非霍奇金淋巴瘤患者化療前外周血中CD4/CD8值與其療效的關(guān)系

王 樂 李午平 黃 燕

腫瘤化療療效與患者的免疫機(jī)能密切相關(guān)，研究表明，許多癌細(xì)胞在化療后僅被藥物殺傷而未死亡，這部分癌細(xì)胞的清除有賴于免疫系統(tǒng)[1-6]。非霍奇金淋巴瘤(NHL)是一類淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤，隨著疾病的發(fā)生發(fā)展，患者的免疫機(jī)能常處于低下狀態(tài)[7]，而CD4/CD8值是一項(xiàng)重要的免疫指標(biāo)，在免疫狀態(tài)監(jiān)測等領(lǐng)域有著廣泛而重要的應(yīng)用，目前，NHL患者化療前CD4/CD8值與化療近期療效的關(guān)系尚未明確。本研究采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)測定了74例NHL患者化療前的CD4/CD8值，并分析了該指標(biāo)與化療近期療效的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

入選的74例患者均為我院2012年1月至2013年11月收治的，其中男性47例，女性27例；年齡15～75歲，中位年齡49歲；所有患者均經(jīng)病理組織學(xué)檢查確診為NHL，治療的一線方案為CHOP。其中Ⅰ期12例，Ⅱ期 17例，Ⅲ期25例，Ⅳ期20例(Ann Arbor分期)；有B癥狀者25例，無B癥狀者49例。所有患者近3個(gè)月內(nèi)未接受化療，化療前卡氏評分≥60分，重要器官功能基本正常，預(yù)計(jì)生存期≥3個(gè)月，并有可測量評價(jià)的客觀指標(biāo)。

1.2 方法

化療前采用直接免疫熒光標(biāo)記全血溶血法和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)，檢測患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群：用貝克曼庫爾特公司的三色熒光標(biāo)記混合單抗CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5或mouse IgG1-FITC/PE/PC5(同型對照)標(biāo)記EDTA抗凝全血，貝克曼庫爾特Optilyse-C溶血液裂解紅細(xì)胞，生理鹽水洗滌、重懸，在貝克曼庫爾特 EPICS-XL流式細(xì)胞儀上測定淋巴細(xì)胞中CD3+CD4+和CD3+CD8+細(xì)胞的百分比，并計(jì)算CD4/CD8值。

治療一線方案為CHOP：CTX 750 mg/m2，Ⅳ，d1；ADM 50 mg/m2，Ⅳ，d1；VCR 1.4 mg/m2(最大劑量2 mg) Ⅳ，d1；PDN 100 mg PO，d1-5，21～28天為1個(gè)周期，必要時(shí)由臨床醫(yī)生進(jìn)行調(diào)整。全組患者均化療2～6個(gè)周期。每化療2個(gè)周期后進(jìn)行1次療效評價(jià)，有效者繼續(xù)采用原方案化療，可達(dá)6個(gè)周期；無效者改用其他方案?；熤谐Ｒ?guī)給予止吐、保肝等對癥處理，化療結(jié)束后復(fù)查血常規(guī)、肝腎功能，出現(xiàn)Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制時(shí)給予對癥處理。

1.3 療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

化療療效按照2013版NCCN評價(jià)指南分為：完全緩解(CR),部分緩解(PR),穩(wěn)定(SD)以及進(jìn)展(PD)；以CR+PR為有效率。每化療2個(gè)周期后進(jìn)行療效評價(jià)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，率的比較采用卡方檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CD4/CD8值與NHL臨床特征的關(guān)系

74例患者中，共有16例患者CD4/CD8值偏低(參考值范圍1.02～1.94)，占21.6%，CD4/CD8值與患者年齡、性別、Ann Arbor分期和B癥狀均無相關(guān)性(表1)。

表1 CD4/CD8值與 NHL臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

注：*為連續(xù)校正法。

2.2 近期療效與CD4/CD8值的關(guān)系

全部患者均化療2個(gè)周期或以上，化療2個(gè)周期時(shí)74例患者均可評價(jià)療效，有效率為77.0%，其中CD4/CD8值偏低組有效率為62.5%，CD4/CD8值正?；蚱呓M有效率為81.0%，P>0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；化療至4個(gè)周期時(shí)，51例患者可評價(jià)療效，有效率為82.4%，其中CD4/CD8值偏低組有效率為54.5%，CD4/CD8值正?；蚱呓M有效率為90.0%，P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

