王書云，王潔，黃健，李國玉，王金輝，*

(1.沈陽藥科大學(xué) 中藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016；2.石河子大學(xué) 藥學(xué)院，新疆 石河子 832002)

中藥工業(yè)

△*

王金輝，教授，研究方向：中藥和天然藥物中生物活性成分的發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化；Tel：(024)23986479，E-mail：tcm_syphu@163.com

蠔貝鈣片中微量元素的含量測定研究

王書云1，王潔1，黃健1，李國玉2，王金輝1，2*

(1.沈陽藥科大學(xué) 中藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016；2.石河子大學(xué) 藥學(xué)院，新疆 石河子 832002)

目的通過對蠔貝鈣片中微量元素的測定，對其安全性進(jìn)行評價(jià)。方法采用石墨爐原子吸收光譜法、火焰原子吸收光譜法、火焰發(fā)射原子吸收光譜法和氫化物原子熒光光度法，分別測定3批蠔貝鈣片中鉛、鎘、汞、砷、銅、鉻、鐵、鉀8種微量元素的含量。結(jié)果3批蠔貝鈣片中重金屬含量均在外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WM/T 2-2004)和《中國藥典》中藥重金屬等物質(zhì)限量標(biāo)準(zhǔn)草案規(guī)定的安全范圍之內(nèi)。結(jié)論不同批次蠔貝鈣片中微量元素的含量差別不大，3批蠔貝鈣片中重金屬的含量均低于國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，無安全隱患，可放心食用。

蠔貝鈣片；微量元素；原子吸收分光光度法

蠔貝鈣片是以蠔貝為原料的全天然含鈣量高的海洋藥物，具有補(bǔ)鈣壯骨的功效，用于兒童缺鈣及老年骨質(zhì)疏松等癥，藥理研究表明[1-2]，蠔貝鈣片對維甲酸造成雄性大鼠的骨質(zhì)疏松模型，具有防治作用，能顯著提高血鈣、增加骨重量和骨鈣、磷總含量，具有顯著的補(bǔ)鈣、促進(jìn)骨生長作用。

作為天然鈣，蠔貝是否自身合成有對人體有益的微量元素；另外，隨著污染日益嚴(yán)重[3]，近海產(chǎn)的蠔貝是否也受到影響，重金屬等有害元素是否超標(biāo)，蠔貝鈣片是否存在安全隱患，是否可以放心食用？這些問題越來越受人們關(guān)注。目前，關(guān)于蠔貝及蠔貝鈣片的微量元素測定尚未見文獻(xiàn)報(bào)到，筆者采用原子吸收分光光度法對3批蠔貝鈣片中鉛、鎘、汞、砷、銅、鉻、鐵、鉀8種微量元素進(jìn)行測定。

1 儀器和材料

1.1 儀器

AAnalyst800原子吸收光譜儀(鉑金埃爾默儀器有限公司)，AFS9800原子熒光光譜儀(北京海光儀器有限公司)，CEM Mars6微波消解儀(美國培安科技公司)，SartoriusBS210S型電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)。

1.2 試劑與試藥

鉛、鎘、汞、砷、銅、鉻、鐵、鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(國家鋼鐵材料測試中心)，蠔貝鈣片(福建泉州恒達(dá)制藥有限公司，批號：20120709，20121112，20130410)，試劑均為分析純或優(yōu)級純。

2 方法和結(jié)果

蠔貝鈣片中微量元素測定參考《中國藥典》2010版[4]重金屬測定方法和《食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法》2003年版[5]中鉛、鎘、汞、砷、銅、鉻、鐵、鉀含量測定方法測定。

2.1 測試條件

2.1.1 鉛測定條件 石墨爐原子吸收光譜法。波長：283.3 nm，狹縫：0.2 nm，燈電流：5 mA，干燥溫度：120 ℃，持續(xù)15 s，灰化溫度：450 ℃，持續(xù)15 s；原子化溫度：1 800 ℃，持續(xù)5 s。

