李曉玲　綦素霞　張慶　華堅　周濤　張芳

【摘要】 目的：研究茯苓與生姜組合物的抗癌止嘔作用。方法：通過順鉑、硫酸銅所致水貂嘔吐模型觀察茯苓與生姜組合物的止嘔作用；觀察茯苓與生姜組合物對小鼠S180肉瘤、小鼠肝癌H22、小鼠艾氏腹水瘤的抑制作用。結(jié)果：茯苓與生姜組合物對順鉑、硫酸銅所致水貂的嘔吐反應均有對抗作用，對小鼠S180肉瘤、小鼠肝癌H22、小鼠艾氏腹水瘤有明顯抑制作用（P<0.01）。結(jié)論：茯苓與生姜組合物可抗癌止嘔，是天然、低毒的藥物。

【關鍵詞】 茯苓與生姜組合物； 嘔吐； 癌癥

癌癥是威脅人類健康的重大疾病，目前多以放化療為主。嘔吐是癌癥放化療中常發(fā)生的副反應。嘔吐可引起脫水、電解質(zhì)紊亂及代謝性酸中毒等，嚴重影響患者生存質(zhì)量，甚至中斷治療。目前臨床常用的止吐藥物如抗膽堿能藥、抗組胺藥、抑制5羥色胺（5-HT3）類藥及NK1受體拮抗藥等雖有良好的止吐效果，但副作用相對較大，某些藥物價格昂貴，亟待天然抗癌止嘔藥物的研制[1-2]。

茯苓（Poria cocos wolf）為多孔菌科真菌，茯苓的干燥菌核有利水滲濕、健脾寧心等功能，茯苓是多種方劑及中成藥的原料，有“十藥九茯苓”之說?，F(xiàn)代藥理學研究表明，茯苓具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能、抗炎等生物活性[3]。生姜以其特有的“姜辣素”被譽為“嘔吐圣藥”，能夠?qū)沽蛩徙~、阿樸嗎啡及順鉑導致的嘔吐，抑制腸道嗜鉻細胞釋放致吐因子5-HT3及P物質(zhì)[4-5]。本文探討茯苓與生姜組合物（以下簡稱姜茯組合物）的抗癌止嘔作用。

1 材料與方法

1.1 動物 （1）雄性成年水貂，體重1.3～1.6 kg，由青島特種養(yǎng)殖動物飼養(yǎng)中心提供，每只水貂單獨置于75 cm×50 cm×50 cm的鐵籠中。實驗前自由飲食，24 h自然光照射。（2）昆明種小鼠，體重（20±2）g，由青島市藥檢所實驗動物中心提供。實驗前自由飲食，24 h自然光照射。

1.2 試劑 （1）生姜，購于山東平度；茯苓，購于青島眾生大藥房。（2）鹽酸昂丹司瓊（ondansetron ）注射液，奧賽康制藥。（3）順鉑（cisplatin），山東齊魯制藥廠。（4）硫酸銅（copper sulfate ），上海亨達化學制品公司。

1.3 方法

1.3.1 姜茯組合物對順鉑致嘔作用的研究 將水貂隨機分為四組，每組6只：A組為順鉑模型對照組，B組為昂丹司瓊陽性藥物組，C組為姜辣素組，D組為茯苓與姜辣素的天然藥物組合物組。A組給予生理鹽水預處理，B組給予昂丹司瓊7.5 mg/kg預處理，C組給予姜辣素10 g/kg（相當于含生藥量1 g）預處理，D組給予天然藥物組合物10 g/kg（相當于含生藥量1 g）預處理，各組均在給藥30 min后給予順鉑7.5 mg/kg，ip，觀察水貂在給藥后6 h內(nèi)的嘔吐反應，記錄其嘔吐潛伏期、干嘔次數(shù)和嘔吐次數(shù)。

1.3.2 姜茯組合物對硫酸銅致嘔作用的研究 將水貂隨機分為四組，每組6只：A組為硫酸銅模型對照組，B組為昂丹司瓊陽性藥物組，C組為姜辣素組，D組為茯苓與姜辣素的天然藥物組合物組。A組給予生理鹽水預處理，B組給予昂丹司瓊7.5 mg/kg預處理，C組給予姜辣素10 g/kg（相當于含生藥量1 g）預處理，D組給予天然藥物組合物10 g/kg（相當于含生藥量1 g）預處理，各組均在給藥30 min后按40 mg/kg，ig給予硫酸銅，觀察水貂在給藥后2 h內(nèi)的嘔吐反應，記錄其嘔吐潛伏期、干嘔次數(shù)和嘔吐次數(shù)。

