團(tuán)頭魴飼料磷需要量

劉漢超 葉元土 蔡春芳 姚林杰 陳科全 黃雨薇 龔 志

(蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，蘇州 215123)

磷是魚體生長所必需的常量礦物質(zhì)元素。磷不僅是細(xì)胞膜和核酸的重要組成部分，也是骨組織的主要結(jié)構(gòu)成分，且直接參與所有產(chǎn)生能量的胞內(nèi)反應(yīng)，因此磷具有非常重要的生理功能。魚類能夠在水中直接吸收磷，但是由于從水體中吸收的磷遠(yuǎn)不能滿足魚體需求，因此還需要從飼料中攝取。

團(tuán)頭魴(bluntnose black bream)俗稱鳊魚，是我國淡水養(yǎng)殖業(yè)中傳統(tǒng)的經(jīng)濟(jì)魚種之一。近年來，隨著團(tuán)頭魴養(yǎng)殖模式的推廣和養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大，配合飼料使用量不斷增加，對其飼料營養(yǎng)方面的研究也引起了國內(nèi)學(xué)者的關(guān)注。鄭秋珊等［1］以增重率(WGR)為評價(jià)指標(biāo)得到西伯利亞鱘魚對飼料中磷的需要量為5.0 g/kg。劉仙欽等［2］以增重率為評價(jià)指標(biāo)得到軍曹魚幼魚對飼料磷的需要量為9.1 g/kg。湯崢嶸等［3］測得鯽魚對飼料磷的需要量為9.2～12.2 g/kg。石文雷等［4］以增重率為評價(jià)指標(biāo)得到團(tuán)頭魴磷需要量為3.8～7.2 g/kg。本試驗(yàn)通過在配合飼料中添加不同水平的磷，研究其對團(tuán)頭魴生長性能、體組成以及組織中磷含量的影響，旨在確定團(tuán)頭魴飼料磷需要量。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

團(tuán)頭魴魚種由浙江省海鹽縣一星試驗(yàn)基地提供，磷酸二氫鈣由無錫華諾威動物保健品有限公司提供，食用級明膠購于上海魯博明膠有限公司，食用級酪蛋白購于甘肅省臨夏州華安生物制品有限責(zé)任公司，氯化膽堿和預(yù)混料由北京桑普生物化學(xué)有限公司提供，糊精、淀粉、纖維素購于海鹽六和化工有限公司。

1.2 試驗(yàn)飼料

根據(jù)團(tuán)頭魴的配合飼料營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)配方，在以酪蛋白、秘魯魚粉、豆油、糊精、淀粉和纖維素為原料的半純化基礎(chǔ)飼料中分別添加0、15.0、30.0、45.0、60.0、75.0 g/kg 磷酸二氫鈣，配制成磷水平為 3.8、6.9、10.1、13.2、16.4、19.5 g/kg的6種半純化試驗(yàn)飼料，試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。飼料原料經(jīng)粉碎過60目篩，混合均勻后加適量水?dāng)嚢?，用小型面條加工機(jī)加工成直徑1.5 mm的條狀料，電風(fēng)扇條件下干燥后再手工搓碎，篩選3～4 mm長的顆粒飼料置于-20℃冰箱中密封保存。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)團(tuán)頭魴平均初始體重為35 g，為池塘養(yǎng)殖的1冬齡魚種。試驗(yàn)魚經(jīng)14 d暫養(yǎng)、馴化后，選擇體格健壯、規(guī)格整齊的魚種480尾，隨機(jī)分成6組，每組設(shè)4個重復(fù)，每個重復(fù)放20尾魚。正試期為85 d。養(yǎng)殖試驗(yàn)為室外網(wǎng)箱養(yǎng)殖，網(wǎng)箱體積1.0 m×1.0 m×1.5 m，以海鹽縣長山河河水為水源，2臺1.5 kW葉輪式增氧機(jī)每天運(yùn)行8 h，日投喂2次，每天08:00、15:00定時(shí)投喂，日投喂量為魚體重的3%～5%。每14 d根據(jù)估算的魚體重增加量調(diào)整投喂量。整個養(yǎng)殖試驗(yàn)期間，水溫21.0～32.9℃、溶氧 ＞7.0 mg/L、pH 7.0～7.4、氨氮0.20～0.30 mg/L、硫化物＜0.05 mg/L。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(DM basis) %

