曲湘勇 蔡 超 何 俊 魏艷紅 毛凌峰袁小平 李學(xué)成 孫安權(quán)

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128;2.長(zhǎng)沙揚(yáng)航農(nóng)業(yè)科技有限公司，長(zhǎng)沙 410000;3.奧格生物技術(shù)(上海)有限公司，上海 201203)

硒(selenium)是動(dòng)物必需的微量元素，但硒對(duì)雌性動(dòng)物的影響研究較少。蛋雞缺硒時(shí)卵變形，同時(shí)產(chǎn)蛋量下降［1］。Brennana 等［2］認(rèn)為，硒在家禽繁殖性能上的作用與硒源和補(bǔ)硒時(shí)間有關(guān)。Renema等［3］試驗(yàn)表明，添加硒提高了蛋雞的產(chǎn)蛋量。潘翠玲［4］研究發(fā)現(xiàn)，添加富硒益生菌從第3周開(kāi)始可顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋率，且富硒益生菌組顯著高于亞硒酸鈉組。研究報(bào)道，硒的富集不僅可以改善動(dòng)物的健康狀況，而且將會(huì)提高動(dòng)物產(chǎn)品(肉、乳和蛋品等)的價(jià)值［5］。Surai等［6］研究表明，有可能通過(guò)在鵪鶉飼糧中添加酵母硒生產(chǎn)富硒鵪鶉肉和蛋。目前，鵪鶉飼糧中主要以亞硒酸鈉作為硒源，但研究表明其存在吸收率低、過(guò)氧化作用及潛在的污染等問(wèn)題［7］，已有國(guó)家禁止在動(dòng)物飼糧中添加亞硒酸鈉。酵母硒(selenium yeast，SY)和納米硒(nano-selenium，nano-Se)是當(dāng)前開(kāi)發(fā)的優(yōu)質(zhì)有機(jī)硒源，與無(wú)機(jī)硒相比，兩者活性高、安全低毒，有望取代無(wú)機(jī)硒［8-9］。納米硒的吸收率及其在機(jī)體中的沉積量?jī)?yōu)于酵母硒［10］，但兩者在鵪鶉生產(chǎn)中的使用及效果比較還未報(bào)道。因此，本試驗(yàn)通過(guò)在鵪鶉飼糧中添加不同水平酵母硒和納米硒來(lái)探討二者對(duì)鵪鶉產(chǎn)蛋后期生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、蛋中硒含量和血清抗氧化指標(biāo)的影響，為高效硒源研究與應(yīng)用提供實(shí)踐依據(jù)和科學(xué)理論，同時(shí)也為鵪鶉安全補(bǔ)硒及生產(chǎn)富硒鵪鶉蛋提供可行性依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)于2013年3—4月在長(zhǎng)沙楊航農(nóng)業(yè)科技有限公司鵪鶉養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行，將300只300日齡產(chǎn)蛋鵪鶉隨機(jī)分成5組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10羽。A組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，B、C組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.2、0.4 mg/kg酵母硒，D、E組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.2、0.4 mg/kg納米硒?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

試驗(yàn)鵪鶉分上、中、下3層階梯籠養(yǎng)，各重復(fù)均勻分布于鵪鶉室舍同列各層，鵪鶉室舍溫度為20～25℃，相對(duì)濕度65% ～75%。日喂2次(08:00、15:00)，乳頭式飲水器，自由飲水，采取早晚補(bǔ)光制度，光照時(shí)間為16 h/d，控制好舍內(nèi)溫度和相對(duì)濕度，并按照鵪鶉養(yǎng)殖場(chǎng)常規(guī)程序進(jìn)行消毒。預(yù)試期7 d，正試期42 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.2 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用有機(jī)硒源分為酵母硒(商品名稱為拉曼硒，有效成分硒含量2‰，由長(zhǎng)沙興嘉生物技術(shù)有限公司提供)和納米硒［商品名稱為喜來(lái)硒，有效成分硒含量1‰，由投射電子顯微鏡觀察，平均粒徑為50～100 nm，由奧格生物技術(shù)有限公司(上海)提供］。各試驗(yàn)組(B、C、D、E組)飼糧硒含量經(jīng)測(cè)定分別為0.306、0.503、0.307、0.505 mg/kg。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 生產(chǎn)性能

