物進(jìn)行HPV分型檢測，以了解不同型別HPV在秦皇島市的感染分布情況，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2008—2010年在河北省秦皇島市海港醫(yī)院婦科就診的女性545例，年齡18～63歲，平均(31.62±4.59)歲。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 在宮頸口處用HPV采樣刷沿同一方向旋轉(zhuǎn)5圈，并停留10 s以上，立即浸入裝有保存液的標(biāo)本儲存管，蓋好蓋子，及時送檢。

1.2.2 DNA分離提取 按照聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)試劑盒(由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供)說明書要求，在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行DNA提取。

1.2.3 PCR擴(kuò)增、雜交 用7600型基因擴(kuò)增儀按照設(shè)定程序進(jìn)行HPV的PCR基因擴(kuò)增，并對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行分子雜交實(shí)驗(yàn)，雜交實(shí)驗(yàn)試劑盒由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供。

1.2.4 結(jié)果判斷 陽性結(jié)果為芯片上呈現(xiàn)藍(lán)紫色圓點(diǎn)。根據(jù)芯片上HPV分型分布判斷HPV亞型感染結(jié)果，低危型包括6、11、42、43、44，高危型包括16、18、31、33、34、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、70。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料率的比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 545例HPV整體感染率 545例受檢女性中共檢出HPV陽性131例，整體感染率24.03%，其中高危型HPV感染率17.61%(96例)，低危型HPV感染率5.32%(29例)，混合感染率1.10%(6例)。

2.2 131例HPV感染人群各型構(gòu)成比 見表1。

由表1可見，131例HPV感染者中，亞型分布頻度前6位依次為HPV 52型(16.79%)、HPV 16型(12.98%)、HPV 6型(12.21%)、HPV 33型(10.69%)、HPV 18型(7.63%)、HPV 58型(6.87%)。

表1 131例HPV感染人群各型構(gòu)成比 例

2.2 HPV感染年齡分布情況 見表2。

表2 HPV感染年齡分布情況 例

由表2可見，545例女性HPV感染高峰年齡段在31～40歲和41～50歲2個年齡段，各年齡組發(fā)病率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3 討 論

宮頸癌發(fā)病率高居女性惡性腫瘤的第2位，在我國，宮頸癌患病率及病死率約占全世界的1/3[2]。許多研究表明，宮頸癌的發(fā)病原因與HPV感染密切相關(guān)，尤其是HPV的持續(xù)感染更是導(dǎo)致宮頸癌的直接原因。HPV一般分為高危型和低危型基因型，HPV6、11、42、43、44型等低危型感染患者一般常引起尖銳濕疣[3]，臨床表現(xiàn)外陰和宮頸疣狀病變，一般不會導(dǎo)致宮頸癌；而HPV16、18、52、33、58、31、45型等高危型感染患者通常是病毒整合到宿主細(xì)胞基因組中，研究發(fā)現(xiàn)高危型HPV持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸癌的重要因素[4]。

本研究主要進(jìn)行HPV-DNA分型的實(shí)驗(yàn)室檢測，結(jié)果顯示，在受檢的545例婦女中，HPV-DNA陽性131例，檢出率為24.03%，高于徐維等[5]報(bào)道的16.7%的常德市女性HPV感染率。在所有陽性病例中高危型感染96例(73.28%)，低危型感染29例(22.1%)，混合感染6例(4.58%)。由此可見，女性HPV感染以高危型為主，而在所有高危型HPV感染患者中，以HPV 52、16、33型為主，分別占總感染型別的16.79%、12.98%、10.69%，與報(bào)道的中國HPV 52、58型感染占42.5%為常見型[6-7]存在一定差異。

高危型HPV的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的必要條件，因此HPV基因精確分型檢測是早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌的重大突破，HPV分型檢測可以作為高風(fēng)險人群的早期篩查手段，尤其是聯(lián)合采用細(xì)胞學(xué)檢測可使結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。對于在病理學(xué)未明確診斷意義的不典型鱗狀細(xì)胞/腺細(xì)胞(ASCUS/AGUS)和鱗狀上皮內(nèi)低度病變(LSIL病變)，可以采用HPV-DNA的分型檢測對其進(jìn)行最有效、最明確分類診斷。另外HPV-DNA分型檢測還可用于宮頸上皮內(nèi)病變和宮頸癌治療效果的動態(tài)監(jiān)測，對于患者術(shù)后的追蹤隨訪及愈后的評估有重要意義。

在所有女性人群中，年輕女性由于性生活比較活躍，所以一過性的HPV感染比例比較高，本研究顯示，31～40歲和41～50歲2個年齡段HPV檢出率最高，分別為27.3%、27.6%，但是研究發(fā)現(xiàn)，從感染HPV開始到宮頸癌發(fā)生的平均時間一般為(12.0±2.9)年[8]，因此對于高危人群定期跟蹤監(jiān)測HPV-DNA分型檢測對于早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌，并對其進(jìn)行早期干預(yù)治療對宮頸癌的治療及預(yù)后有極其重要的意義。對高危型HPV的感染人群進(jìn)行定期復(fù)查、隨訪，早發(fā)現(xiàn)，早干預(yù)，早治療，監(jiān)測宮頸病變的發(fā)生發(fā)展歷程，最大程度降低宮頸癌的發(fā)病率和死亡率。

[1] Almong B，Gamzu R，Kuperminc MJ，et al.Human papilloma virus testing in patient follow-up post cone biopsy due to high-grade cervical intraepithelial neoplasia[J].Gynecol Oncol，2003，88(3)：345-350.

[2] 張菊，高艷娥，趙錦榮，等.HPV檢測在宮頸癌預(yù)警和篩查中的研究[J].國外醫(yī)學(xué)：婦產(chǎn)科學(xué)分冊，2003，30(5)：319-322.

[3] 黃慶，府偉靈，周玉，等.基因芯片對人乳頭瘤病毒的快速檢測和分型[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2005，15(4)：476-478.

[4] 梁惠萍，邱麗容.高危型人乳頭瘤病毒檢測對宮頸病變的診斷價值[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2012，9(34)：48-49.

[5] 徐維，曾孟蘭，楊黎明.1285例女性HPV感染狀況調(diào)查[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2009，16(1)：36-37.

[6] Muňoz N，Bosch FX，de Sanjosé S，et al.Epidemiologic classifieation of human papillomavirus types associated with cervical cancer[J].N Engl J Med，2003，348(6)：518-527.

[7] 陶萍萍，卞美璐.女性生殖道人乳頭狀瘤病毒基因型研究進(jìn)展[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2005，21(8)：507-509.

[8] Jacobs MV，Zielinski D，Meijer CJ，et al.A simplified and reliable HPV testing ofarchival Papanicolaou-stained cervical smears：applica-tion to cervical smears from cancer patients starting wicytologically normal smears[J].Br J Cancer，2000，82(8)：1421-1426.

(本文編輯：曹志娟)

俞志紅(1981—)，女，主管檢驗(yàn)師，碩士。研究方向：免疫及分子生物學(xué)檢驗(yàn)。

R711.740.11

A

1002-2619(2014)01-0154-02

2013-05-06)

1 河北省秦皇島市山海關(guān)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 山海關(guān) 066200

2 河北省遷安市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 遷安 064400

3 河北省行唐縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 行唐 050600