陳 海 戚曉東 邱 萍

膠質(zhì)瘤相關(guān)癌基因1作為Hedgehog通路重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，可以在Sonic Hedgehog作用下與細(xì)胞核中的靶基因的啟動(dòng)子相結(jié)合，從而調(diào)控目的基因的轉(zhuǎn)錄[1]。為此，本研究就圍繞膠質(zhì)瘤相關(guān)癌基因1(Gli1)的表達(dá)與乳腺癌各分子亞型的關(guān)系展開分析。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月-2013年12月我院收治的、經(jīng)確診的80例乳腺癌患者，均為女性，年齡40～60歲，均未接受過針對乳腺癌的治療。其中，ER陽性50例，陰性30例；Her-2陽性24例，陰性56例。乳腺癌亞型：Luminal A型38例；Luminal B型12例；Her-2過表達(dá)型10例；Basal-like型20例。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學(xué)法 用甲醛固定組織標(biāo)本，石蠟包埋，連續(xù)切片為4 μm的蠟塊，安置于防脫載玻片上，選取中性磷酸鹽緩沖溶液(PBS)作為陰性對照，已知乳腺癌陽性組織為陽性對照。用二甲苯脫蠟，過氧化氫滅活內(nèi)源性酶，檸檬酸鈉緩沖溶液修復(fù)抗原，滴加Gli1抗體，4℃孵育16 h，加入羊抗兔二抗，PBS沖洗3次，DAB顯色，復(fù)染，脫水，封片。

1.2.2 判定標(biāo)準(zhǔn)[2]①按視野中陽性細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的比例計(jì)分：無陽性細(xì)胞計(jì)0分，陽性細(xì)胞數(shù)<25%計(jì)1分，陽性細(xì)胞數(shù)25%～50%計(jì)2分，陽性細(xì)胞數(shù)>50%計(jì)3分。②按切片中細(xì)胞顯色強(qiáng)度計(jì)分：無顯色計(jì)0分，淺黃色計(jì)1分，棕黃色計(jì)2分，棕褐色計(jì)3分。上述兩項(xiàng)所得分?jǐn)?shù)相加，最后結(jié)果>3分即為陽性，否則為陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ER、Her-2與Gli1表達(dá)的關(guān)系

50例ER陽性者中Gli1表達(dá)陽性21例，陽性率為42.0%；ER陰性者中Gli1陽性表達(dá)18例，陽性率為60.0%，Gli1表達(dá)與ER表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性。Her-2陽性者中Gli1的陽性表達(dá)25例，陽性率為48.0%；Her-2陰性者中Gli1陽性表達(dá)27例，陽性率為49.1%。Gli1表達(dá)與Her-2無明顯相關(guān)性，見表1。

表1 ER、Her-2表達(dá)與Gli1表達(dá)的相關(guān)性/例

注：與相對應(yīng)陰性相比，*為P<0.05，#為P>0.05。

2.2 乳腺癌各亞型中Gli1表達(dá)情況

在乳腺癌各分子亞型中，Luminal A型、Luminal B型、Her-2過表達(dá)型和Basal-like型中Gli1陽性表達(dá)分別有9、8、7和15例，陽性率分別為23.7%、66.7%、70.0%和75.0%；Luminal A型Gli1陽性率顯著低于Basal-like型，兩者相比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Luminal B型和Her-2過表達(dá)型Gli1陽性率與Basal-like型Gli1陽性率相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 乳腺癌各亞型中Gli1的表達(dá)情況(例,%)

注：*為與Basal-like型相比，P<0.05。

3 討論

目前，乳腺癌的發(fā)病因素尚未明確闡明，雌激素的長期作用、家族遺傳性、環(huán)境因素等都與乳腺癌的發(fā)病息息相關(guān)[3]。有相關(guān)研究表明Hedgehog通路的激活也會(huì)導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)病[4]。Gli1作為Hedgehog通路重要的調(diào)控因子也起著十分重要的作用。

本研究中，Gli1表達(dá)與雌二醇受體(ER)呈負(fù)相關(guān)，Gli1表達(dá)對乳腺癌細(xì)胞ER的表達(dá)有著抑制作用，因而降低細(xì)胞對雌激素的敏感度。同時(shí)，有相關(guān)報(bào)道表明，ER表達(dá)也能促進(jìn)Gli1表達(dá)，并且不受雌二醇濃度的影響[5-6]。并由此得知，Gli1表達(dá)與ER陰性的乳腺癌的進(jìn)展關(guān)系更為密切。在乳腺癌各種亞型中，結(jié)果證明了Luminal A型乳腺癌中Gli1的表達(dá)較低，無重大意義。但在其他三型中表達(dá)較高，尤其是Basal-like型乳腺癌，Gli1的高表達(dá)使得Gli與乳腺癌的關(guān)系更加進(jìn)一步[7]。

綜上所述，Gli1表達(dá)與非雌激素依賴性乳腺癌分子亞型關(guān)系更加緊密，雌二醇受體陰性乳腺癌的治療提供了新方案的可能；Gli1在乳腺癌各亞型中的表達(dá)率不同，尤其是在Basasl-like型乳腺癌中影響較大，使Gli1成為其治療的潛在性目標(biāo)，為臨床上乳腺癌的治療開發(fā)了新策略。

[1] Li Y，Yang W，Yang Q，et al.Nuclear localization of GLI1 and elevated expression of FOXC2 in breast cancer is associated with the basal-like phenotype〔J〕.Histol Histopathol，2012，27(4)：475-484.

[2] Jiao X，Wood LD，Lindman M，et al.Somatic mutations in the notch，NF-KB，PIK3CA，and hedgehog pathways in human breast cancers〔J〕.Genes Chromosomes Cancer，2012，51(5)：480-489.

[3] Wormald PJ.The agger nasi cell:the key to understanding the anatomy of the frontal recess〔J〕.Otolaryngol Head Neck Surg，2011,129(5):497-507.

[4] Choi BI,Lee HJ,Han JK,et al.Detection of hypervascular nodular hepatocellur carcinomas:value of triphasic helical CT compared with iodized oil CT〔J〕.AJR Am J Roentgenol，1997,168(1):219-224.

[5] Khan MA,Com BS CS,Brunt EM,et al.Positron emission tomography scanning in the evaluation of hepatocellular carcinoma〔J〕.Ann Nucl Med,2009,14(2):121-126.

[6] Tabit CE，Chung WB，Hamburg NM，et al.Endothelial dysfunction in diabetes mellitus：molecular mechanisms and clinical implications〔J〕.Rev Endocr Metab Disord，2010，11(1)：61-74.

[7] Endemann DH，Schiffrin EL.Endothelial dysfunction〔J〕.JA m Soc Nephrol，2010，15(8)：1983-1992.