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      皮膚鱗狀細(xì)胞癌組織中人乳頭瘤病毒型別的檢測(cè)

      2014-10-20 05:54:06震,羅
      實(shí)用皮膚病學(xué)雜志 2014年1期
      關(guān)鍵詞:危型鱗狀感染率

      王 震,羅 芳

      皮膚鱗狀細(xì)胞癌(skin squamous cell carcinoma,SSCC)是起源于表皮或附屬器角質(zhì)形成細(xì)胞的一種惡性腫瘤,常發(fā)生于某些皮膚病或癌前疾病的基礎(chǔ)上,或者由各種癌前疾病發(fā)展而來(lái),少數(shù)為原發(fā)性[1]。發(fā)病率在非黑素瘤皮膚癌(non melanoma skin cancer,NMSC)中僅次于基底細(xì)胞癌(basal cell carcinoma,BCC)。近年來(lái)SSCC的發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢(shì)[2]。SSCC由于容易出現(xiàn)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,它的危險(xiǎn)性比BCC高的多[3]。SSCC原因不明,隨著人乳頭瘤病毒(HPV)在SSCC中不斷被檢出,HPV與SSCC發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性越來(lái)越受到重視。筆者對(duì)300例SSCC患者皮損組織中HPV型別進(jìn)行檢測(cè),初步分析SSCC組織HPV的感染狀況和型別分布規(guī)律,探討SSCC的病因和發(fā)病機(jī)制。

      1 資料與方法

      1.1 病例資料

      2001年1月~2011年1月在湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院門診和住院的300例患者,其病灶經(jīng)臨床和組織病理學(xué)檢查均診斷為SSCC,收集其組織標(biāo)本共300份。所有患者均未接受過(guò)放療和化療。SSCC按統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷,由臨床醫(yī)師使用統(tǒng)一的登記表格進(jìn)行填寫、匯總、統(tǒng)計(jì)和分析。

      1.2 研究方法和儀器

      統(tǒng)計(jì)分析入選患者的SSCC確診例數(shù)、性別、職業(yè)、皮損部位和確診年齡分布、組織病理診斷和組織病理分級(jí)分布特征,以及實(shí)驗(yàn)室HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果。采用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)進(jìn)行型別分析,主要檢測(cè)型別為低危型HPV6、11和高危型HPV16、18、31、33。應(yīng)用PCT-200型基因擴(kuò)增儀進(jìn)行檢測(cè)。引物設(shè)計(jì)見表1。

      表1 HPV引物設(shè)計(jì)

      1.3 SSCC診斷標(biāo)準(zhǔn)

      SSCC診斷主要根據(jù)其病史、臨床癥狀與體征,以及實(shí)驗(yàn)室檢查。實(shí)驗(yàn)室檢查包括PCR檢測(cè)HPV-DNA以及型別和皮膚組織病理檢查等。SCC按Broders分級(jí),Ⅰ級(jí):分化良好的鱗狀細(xì)胞>75%;Ⅱ級(jí):分化良好的鱗狀細(xì)胞>50%;Ⅲ級(jí):分化良好的鱗狀細(xì)胞>25%;Ⅳ級(jí):分化良好的鱗狀細(xì)胞<25%。

      1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

      采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,樣本之間差異性比較用χ2檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 一般資料

      300例SSCC患者中男196例,女104例,男女之比為1.88:1。發(fā)病年齡:平均年齡 (51.82±16.12)歲(15~87歲),其中>50歲170例(56.67%),51~70歲SSCC的發(fā)病率最高(118例,占39.33%),31~50歲100例(33.33%)。發(fā)病部位:頭面部131例(43.67%),頸部76例(25.33%),四肢30例(10.00%),軀干25例(8.33%),生殖器和腹股溝部位38例(12.67%)。組織病理分級(jí):Ⅰ級(jí)165例(55.00%),Ⅱ級(jí)59例(19.67%),Ⅲ級(jí)58例(19.33%),Ⅳ級(jí)18例(6.00%)。

      2.2 HPV感染及分布

      300例SSCC患者中,HPV檢出188例,HPV感染率為62.67%,有122例未檢出HPV,占40.67%。男性HPV檢出130例,HPV感染率為66.33%(130/196) ;女性HPV檢出58例,HPV感染率為55.78%(58/104),其中Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)和Ⅳ級(jí)HPV感染率分別為72.12%、55.93%、44.83%和55.56%。300例SSCC患者中高分化(Ⅰ~Ⅱ級(jí))224例(74.67%),低分化(Ⅲ~Ⅳ級(jí))76例(25.33%)。SSCC HPV感染率無(wú)性別差異(P>0.05),見表2。頭面部、頸部、四肢、軀干以及生殖器和腹股溝部HPV感染率分別為70.23%、65.79%、43.33%、28.00%和68.42%。不同發(fā)病部位HPV感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表3。

      表2 SSCC不同組織病理分級(jí)患者HPV感染比較[例(%)]

      表3 188例HPV陽(yáng)性患者不同發(fā)病部位HPV型別分布情況(例)

