黃華斌 莊峙廈 楊朝勇 王小如
1引言
核酸提取的傳統(tǒng)方法,如酚氯仿抽提法,存在溶劑毒性大、重復(fù)性操作多、難以實現(xiàn)微型化、自動化操作等缺點。近年發(fā)展起來的固相萃取法不僅可以避免使用毒性強的有機溶劑, 而且能大幅度提高提取效率。磁性微粒作為一種新型核酸固相萃取劑,借助于適當(dāng)?shù)拇欧蛛x裝置\[1,2\],可以進一步簡化和加速核酸的分離與純化過程。利用外層表面改性的途徑,可賦予磁性微球表面多種反應(yīng)性官能團(如羥基、羧基、氨基、醛基等) \[3\],通過吸附或共價鍵合的方式可以與酶、細(xì)胞、藥物等生物活性物質(zhì)\[4,5\]結(jié)合;在DNA分離過程中,羥基、羧基與醛基一般以共價鍵的方式與DNA結(jié)合,結(jié)合時往往需使用鹽酸胍等試劑\[6\],由于強結(jié)合力,脫附時間比較長。與其它官能團相比,氨基與DNA結(jié)合后較易脫附。
1引言
核酸提取的傳統(tǒng)方法,如酚氯仿抽提法,存在溶劑毒性大、重復(fù)性操作多、難以實現(xiàn)微型化、自動化操作等缺點。近年發(fā)展起來的固相萃取法不僅可以避免使用毒性強的有機溶劑, 而且能大幅度提高提取效率。磁性微粒作為一種新型核酸固相萃取劑,借助于適當(dāng)?shù)拇欧蛛x裝置\[1,2\],可以進一步簡化和加速核酸的分離與純化過程。利用外層表面改性的途徑,可賦予磁性微球表面多種反應(yīng)性官能團(如羥基、羧基、氨基、醛基等) \[3\],通過吸附或共價鍵合的方式可以與酶、細(xì)胞、藥物等生物活性物質(zhì)\[4,5\]結(jié)合;在DNA分離過程中,羥基、羧基與醛基一般以共價鍵的方式與DNA結(jié)合,結(jié)合時往往需使用鹽酸胍等試劑\[6\],由于強結(jié)合力,脫附時間比較長。與其它官能團相比,氨基與DNA結(jié)合后較易脫附。
1引言
核酸提取的傳統(tǒng)方法,如酚氯仿抽提法,存在溶劑毒性大、重復(fù)性操作多、難以實現(xiàn)微型化、自動化操作等缺點。近年發(fā)展起來的固相萃取法不僅可以避免使用毒性強的有機溶劑, 而且能大幅度提高提取效率。磁性微粒作為一種新型核酸固相萃取劑,借助于適當(dāng)?shù)拇欧蛛x裝置\[1,2\],可以進一步簡化和加速核酸的分離與純化過程。利用外層表面改性的途徑,可賦予磁性微球表面多種反應(yīng)性官能團(如羥基、羧基、氨基、醛基等) \[3\],通過吸附或共價鍵合的方式可以與酶、細(xì)胞、藥物等生物活性物質(zhì)\[4,5\]結(jié)合;在DNA分離過程中,羥基、羧基與醛基一般以共價鍵的方式與DNA結(jié)合,結(jié)合時往往需使用鹽酸胍等試劑\[6\],由于強結(jié)合力,脫附時間比較長。與其它官能團相比,氨基與DNA結(jié)合后較易脫附。