試驗(yàn)期間每日以重復(fù)為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、日采食量，并計(jì)算產(chǎn)蛋率、平均蛋重、料蛋比。

1.3.2 蛋品質(zhì)

試驗(yàn)第42天每組隨機(jī)選取12枚鵪鶉蛋，每個(gè)重復(fù)2枚。使用分析天平測(cè)定蛋重，游標(biāo)卡尺測(cè)定蛋形指數(shù)、蛋黃指數(shù)(蛋黃高度/蛋黃直徑)，使用Orka Thchnology公司的 Egg Shell Thickness、Egg Analyzer分別測(cè)定蛋殼厚度、蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位等。另從每組中取6枚鵪鶉蛋，在常溫下儲(chǔ)存30 d后再次測(cè)定哈氏單位。

1.3.3 蛋中硒含量

試驗(yàn)第14、28和42天，分別從每組選取12枚鵪鶉蛋，置于4℃冰箱保存，用于測(cè)定蛋中硒含量。參照鄧士林等［11］的方法，采用流動(dòng)注射氫化物發(fā)生原子吸收光譜法測(cè)定蛋中硒含量。

1.3.4 血清抗氧化指標(biāo)

試驗(yàn)第42天，分別從每組選取12只鵪鶉頸靜脈采血5 mL，緩緩注入試管中，傾斜試管，靜置30 min后，于3 000 r/min離心10 min，吸取上清液1.0～1.5 mL，注入 1.5 mL離心管中，置于-20℃冰箱保存，用于血清抗氧化指標(biāo)檢測(cè)。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性，總抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量使用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)由Excel 2003軟件初步處理后，用SASS 9.0軟件進(jìn)行GLM分析和Duncan氏法多重比較。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉產(chǎn)蛋后期生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，E組顯著提高了鵪鶉蛋平均蛋重(P＜0.05)，B、C、D組差異不顯著(P＞0.05);C、D組顯著提高了產(chǎn)蛋率(P＜0.05)，分別提高了 12.38%、16.07%;B、D 組顯著降低了料蛋比(P＜0.05)，分別降低了12.07%、34.36%，而C、E組則沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。

2.2 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉產(chǎn)蛋后期蛋品質(zhì)的影響

由表3可知，飼糧添加酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉產(chǎn)蛋后期的蛋形指數(shù)、蛋殼厚度和蛋黃指數(shù)沒(méi)有顯著影響(P＞0.05)。與對(duì)照組相比，C、E組極顯著提高了蛋黃色澤(P＜0.01)，分別提高了49.81%、71.25%，2種硒源均極顯著提高了哈氏單位(P＜0.01)，分別提高了22.22%、20.61%、25.37%、15.74%。與對(duì)照組相比，2種硒源對(duì)鵪鶉蛋儲(chǔ)藏30 d哈氏單位的影響同樣極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)。

表2 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉蛋產(chǎn)蛋后期生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of selenium yeast and nano-selenium on performance of quails during the late laying period

表3 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉產(chǎn)蛋后期蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effects of selenium yeast and nano-selenium on egg quality of quails during the late laying period

2.3 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉蛋中硒含量的影響

由表4可知，試驗(yàn)第14天，酵母硒組和納米硒組鵪鶉蛋中硒含量均極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，分別提高了38.06%、49.87%、54.45%、75.20%;相同添加水平的納米硒組高于酵母硒組。試驗(yàn)第28天，酵母硒組與納米硒組鵪鶉蛋中硒含量均極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，分別提高了65.59%、81.24%、43.11%、81.20%;相同添加水平的納米硒組高于酵母硒組。試驗(yàn)第42天，酵母硒組與納米硒組均極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，分別提高了55.51%、76.12%、30.45%、58.59%，相同添加水平的納米硒組高于酵母硒組。

表4 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉蛋中硒含量的影響Table 4 Effects of selenium yeast and nano-selenium on egg selenium content of quails μg/kg

