宋 偉，韓 東，夏國(guó)慶

·臨床醫(yī)學(xué)·

耐藥相關(guān)基因GST-π在腦膠質(zhì)瘤的表達(dá)及臨床意義

ExpressionandClinicalSignificanceofDrug-resistanceRelatedGenesGST-πinGliomas

宋 偉，韓 東，夏國(guó)慶

目的探討GST-π的表達(dá)水平與腦膠質(zhì)瘤的關(guān)系以及預(yù)后。方法46例腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本，經(jīng)免疫組化染色后，檢測(cè)GST-π蛋白表達(dá)情況，分析腦膠質(zhì)瘤的惡性程度、發(fā)病年齡、性別之間的相關(guān)性。結(jié)果GST-π在高、低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組之間的陽(yáng)性表達(dá)水平存在顯著性差異(P<0.05)。GST-π蛋白在腦膠質(zhì)瘤發(fā)病年齡、性別之間陽(yáng)性表達(dá)水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。結(jié)論GST-π在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤惡性級(jí)別程度有顯著相關(guān)。GST-π在腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)與患者性別、年齡無(wú)關(guān)。

腦膠質(zhì)瘤；免疫組化；谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶-π；化療

腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一[1-3]，其呈侵入性生長(zhǎng)，沒(méi)有明顯邊界，手術(shù)效果不佳，術(shù)后多給予放療以及化療，但總體預(yù)后不佳。近些年來(lái)隨著耐藥因子的發(fā)現(xiàn)，為腦膠質(zhì)瘤的化療提供了新的思路和新的方法。本研究收集我院腦膠質(zhì)瘤患者48例，采用免疫組化法對(duì)其腦膠質(zhì)瘤中谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶-π(glutathione S-transferases-π，GST-π)蛋白表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 組織標(biāo)本收集我院2005～2011年腦膠質(zhì)瘤石蠟組織48例，男28例，女20例，年齡10～67歲。參照2000年WHO腦瘤分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分類，分為兩組，一組低級(jí)別膠質(zhì)瘤(Ⅰ、Ⅱ級(jí))15例，其中星形細(xì)胞瘤10例，少支膠質(zhì)瘤4例，室管膜瘤1例；另一組高級(jí)別膠質(zhì)瘤Ⅲ、Ⅳ級(jí)33例，其中間變性星形細(xì)胞瘤19例，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤10例，髓母細(xì)胞瘤3例，間變性室管膜瘤1例。取10例頭外傷手術(shù)病人的正常腦組織作為對(duì)照組。

1.2 主要試劑一抗鼠抗人NF-κBp65單克隆抗體購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司，SP免疫組化試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)公司。

1.3 試驗(yàn)方法采用免疫組化SP法，按照試劑盒操作步驟說(shuō)明書，將GST-π進(jìn)行免疫組化染色。染色圖片見(jiàn)圖1。

圖1腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞GST-π表達(dá)強(qiáng)度(Envision法，×400)

1.4 結(jié)果判斷GST-π結(jié)果判定：GST-π蛋白主要定位于細(xì)胞漿內(nèi)有棕黃色顆粒為陽(yáng)性，在高倍鏡下(400倍)計(jì)數(shù)200個(gè)腫瘤細(xì)胞，以無(wú)著色細(xì)胞為陰性或者陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<10%為陰性，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在10%～29%為弱陽(yáng)性(+)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)30%～59%為陽(yáng)性(++)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥60為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 GST-π的表達(dá)結(jié)果顯示GST-π在腦膠質(zhì)瘤組織中，GST-π的陽(yáng)性表達(dá)率分別為53.33%(8/15)、90.91%(30/33)，χ2值為19.502，差異均有顯著性意義(P<0.05)，GST-π在Ⅰ～Ⅱ級(jí)、Ⅲ～Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤之間陽(yáng)性表達(dá)率不同(χ2值=13.081)，兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 GST-π在腦膠質(zhì)瘤的陽(yáng)性表達(dá)率

2.2 GST-π在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)與患者性別、年齡的關(guān)系GST-π在48例膠質(zhì)瘤組性別、年齡之間陽(yáng)性表達(dá)率不同，其差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，χ2值分別為0.029、0.833。見(jiàn)表2。

表2 GST-π在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)與患者性別、年齡的關(guān)系

3 討論

GST是一種蛋白質(zhì)，其家族成員有GST-а、GST-μ、GST-δ、GST-θ等至少20種同工酶[4]。其中，GST-π與腫瘤發(fā)生關(guān)系最為密切。GST-π長(zhǎng)度約3.0 kb，基因在11q13，GST-π的編碼的蛋白產(chǎn)物由兩個(gè)分子量為22 500多肽亞單位以非共價(jià)鍵結(jié)合的而成的二聚蛋白。GST-π在谷胱甘肽的氧化還原狀態(tài)、DNA修復(fù)、轉(zhuǎn)錄因子的激活中起了關(guān)鍵作用[5]。其主要通過(guò)兩種途徑使得抗腫瘤藥產(chǎn)生耐藥的[6]：①抗腫瘤藥物大部分為親電子化合物，GST-π可以通過(guò)催化谷胱甘肽與親電子化合物結(jié)合，形成GS-X化合物，然后被帶出到細(xì)胞外。②GST-π也可以與親脂化合物結(jié)合從而增加其水溶性，降低化療藥物的毒副反應(yīng)。因此它有兩個(gè)作用：一方面能增加細(xì)胞的抗氧化能力和解毒能力，減低腫瘤的發(fā)生；另一方面腫瘤藥物在癌細(xì)胞中加快了代謝過(guò)程。因此，在腫瘤細(xì)胞中抗腫瘤藥物失活并產(chǎn)生耐藥。目前，許多國(guó)內(nèi)外學(xué)者在體外試驗(yàn)表明腫瘤細(xì)胞耐藥性與GST-π有關(guān)[6-9]，在烷化劑抗癌藥物產(chǎn)生耐藥中起到了關(guān)鍵作用。

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2014-03-14

焦作市第二人民醫(yī)院神經(jīng)外科，河南焦作 454000

宋偉(1966-)，男，河南焦作人，副主任醫(yī)師，從事神經(jīng)外科臨床工作。

R739.41

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1672-688X(2014)02-0102-02