      2.3 SSCC不同組織病理分級(jí)患者HPV感染率及型別分布

      188例HPV陽(yáng)性患者中共檢出高危型(HPV16、33)感染51例,低危型(HPV6)感染49例,均為單一型別感染。高分化(Ⅰ~Ⅱ級(jí))組HPV感染率為67.86%,低分化(Ⅲ~ Ⅳ級(jí))組HPV感染率為47.37%,兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表1。高危型HPV在高分化組(Ⅰ~Ⅱ級(jí))感染率為12.50%(28/224),與低分化組(Ⅲ~ Ⅳ級(jí))感染率30.26%(23/76)相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);低危型HPV在高分化組(Ⅰ~ Ⅱ級(jí))感染率為12.50%,與低分化(Ⅲ~ Ⅳ級(jí))感染率28.95%(22/76)相比, 兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表4。

      表4 188例不同組織病理分級(jí)HPV陽(yáng)性患者型別分布(例 )

      2.4 不同發(fā)病部位HPV型別分布差異

      低危型HPV在頭面部、頸部、四肢、軀干以及生殖器和腹股溝部的感染率分別為21.37%、13.16%、6.67%、4.00%和21.05%,低危型HPV感染率在不同發(fā)病部位間,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。高危型HPV在頭面部、頸部、四肢、軀干以及生殖器和腹股溝部的感染率分別為19.08%、19.74%、3.33%、4.00%和23.68%,高危型HPV感染率在不同發(fā)病部位間,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

      3 討論

      病毒的致癌作用在惡性腫瘤研究中日益受到重視,HPV與宮頸癌的關(guān)系已經(jīng)日益明確,同時(shí)HPV與SSCC的關(guān)系也受到學(xué)者專家們的關(guān)注。根據(jù)致癌性大小,HPV感染分為低危型和高危型,低危型有HPV6、11、40、42、43等,與表皮瘤樣增生性疾病相關(guān);高危型包括HPV16、18、31、33、35等,與上皮惡性腫瘤密切相關(guān)[5]。

      本次研究結(jié)果顯示HPV在SSCC的感染率為62.67%,明顯高于健康女性宮頸感染率(13.7%)[6],略低于尖銳濕疣患者(64.18%)[7]。男性HPV感染率為66.33%,女性HPV感染率為55.78%,無(wú)性別差異。國(guó)外一些研究者通過(guò)大樣本觀察研究顯示HPV感染患者SSCC的發(fā)病率明顯升高[8,9]。有作者報(bào)道HPV感染者發(fā)生SSCC的趨勢(shì)可能會(huì)隨著HPV感染率的增加而增加[10]。HPV感染很可能是誘發(fā)SSCC的一個(gè)重要原因,因此重視HPV檢測(cè)可能有利于該疾病的預(yù)防和治療。

      高分化型(Ⅰ~Ⅱ級(jí))共224例更為常見,分化程度越低患者越少。SSCC的惡性程度與HPV的感染率關(guān)系不大,高分化SSCC HPV的感染率反而高于低分化。惡性程度主要與感染HPV型別有關(guān)。高危型HPV在低分化(Ⅲ~Ⅳ級(jí))的SSCC患者中檢出率顯著高于高分化組,其主要型別是HPV16、33。有研究結(jié)果顯示高危型HPV- 16 或18 的E6、E7 蛋白協(xié)同作用可使細(xì)胞發(fā)生永生化和轉(zhuǎn)化[11,12]。鄧曼鈴等[13]研究結(jié)果顯示HPV16在宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN )Ⅱ~Ⅲ級(jí)及宮頸癌組織中的陽(yáng)性率最高。李穎等[14]研究發(fā)現(xiàn)HPVl6 E7是SSCC發(fā)生的一個(gè)獨(dú)立性因素,其存在具有增強(qiáng)SSCC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)性。Iftner等[15]研究顯示SSCC患者高危型HPV16陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組。所以HPV16在宮頸癌和SSCC的惡性發(fā)展過(guò)程中可能發(fā)揮著重要的作用,應(yīng)重視對(duì)此型別的檢測(cè)。惡性程度較低的SSCC患者主要感染低危型HPV6,提示預(yù)后較好。因此,HPV-DNA分型檢測(cè)對(duì)SSCC高危人群的篩查、臨床診斷、預(yù)后判斷及疫苗的研制提供了重要的理論依據(jù)。

      HPV感染率在不同發(fā)病部位存在顯著性差異,頭頸部與生殖器和腹股溝部位的感染率顯著高于軀干與四肢,與孫瑩等[16]研究結(jié)果一致。高危型和低危型HPV感染在不同部位差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但不同型別在不同部位是否存在特異性感染還有待今后進(jìn)一步的研究。Gregoire等[17]檢測(cè)117例陰莖SSCC患者皮損HPV感染型別,其中88.5%為HPV16。本次研究結(jié)果顯示高危型HPV感染在生殖器和腹股溝部位主要型別亦為HPV16。由于HPV型別多,任何一種方法均無(wú)法檢測(cè)出所有類型,目前的研究主要集中在HPV- DNA及其抗體水平的檢測(cè)。然而由于選擇的檢測(cè)方法不同,其敏感性及檢測(cè)結(jié)果均存在很大的差異[2]。SSCC的病因包括紫外線、電離輻射、化學(xué)制劑、器官移植、皮膚慢性病和HPV感染[18],而HPV不同型別感染與這些因素是否存在協(xié)同或者相加作用,還有待進(jìn)一步的研究。

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