2.4 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可知，飼糧中添加酵母硒或納米硒可明顯改善鵪鶉血清抗氧化指標(biāo)，極顯著提高了T-AOC及 GSH-Px、T-SOD 活性(P ＜0.01)，極顯著降低了MDA含量(P＜0.01)。相同添加水平的酵母硒與納米硒比較，D組GSH-Px活性極顯著高于B組(P＜0.01)，E組極顯著高于C組(P＜0.01);T-AOC沒(méi)有顯著差異(P＞0.05);E組TSOD活性極顯著高于C組(P＜0.01);D組MDA含量極顯著低于B組(P＜0.01)。

表5 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉血清抗氧化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of selenium yeast and nano-selenium on serum antioxidant indices of quails

3 討論

3.1 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉產(chǎn)蛋后期生產(chǎn)性能的影響

Payne 等［12］研究表明，飼糧添加0.15、0.30 mg/kg酵母硒對(duì)海蘭蛋雞的生產(chǎn)性能沒(méi)有影響，對(duì)蛋雞沒(méi)有毒性。何柳青等［13］試驗(yàn)報(bào)道，酵母硒添加水平對(duì)綠殼產(chǎn)蛋雞平均蛋重、產(chǎn)蛋率、料蛋比的作用不顯著，且略有下降趨勢(shì)，但趙慧賢等［14］在蛋雞飼糧中添加0.2 mg/kg酵母硒有提高蛋雞產(chǎn)蛋率和降低料蛋比的趨勢(shì)。曾禮華等［15］針對(duì)蛋雞接種疫苗受應(yīng)激產(chǎn)蛋量下降的情況，將納米硒和碘配合使用，添加0.45 mg/kg納米硒和4 mg/kg碘時(shí)，獲得最佳產(chǎn)蛋性能。本研究表明，0.2 mg/kg納米硒組對(duì)提高鵪鶉的生產(chǎn)性能表現(xiàn)出良好效果，可顯著提高產(chǎn)蛋率與平均蛋重，并降低料蛋比，0.4 mg/kg酵母硒組有提高鵪鶉生產(chǎn)性能的趨勢(shì)，可顯著提高產(chǎn)蛋率。

3.2 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉產(chǎn)蛋后期蛋品質(zhì)的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，酵母硒對(duì)鵪鶉蛋的蛋形指數(shù)沒(méi)有顯著影響，隨著納米硒添加水平提高有降低的趨勢(shì)。Henrieta 等［16］、何柳青等［17］報(bào)道，酵母硒對(duì)提高蛋殼厚度并沒(méi)有顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組蛋殼厚度與對(duì)照組無(wú)顯著差異，蛋黃色澤隨硒的添加水平提高而升高，0.4 mg/kg納米硒組效果最好。這可能因蛋黃的顏色來(lái)源于胡蘿卜素，而納米硒和酵母硒已證明具有良好的抗氧化性［18-19］，可清除動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的多種自由基，使鵪鶉蛋中的胡蘿卜素氧化減少，提高了鵪鶉蛋黃色澤、哈氏單位，且儲(chǔ)藏30 d后，酵母硒和納米硒組均能適當(dāng)保鮮，并隨著2種硒源的添加水平提高其效果增加。