1.4 樣品采集與分析

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，統(tǒng)計(jì)每個重復(fù)的飼料日攝入量和養(yǎng)殖天數(shù)，禁食24 h后稱量每個養(yǎng)殖網(wǎng)箱魚體總重和統(tǒng)計(jì)活魚尾數(shù)，計(jì)算增重率、成活率(SR)、飼料系數(shù)(FCR)、特定生長率、磷沉積率、蛋白質(zhì)沉積率，計(jì)算公式如下:

增重率(%)=100×(末體重-初體重)/初體重;

成活率(%)=100×終末活魚尾數(shù)/初始活魚尾數(shù);

飼料系數(shù)=飼料攝入量/(末體重-初體重);

特定生長率(%/d)=100×(ln末體重-ln初體重)/飼養(yǎng)天數(shù);

磷沉積率(%)=100×(試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體總重×試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體磷含量-試驗(yàn)開始時(shí)魚體總重×試驗(yàn)開始時(shí)魚體磷含量)/［飼料攝入量×飼料磷水平］;

蛋白質(zhì)沉積率(%)=100×(試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體總重×試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體粗蛋白質(zhì)含量-試驗(yàn)開始時(shí)魚體總重×試驗(yàn)開始時(shí)魚體粗蛋白質(zhì)含量)/［飼料攝入量×飼料粗蛋白質(zhì)水平含量］。

同時(shí)取全魚、肌肉、鰓蓋骨、鱗片、脊椎骨測定常規(guī)成分。采用105℃常壓干燥法測定干物質(zhì)含量，凱氏定氮法測定粗蛋白質(zhì)含量，索氏抽提法測定粗脂肪含量，高溫消化爐550℃灼燒法測定粗灰分含量，分光光度法測定磷含量。上述測定步驟均參照AOAC(1995)規(guī)定的方法進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，試驗(yàn)結(jié)果用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)組間差異，以P＜0.05表示差異顯著。根據(jù)增重率、飼料系數(shù)的數(shù)據(jù)，采用一元二次模型(quadratic model)分析團(tuán)頭魴飼料磷需要量。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料磷水平對團(tuán)頭魴生長性能的影響

由表2可以看出，團(tuán)頭魴的末體重、增重率均隨著飼料磷水平的增加呈先上升后下降的趨勢，6組團(tuán)頭魴增重率均大于250%。當(dāng)飼料中磷水平從3.8 g/kg增加到13.2 g/kg時(shí)，末體重和增重率均顯著上升(P＜0.05)，飼料系數(shù)顯著下降(P＜0.05);飼料磷水平從13.2 g/kg增加到19.5 g/kg時(shí)，末體重、增重率顯著下降(P＜0.05)，飼料系數(shù)顯著上升(P＜0.05)。團(tuán)頭魴的特定生長率也隨著飼料磷水平的增加呈先升后降的趨勢，飼料磷水平為13.2 g/kg試驗(yàn)組的特定生長率顯著高于 3.8、6.9、16.4、19.5 g/kg 4 個試驗(yàn)組(P＜0.05)。成活率在各組之間無顯著性差異(P＞0.05)。磷沉積率隨著飼料磷水平的增加呈逐漸下降的趨勢，3.8、6.9、10.1、13.2 g/kg 4 個試驗(yàn)組之間差異顯著(P ＜0.05)，13.2、16.4、19.5 g/kg 3個試驗(yàn)組之間磷沉積率不再顯著降低(P＞0.05)，提示飼料磷水平達(dá)到13.2 g/kg后魚體內(nèi)磷沉積基本穩(wěn)定。蛋白質(zhì)沉積率隨著飼料磷水平的增加呈先上升后下降的趨勢，13.2 g/kg組的蛋白質(zhì)沉積率顯著高于其他5組(P＜0.05)。結(jié)果提示飼料磷水平達(dá)到13.2 g/kg時(shí)魚體生長效果最好。采用一元二次模型分析飼料磷水平與團(tuán)頭魴增重率、飼料系數(shù)之間的關(guān)系，如圖1、圖2所示。經(jīng)回歸分析得出，當(dāng)飼料磷水平為12.98～13.18 g/kg時(shí)，團(tuán)頭魴可獲得最大的增重率。

2.2 飼料磷水平對團(tuán)頭魴體組成的影響

由表3可以看出，團(tuán)頭魴全魚粗灰分除飼料磷水平為3.8 g/kg試驗(yàn)組顯著低于其他組(P＜0.05)外，其他各組間差異不顯著(P＞0.05)，表明飼料磷水平為6.9 g/kg及以上試驗(yàn)組魚體粗灰分含量變化不顯著。團(tuán)頭魴全魚粗蛋白質(zhì)含量呈先上升后下降的趨勢，全魚粗脂肪含量呈逐漸下降趨勢，但是粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量在各組間均差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 飼料磷水平對團(tuán)頭魴全魚及組織中磷含量的影響