1.3.3 對小鼠S180肉瘤生長的抑制試驗 使用傳代5～7 d生長良好的乳白色腹水，以適量無菌生理鹽水稀釋成瘤細胞懸液，細胞數(shù)為107個/mL，每組12只，每鼠右腋窩皮下接種0.2 mL（含瘤細胞2×106個）。接種次日隨機分組，陰性對照組給予0.5 mL蒸餾水；陽性藥物組給予環(huán)磷酰胺20 g/（kg·d）；實驗組將姜茯組合物分為200、100 mg/mL兩個劑量組，每鼠灌胃0.5 mL，連續(xù)給藥10 d。常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲食。停藥次日，小鼠全部脫頸椎處死，剝?nèi)∑は聦嶓w瘤瘤塊稱重，按下列公式計算腫瘤抑制率（%）：腫瘤抑制率=[對照組平均瘤重（C）-實驗組平均瘤重（T）]/對照組平均瘤重（C）。

1.3.4 對小鼠肝癌H22生長的抑制試驗 分組、劑量、給藥方式、實驗時間與S180肉瘤株相同。

1.3.5 對小鼠艾氏腹水瘤（實體瘤EAC）的抑制試驗 分組、劑量、給藥方式、實驗時間與S180肉瘤株相同。

1.3.6 姜茯組合物急性毒性試驗 昆明種小鼠30只，雌雄各半，給予姜茯組合物膠囊劑1 g/mL，每只0.8 mL，即小鼠的最大灌胃體積，采用常規(guī)的最大耐受量試驗，觀察其急性毒性；用藥后觀察連續(xù)觀察14 d，記錄相關數(shù)據(jù)包括小鼠活動狀態(tài)、飲食、糞便、呼吸、體重及死亡情況。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理，計量資料以（x±s）表示，比較采用應用t檢驗及單因素方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 姜茯組合物對順鉑致嘔作用的影響 與對照組比較，各治療組均能減少干嘔次數(shù)和嘔吐次數(shù)，延長嘔吐潛伏期（P<0.01），其中姜茯組合物能夠有效降低致嘔率，見表1。

2.2 姜茯組合物對硫酸銅致嘔作用的影響 與對照組比較，各治療組均能減少干嘔次數(shù)及嘔吐次數(shù)，延長嘔吐潛伏期（P<0.01），姜茯組合物組抗嘔吐效果優(yōu)于姜辣素組，見表2。