3.3 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉蛋中硒含量的影響

當(dāng)前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)富硒禽蛋的開(kāi)發(fā)主要集中于雞蛋，已證明雞蛋蛋中的硒含量可以控制［20］。Nadezda等［21］研究發(fā)現(xiàn)，富硒雞蛋可滿足人體50%的硒需求量。Utterback等［22］研究報(bào)道，飼糧中添加0.3 mg/kg酵母硒都可顯著增加雞蛋中硒含量。Panye等［12］研究報(bào)道，蛋雞飼糧中添加0.15、0.30、0.60 mg/kg 酵母硒，試驗(yàn)第28 天測(cè)得蛋中硒含量分別為 0.366、0.495、0.670 mg/kg。潘翠玲［4］研究報(bào)道，在蛋雞飼糧中添加0.2、0.5、1.0 mg/kg酵母硒或亞硒酸鈉，試驗(yàn)第28天時(shí)的蛋中硒含量均顯著高于試驗(yàn)第7、14和21天時(shí)相應(yīng)硒添加水平組的蛋中硒含量。李靜等［23］在蛋雞飼糧中添加0.50 mg/kg酵母硒，試驗(yàn)第2周蛋中硒含量達(dá)到峰值。納米硒在蛋雞中應(yīng)用較少，Zhou等［24］試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，肉雞飼糧中添加0.3 mg/kg的納米硒可顯著提高雞肉組織中的硒含量，并且可改善雞肉的肉質(zhì)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)第14、28、42天，納米硒提高鵪鶉蛋中的硒含量的作用基本上隨著添加水平和時(shí)間的增加而增強(qiáng)，納米硒較酵母硒可穩(wěn)定增加蛋中硒含量，且高于酵母硒。第42天時(shí)，酵母硒下降的原因可能因?yàn)楫a(chǎn)蛋后期的鵪鶉本身機(jī)能開(kāi)始下降，從而影響到硒的吸收。納米硒對(duì)提高鵪鶉蛋中硒含量效果優(yōu)于酵母硒，可能因它吸收的機(jī)制有關(guān)。Liao等［25］、Zha等［26］、江龍［27］研究表明，納米硒具有獨(dú)特的性能，其與動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞膜具有更高效的相互作用界面，使黏膜通透性增加，促進(jìn)動(dòng)物的吸收。并由于在納米硒顆粒在腸道中形成了納米乳劑，可改進(jìn)腸道對(duì)硒的吸收［28］。由于本試驗(yàn)在鵪鶉產(chǎn)蛋后期進(jìn)行，鵪鶉的生理機(jī)能開(kāi)始下降，沒(méi)有對(duì)比產(chǎn)蛋高峰期時(shí)蛋中硒含量，整個(gè)鵪鶉產(chǎn)蛋過(guò)程中蛋中硒含量的規(guī)律還有待深入研究。

3.4 酵母硒和納米硒對(duì)鵪鶉血清抗氧化指標(biāo)的影響

田金可等［29］報(bào)道，飼糧中酵母硒可顯著提高肉雞血清GSH-Px活性。胥保華［30］研究發(fā)現(xiàn)，高劑量的納米硒能顯著提高血清GSH-Px活性，增強(qiáng)機(jī)體組織清除自由基、脂質(zhì)過(guò)氧化物的能力，使體內(nèi)自由基水平和MDA含量降低。納米硒所表現(xiàn)出的抗氧化能力強(qiáng)于酵母硒的機(jī)理盡管不是很清楚，但分析認(rèn)為可能與納米硒獨(dú)特的吸收機(jī)制、低毒、表面效應(yīng)大有關(guān)。Huang等［19］通過(guò)體外試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，納米硒具有直接清除體內(nèi)自由基的功能，如1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧陰離子、單線態(tài)氧和一氧化氮(NO)，還可使DNA免于氧化。而Wang等［31］試驗(yàn)報(bào)道，納米硒可提高大鼠GSH-Px和硫氧還蛋白還原酶(TrxR)活性，且毒性低于硒代蛋氨酸，可作為抗氧化劑使用。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加納米硒或酵母硒可改善鵪鶉產(chǎn)蛋后期的抗氧化功能，促進(jìn)機(jī)體抗氧化酶促體系的發(fā)生，且納米硒的抗氧化效果優(yōu)于酵母硒。

4 結(jié)論

①飼糧中添加0.2～0.4 mg/kg納米硒或酵母硒可顯著提高鵪鶉產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋性能。飼糧中添加酵母硒或納米硒對(duì)鵪鶉蛋品質(zhì)影響不大，但兩者皆極顯著提高了鵪鶉蛋哈氏單位，并可增加鵪鶉蛋儲(chǔ)存時(shí)間。

②飼糧中添加酵母硒或納米硒可極顯著提高鵪鶉蛋中硒含量，并隨著添加水平和時(shí)間的增加而增強(qiáng)，納米硒較酵母硒可穩(wěn)定增加蛋中硒含量，且高于酵母硒。

③飼糧中添加納米硒或酵母硒可顯著改善鵪鶉產(chǎn)蛋后期的抗氧化功能，納米硒的抗氧化效果優(yōu)于酵母硒。

④為保證產(chǎn)蛋后期鵪鶉蛋的優(yōu)質(zhì)高效生產(chǎn)，建議飼糧中添加0.2 mg/kg的納米硒為宜。

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