2.1.2 鎘測定條件 石墨爐原子吸收光譜法。波長：228.8 nm，狹縫：0.2 nm，燈電流：8 mA，干燥溫度：120 ℃，持續(xù)20 s，灰化溫度：450 ℃，持續(xù)20 s；原子化溫度：1 800 ℃，持續(xù)3 s。

2.1.3 鉻測定條件 石墨爐原子吸收光譜法。波長：357.9 nm，狹縫：0.2 nm，燈電流：5 mA，干燥溫度：120 ℃，持續(xù)20 s，灰化溫度：800 ℃，持續(xù)10 s；原子化溫度：1 900 ℃，持續(xù)3 s。

2.1.4 銅測定條件 火焰原子吸收光譜法。波長：324.8 nm，狹縫：0.2 nm，燈電流：3 mA，乙炔流量：2 L·min-1，氧氣流量2 L·min-1，并進(jìn)行背景校正。

2.1.5 鐵測定條件 火焰原子吸收光譜法。波長：248.3 nm，狹縫：0.2 nm，燈電流：3 mA，乙炔流量：2 L·min-1，氧氣流量：2 L·min-1，并進(jìn)行背景校正。

2.1.6 鉀測定條件 火焰發(fā)射光譜法。波長：766.5 nm，狹縫：0.2 nm，燈電流：3 mA，乙炔流量：2 L·min-1，氧氣流量：2 L·min-1，并進(jìn)行背景校正。

2.1.7 砷測定條件 氰化物原子熒光光譜法。光電倍增電壓：300 V，原子化溫度：200 ℃，原子化器高度：8 mm，燈電流：60 mA，氬氣載氣流量：400 mL·min-1，屏蔽氣流量：900 mL·min-1。

2.1.8 汞測定條件 原子熒光光譜法。光電倍增管負(fù)電壓：300 V，原子化溫度：200 ℃，原子化器高度：8 mm，燈電流：20 mA，氬氣載氣流量：400 mL·min-1，屏蔽氣流量：900 mL·min-1。

2.2 樣品預(yù)處理

精密稱取供試品約0.5 g，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加優(yōu)級硝酸7 mL，混勻，放置過夜，加優(yōu)級過氧化氫1 mL(30%)，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套，置微波消解儀內(nèi)消解，等消解完全，冷卻后取出，將消解液轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯燒杯中，在低溫電熱板上加熱至消解液剩約1 mL左右取下，至通風(fēng)櫥中過夜，第二天加2 mL高錳酸鉀溶液(1%)，搖勻，放置30 min，用草酸溶液(1%)洗入25 mL比色管中，定容后搖勻即得，平行做兩份，同時(shí)做空白溶液。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

2.3.1 鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用0.5%稀硝酸溶液稀釋成濃度為1 μg·mL-1的鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。分別精密量取鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用0.5%稀硝酸溶液稀釋制成每1 mL分別含鉛0.00，0.01，0.02，0.03，0.05 μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別精密量取1 mL，精密加含1%磷酸二氫銨和0.2%硝酸鎂的溶液0.5 mL，混勻，注入石墨爐原子化器，測定吸光值，以吸光值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

2.3.2 鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用0.5%稀硝酸溶液稀釋成濃度為1 μg·mL-1的鎘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別精密量取鎘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用0.5%硝酸溶液稀釋制成每1 mL分別含鎘0.00，0.001，0.002，0.003，0.004 μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液。注入石墨爐原子化器，測定吸光值，以吸光值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

2.3.3 鉻標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用0.5%稀硝酸溶液稀釋成濃度為1 μg·mL-1的鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用0.5%硝酸溶液稀釋制成每1 mL分別含鎘0.00，0.002 5，0.005，0.007 5，0.01 μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液。注入石墨爐原子化器，測定吸光值，以吸光值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

2.3.4 銅標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取銅標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用0.5%稀硝酸溶液稀釋成濃度為10 μg·mL-1的銅標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用0.5%硝酸溶液稀釋制成每1 mL分別含銅0.0，0.5，1，1.5，2.0 μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液。注入原子化器，測定吸光值，以吸光值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

2.3.5 鐵標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用0.5%稀硝酸溶液稀釋成濃度為10 μg·mL-1的鐵標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用0.5%硝酸溶液稀釋制成每1 mL分別含鐵0.0，1.0，2.0，3.0，4.0 μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液。注入原子化器，測定吸光值，以吸光值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