腫瘤與免疫的關(guān)系，是當(dāng)前腫瘤研究的一大熱點(diǎn)。目前已知，在多種血液和實(shí)體腫瘤中，腫瘤的發(fā)生發(fā)展、治療的療效和預(yù)后都與機(jī)體免疫機(jī)能有密切關(guān)系。在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，腫瘤細(xì)胞對免疫系統(tǒng)的破壞是一個(gè)普遍現(xiàn)象，因此，患者在確診時(shí)便常處于免疫力低下的狀態(tài)[7]；另一方面，近來的研究顯示，免疫系統(tǒng)對受化療藥物殺傷的腫瘤細(xì)胞具有的更強(qiáng)的識別和攻擊能力[1]，此外，免疫系統(tǒng)對治療后少量殘留腫瘤細(xì)胞的清除、對腫瘤復(fù)發(fā)的防范以及預(yù)后的改善都有重要意義[8]。這就凸顯了在臨床實(shí)踐中對腫瘤患者進(jìn)行免疫狀態(tài)監(jiān)測的必要性。

輔助T細(xì)胞(CD3+CD4+)和胞毒T細(xì)胞(CD3+CD8+)是細(xì)胞免疫的主要組成部分，在免疫系統(tǒng)對抗腫瘤的過程中起著至關(guān)重要的作用，CD4/CD8值是反映免疫功能的重要指標(biāo)，CD4/CD8值偏低代表患者免疫功能低下。本研究中，我們對74 例非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者化療前CD4/CD8值進(jìn)行了測定，結(jié)果表明，有相當(dāng)一部分(21.6%)患者的免疫功能低下，這與我們的預(yù)期相吻合。有研究表明，腫瘤細(xì)胞可以利用幾乎所有的免疫抑制途徑，如上調(diào)抑制性T細(xì)胞數(shù)量、分泌抑制性細(xì)胞因子等手段，對免疫系統(tǒng)進(jìn)行抑制從而實(shí)現(xiàn)免疫逃逸[9]；而按照克隆進(jìn)化學(xué)說，實(shí)現(xiàn)免疫逃逸是腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵步驟之一[10]。本研究還發(fā)現(xiàn)，CD4/CD8值偏低與患者年齡、性別、Ann Arbor分期及B癥狀均無相關(guān)性，這提示免疫抑制在NHL患者中可能普遍存在，而非局限于上述某一特定患者群體；但由于本研究病例數(shù)有限，且觀察指標(biāo)不夠全面，還需要進(jìn)一步的研究來分析免疫抑制和各種臨床特征有無相關(guān)性，以便確定在未來的臨床實(shí)踐中，究竟是應(yīng)該對所有患者進(jìn)行免疫狀態(tài)監(jiān)測，還是對特定患者群體進(jìn)行監(jiān)測。

有研究顯示，化療療效與機(jī)體免疫狀態(tài)密切相關(guān)[1-6]，因此，我們推斷，患者CD4/CD8值與化療近期療效可能存在關(guān)聯(lián)。本研究中，患者2個(gè)周期化療療效與CD4/CD8值無相關(guān)性，但4個(gè)周期化療療效與CD4/CD8值顯著相關(guān)，這表明，免疫系統(tǒng)對化療療效的促進(jìn)作用可能需要較長時(shí)間才能顯現(xiàn)。此后續(xù)研究中，我們還需要更大的樣本量來進(jìn)一步確認(rèn)2個(gè)周期化療療效是否確實(shí)與CD4/CD8值無關(guān)。

上述結(jié)果表明，CD4/CD8值與NHL患者化療近期療效有密切聯(lián)系：CD4/CD8值偏低患者的近期療效不如CD4/CD8值正?；蚱哒?，說明免疫系統(tǒng)可能確實(shí)在化療中發(fā)揮了作用。后續(xù)研究中，我們需要在免疫缺陷動物模型上進(jìn)一步驗(yàn)證此結(jié)論并闡明其機(jī)制，還需要在樣本量更大、觀察指標(biāo)更全面的臨床研究中確認(rèn)CD4/CD8值偏低是否是影響化療近期療效的獨(dú)立因素。如果上述觀點(diǎn)均得以確認(rèn)，那么接下來的問題是：化療前CD4/CD8值及其在化療過程中的變化是否和遠(yuǎn)期療效相關(guān)？能否通過CD4/CD8值(并綜合考慮其他影響因素)來預(yù)測特定患者的療效，并據(jù)此調(diào)整化療方案？能否研制藥物對CD4/CD8值進(jìn)行干預(yù)以改善化療效果？這一系列問題都有賴于大量深入的后續(xù)研究，但無論如何，本研究都給出了正面的提示，為進(jìn)一步的研究提供了基礎(chǔ)。

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