由表4可以看出，隨著飼料磷水平的增加，團(tuán)頭魴全魚、鰓蓋骨、脊椎骨、鱗片磷含量顯著上升(P＜0.05)。其中，飼料磷水平為16.4、19.5 g/kg試驗(yàn)組的全魚磷含量顯著高于3.8 g/kg試驗(yàn)組(P ＜0.05)，飼料磷水平為 6.9、10.1、13.2、16.4 g/kg 4個試驗(yàn)組差異不顯著(P＞0.05);飼料磷水平對肌肉磷含量無顯著影響(P＞0.05);飼料磷水平為19.5 g/kg試驗(yàn)組的鱗片磷含量顯著高于3.8 g/kg試驗(yàn)組(P＜0.05)，飼料磷水平為6.9、10.1、13.2、16.4、19.5 g/kg 5 個試驗(yàn)組間差異不顯著(P＞0.05);飼料磷水平為16.4、19.5 g/kg試驗(yàn)組的脊椎骨磷含量顯著高于3.8、6.9、10.1 g/kg試驗(yàn)組(P＜0.05);飼料磷水平為3.8 g/kg試驗(yàn)組的鰓蓋骨磷含量顯著低于其他5組(P ＜0.05)，飼料磷水平為 6.9、10.1、13.2、16.4、19.5 g/kg 5個試驗(yàn)組間差異不顯著(P＞0.05)。飼料磷水平為6.9 g/kg試驗(yàn)組鰓蓋骨和鱗片中鱗含量不再顯著增加(P＞0.05)，飼料磷水平為13.2 g/kg試驗(yàn)組脊椎骨和全魚中磷含量不再顯著增加(P＞0.05)，表明飼料磷水平為13.2 g/kg試驗(yàn)組魚體內(nèi)磷的積累基本飽和。

表2 飼料磷水平對團(tuán)頭魴生長性能的影響Table 2 Effects of dietary phosphorous level on growth performance of bluntnose black bream

圖1 飼料磷水平(x)與團(tuán)頭魴增重率(y)的關(guān)系Fig.1 Relationship between dietary phosphorous level(x)and WGR(y)of bluntnose black bream

圖2 飼料磷水平(x)與飼料系數(shù)(y)的關(guān)系Fig.2 Relationship between dietary phosphorous level(x)and FCR(y)

表3 飼料磷水平對團(tuán)頭魴體組成的影響(干重基礎(chǔ))Table 3 Effects of dietary phosphorous level on body composition of bluntnose black bream(dry weight basis) %

3 討論

3.1 飼料磷水平對團(tuán)頭魴生長性能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)飼料中磷水平不足時(shí)，在飼料中添加磷能顯著促進(jìn)團(tuán)頭魴的生長，飼料磷水平為13.2 g/kg試驗(yàn)組的團(tuán)頭魴具有最大的增重率。這一結(jié)果與黑鯛魚(Sparus macrocephlus)［5］、黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)［6］等魚類的研究結(jié)果類似，胡王龍等［5］認(rèn)為總磷水平為13.2 g/kg試驗(yàn)組中，黑鯛魚的增重率、特定生長率等這些指標(biāo)最高;李敬偉等［6］對黃顙魚磷需要量的研究表明，飼料適宜的磷水平為16.7～17.8 g/kg，當(dāng)飼料磷水平為16.7 g/kg時(shí)，生長率最大，當(dāng)飼料磷水平為17.8 g/kg時(shí)，飼料系數(shù)最小。對吉富羅非魚(Oreochromis niloticus)［7］、軍曹魚(Rachycentron canadum)［2］、西伯利亞鱘魚［1］(Acipenser baerii)、牙 鲆［8］(Paralichthys olivaceus)、大菱鲆［8］(Psetta maxima)等魚類的研究也表明，飼料中添加適量的磷能顯著促進(jìn)魚體的生長。

表4 飼料磷水平對團(tuán)頭魴全魚及組織中磷含量的影響(干重基礎(chǔ))Table 4 Effects of dietary phosphorous level on phosphorous content in whole body and tissues of bluntnose black bream(dry weight basis) %