表1 姜茯組合物對順鉑致嘔作用的影響

組別 致吐率（%） 潛伏期

（min） 干嘔次數(shù)（次） 嘔吐次數(shù)（次）

對照組（n=6） 100 58.3±11.3 21.2±7.8 12.1±2.3

昂丹司瓊組（n=6） 33.3 124.1±11.4* 5.6±4.9* 3.6±2.1*endprint

姜辣素組（n=6） 50.0 97.3±9.1* 7.9±3.6* 6.0±2.1*

組合物組（n=6） 33.3 107.4±23.3* 5.8±2.5* 3.8±2.5*

*與對照組比較，P<0.01

表2 姜茯組合物對硫酸銅致嘔作用的影響

組別 致吐率（%） 潛伏期

（min） 干嘔次數(shù)（次） 嘔吐次數(shù)（次）

對照組（n=6） 100 10.3±10.2 35.2±7.9 35.7±3.5

昂丹司瓊組（n=6） 33.3 35.0±7.9* 11.2±6.1* 13.0±6.2*

姜辣素組（n=6） 50.0 27.9±8.9* 15.8±3.3* 16.2±6.8*

組合物組（n=6） 33.3 54.1±13.4* 12.9±5.5* 13.8±8.8*

*與對照組比較，P<0.01

2.3 姜茯組合物對S180小鼠的腫瘤抑制作用 與對照組比較，其他組均有不同程度抑制，且高劑量組對腫瘤的抑制率較高（P<0.01），見表3。

2.4 姜茯組合物對H22小鼠的腫瘤抑制作用 與對照組比較，其他組均有不同程度抑制，高劑量組對腫瘤的抑制率較高（P<0.01），見表4。

2.5 姜茯組合物對EAC小鼠的腫瘤抑制作用 與對照組比較，其他組均有不同程度抑制，高劑量組對腫瘤的抑制率較高（P<0.01），見表5。

2.6 姜茯組合物急性毒性試驗 小鼠灌胃給藥后行為正常，生長良好，體重增加，未見明顯反應及死亡。將小鼠處死后肉眼觀察各主要臟器未見異常。結(jié)果表明姜茯組合物最大劑量口服對動物無明顯損害，未發(fā)現(xiàn)對機體產(chǎn)生毒性反應，安全可靠。

3 討論

目前全球著名制藥業(yè)已廣泛應用雪貂模型進行催吐劑和止吐劑的研究[6]。本研究采用的國內(nèi)同科動物水貂（mink）具有與人類相似的嘔吐行為，免疫組化結(jié)果與雪貂的測定結(jié)果一致，對順鉑等致吐劑的反應良好，且價格便宜[7-9]。

近年來對茯苓的化學成分進行了廣泛研究，發(fā)現(xiàn)其主要成分為茯苓多糖和三萜類化合物，其具有滲濕利尿、和胃健脾、寧心安神的功效[10]。臨床應用茯苓治療鼻咽癌、胃癌、肝癌時取得良好效果。目前普遍認為其抗腫瘤機理復雜多樣，抗腫瘤作用的靶點和途徑廣泛，并且不同的抗腫瘤作用機制之間相互影響。主要是通過提高巨噬細胞的吞噬功能，促進免疫球蛋白形成等免疫增強作用，激活免疫監(jiān)視系統(tǒng)來實現(xiàn)的。除此之外，茯苓還能直接抑制腫瘤細胞的生長。研究發(fā)現(xiàn)茯苓多糖有很好的抗白血病作用，與化療藥物環(huán)磷酰胺（CTX）合用后可產(chǎn)生協(xié)同抗癌作用[11]。仲兆金等[12]發(fā)現(xiàn)三萜類成分可明顯抑制K562細胞（人慢性髓樣白血病細胞），影響小鼠T淋巴細胞增殖。Kwonm等[13]發(fā)現(xiàn)茯苓三萜對肺癌、卵巢癌、皮膚癌、中樞神經(jīng)癌和直腸癌等具有明顯抑制活性。許津等[14]研究發(fā)現(xiàn)，茯苓三萜顯著抑制肉瘤S180、艾氏腹水癌和白血病L1210細胞，對小鼠Lewis肺癌的轉(zhuǎn)移有一定的抑制作用。于濱等[15]觀察茯苓多糖與多種抗癌藥物合用對小鼠移植性腫瘤的作用，發(fā)現(xiàn)茯苓多糖顯著增強了環(huán)磷酰胺、5-FU、M25、絲裂霉素、平陽霉素、更生霉素對小鼠S180的抑制作用及平陽霉素對食管癌SGA-73的抑制作用，提高了環(huán)磷酰胺對白血病小鼠L615、L1210和長春新堿對L615的生命延長率，表明其與抗癌藥合用有增效作用。徐榕等[16]發(fā)現(xiàn)茯苓三萜類化合物與抗癌藥物合用，能促進小鼠巨噬細胞產(chǎn)生集落刺激因子，明顯促進粒細胞增殖，引起造血細胞再生，提高由γ線照射小鼠所致的白細胞減少癥的外周血白細胞水平和血小板的數(shù)量，表明茯苓可提高放、化療的療效。

生姜中止吐活性主要成分姜辣素可作用于5-HT3和NK1等受體，抑制腸道嗜鉻細胞釋放致吐因子5-HT和P物質(zhì)，可對抗硫酸銅和順鉑等所致嘔吐[17-18]。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)生姜與厚樸組合物有明顯的抗癌止嘔作用，為進一步研究天然、低毒、多靶點的抗嘔中藥提供了實驗基礎。

參考文獻

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（收稿日期：2014-06-26） （本文編輯：蔡元元）endprint

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