2.3.6 鉀標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用0.5%稀硝酸溶液稀釋成濃度為10 μg·mL-1的鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用0.5%硝酸溶液稀釋制成每1 mL分別含鉀0.0，1.0，2.0，3.0，4.0 μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液。導(dǎo)入火焰發(fā)射器，測定發(fā)射強(qiáng)度，以發(fā)射強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

2.3.7 砷標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取砷標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用5%稀鹽酸稀釋成濃度為1 μg·mL-1的砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別精密取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量至100 mL容量瓶中，再精密加入濃鹽酸10 mL，5%硫脲10 mL，用去離子水定容至刻度，搖勻，即得1 mL分別含砷2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 ng的溶液，測定熒光強(qiáng)度，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

2.3.8 汞標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)溶液適量至容量瓶中，用5%稀硝酸稀釋成濃度為1 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別精密取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用5%稀硝酸稀釋成1 mL分別含汞0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ng的溶液，測定熒光強(qiáng)度，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

表1 各微量元素線性關(guān)系及范圍

2.4 樣品測定

分別對3批樣品按2.2項(xiàng)下方法預(yù)處理，在2.1項(xiàng)下條件進(jìn)行測定，結(jié)果見表2。

表2 不同批次蠔貝鈣片中微量元素含量測定 /mg·kg-1

3 結(jié)論

不同批次蠔貝鈣片中微量元素的含量差別不大，3批蠔貝鈣片中重金屬的含量均低于我國藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WM/T 2-2004)[6]和《中國藥典》中藥重金屬等物質(zhì)限量標(biāo)準(zhǔn)草案規(guī)定[7]，無安全隱患，可放心使用。

對中藥材及制劑中重金屬含量的監(jiān)控是保證藥物質(zhì)量的前提，因此，要加大對中藥材及制劑中重金屬的質(zhì)量控制，以保證藥品質(zhì)量和用藥安全。

[1] 范陳慶，謝振家.蠔貝鈣片對大白鼠維甲酸型骨質(zhì)疏松癥的防治作用[J].海峽藥學(xué)，1998，10(2)：11-13.

[2] 陳麗娟，陳清澄，薛玲，等.蠔貝鈣對大鼠骨質(zhì)疏松模型的壯骨作用[J].海峽藥學(xué)，1995，7(3)：78-80.

[3] Ernst E.Toxic heavy metals and undeclared drugs in Asian herbal medicines[J].Trends in Pharm Sci，2002，23(3)：136-139.

[4] 國家藥典委員會(huì).中國藥典[S].北京：一部.中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄48.

[5] 衛(wèi)生部.食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法(理化部分)[M].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

[6] 商務(wù)部.藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WM/T 2-2004[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004.

[7] 國家藥典委員會(huì).中藥中重金屬、農(nóng)殘、黃曲霉毒素等物質(zhì)限量標(biāo)準(zhǔn)草案[S].2012.

DeterminationofTraceElementsinHaobeiCalciumTablet

WANGShuyun1，WANGJie1，HUANGJian1，LIGuoyu2，WANGJinhui1，2*

(1.ShenyangPharmaceuticalUniversity，Shenyang110016，China；2.ShiheziUniversity，Shihezi832002，China)

Objective：To evaluate the safety of Haobei Calcium Tablet through the investigation of trace elements.MethodsThe trace elements(Pb，Cd，Cr，Cu，K，F(xiàn)e，As，Hg) in 3 batches of Haobei Calcium Tablet were determined by graphite furnace atomic absorption spectrometry，flame atomic absorption spectrometry，fire emission atomic absorption spectrometry and hydride atomic fluorescence spectrophotometry.ResultsThe heavy metals in 3 batches were all qualified the standards limit.ConclusionThere was only a little difference among the content of trace elements in different batches.The heavy metals in all batches of Haobei Calcium Tablet were in the security range，so it could be safely used.

Haobei Calcium Tablet；Trace elements；Atomic absorption spectrometry

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.02.012

2013-09-02)