水產(chǎn)動物對磷的需求在一個適宜的劑量范圍，飼料磷水平過低或過高均可能引起生長抑制、骨骼畸形、免疫機(jī)制下降［9］等。缺磷會導(dǎo)致吉富羅非魚［7］、軍曹魚［2］、西伯利亞鱘魚［1］、牙鲆［8］、大菱鲆［8］生長受阻，甚至還出現(xiàn)厭食癥、軟骨病、骨骼畸形、鈣流失等缺磷癥狀［1-2，7-8，10］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼喂較低磷水平飼料的團(tuán)頭魴生長受到抑制，增重率顯著低于其他各組，這可能是由于飼料中磷主要用來維持生理代謝過程，而用于生長的磷不足，因此導(dǎo)致低磷試驗(yàn)組增重降低;在該團(tuán)頭魴試驗(yàn)中，隨著飼料中磷水平繼續(xù)增加到16.4、19.5 g/kg時(shí)，團(tuán)頭魴增重率從13.2 g/kg試驗(yàn)組的385.1%顯著下降到351.3%、337.8%。在對吉富羅非魚［7］、軍曹魚［2］、西伯利亞鱘魚［1］、牙鲆［8］、大菱鲆［8］、石斑魚［11-12］等的研究中也得到了類似的結(jié)果，這可能是因?yàn)楫?dāng)磷添加量過高時(shí)，導(dǎo)致鈣磷比不平衡而出現(xiàn)“木桶效應(yīng)”，同時(shí)也對其他營養(yǎng)元素的吸收產(chǎn)生了抑制作用，從而阻礙了魚類的正常生長［13］。但眼斑擬石首魚的生長受飼料磷水平影響并不明顯［14］。不同魚類磷需要量的差異與多種因素有關(guān)，如試驗(yàn)魚種類、試驗(yàn)魚的大小、生長階段影響、環(huán)境因子、數(shù)據(jù)分析方法等，同時(shí)磷源種類和利用率也影響磷的需要量［14-15］。

3.2 飼料磷水平對團(tuán)頭魴全魚及組織中磷含量的影響

在對磷元素的研究中，水產(chǎn)動物機(jī)體組織中磷元素含量的變化可以作為其營養(yǎng)研究的評價(jià)指標(biāo)［16］。本試驗(yàn)中，隨著飼料磷水平的增加，團(tuán)頭魴的全魚磷含量逐漸上升，呈正相關(guān)性，全魚脂肪含量隨著飼料磷水平的增加呈現(xiàn)一定的下降趨勢，這一趨勢與翹嘴鲌(Erythroculter ilishaeformis)［17］、黑鯛魚(Sparus macrocephlus)［5］、西伯利亞鱘魚［1］、大黃魚(Pseudosciaena crocea)［18］的研究結(jié)果相似。這些研究推斷，出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因可能是磷缺乏抑制了脂肪酸的β氧化，而攝食高磷水平飼料的魚體內(nèi)，脂肪酸的β氧化增強(qiáng)，糖原生成增加，從而導(dǎo)致脂肪沉積的降低。本試驗(yàn)中，飼料磷水平顯著影響了團(tuán)頭魴脊椎骨、鰓蓋骨的磷含量，并存在一定的正相關(guān)。在對黑鯛魚［5］、西伯利亞鱘魚［1］、吉富羅非魚［7］、軍曹魚［2］的研究中也得到相似的結(jié)果。對黑線鱈魚(Melanogrammus aeglefinus)［13］的研究結(jié)果也表明脊椎骨和鰓蓋骨磷含量與磷水平顯著相關(guān)，隨著飼料磷水平的增加逐漸升高且趨于穩(wěn)定。魚類大部分磷存在于骨骼中，而骨骼參與磷的代謝，因此一般認(rèn)為骨磷含量可以作為確定飼料最適磷水平的主要參考指標(biāo)之一。魚類鱗片也是磷代謝和貯存的主要場所，鱗片鈣化的部分所含羥基磷灰石［Ca10(PO4)6(OH)2］可能是魚體磷和鈣的潛在貯存 庫［19］。 鱗 片 磷 含 量 在 虹 鱒 (Oncorhynchus mykiss)［20-21］、西伯利亞鱘魚［1］的研究中已被證明是評價(jià)魚體磷營養(yǎng)狀況的良好指標(biāo)。本試驗(yàn)中，飼料中磷水平顯著影響團(tuán)頭魴鱗片磷含量。

4 結(jié)論

綜合分析增重率、飼料系數(shù)、磷沉積率、蛋白質(zhì)沉積率、體成分以及組織磷含量等評價(jià)指標(biāo)，團(tuán)頭魴飼料磷需要量為12.98～13.18 g/kg。

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