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      不同天麻品種中天麻素含量的比較分析

      2014-11-20 10:03吳佳新段院生李偉
      湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年18期
      關(guān)鍵詞:高效液相色譜法天麻

      吳佳新+段院生+李偉

      摘要:為分析不同天麻(Gastrodia elata Bl.)品種中的天麻素含量,采用高效液相色譜法,以Hypersil ODS-2色譜柱為固定相,乙腈-0.05%(V/V)磷酸溶液(3∶97)為流動(dòng)相,比較了烏天麻(產(chǎn)地云南)、紅天麻、烏紅雜交天麻(產(chǎn)地湖北麻城)中天麻素含量。結(jié)果表明,烏天麻中的天麻素含量為0.423%,烏紅天麻為0.321%,紅天麻為0.225%。大別山低海拔地區(qū)種植的烏紅雜交天麻中天麻素含量高于紅天麻。

      關(guān)鍵詞:天麻(Gastrodia elata Bl.);天麻素;高效液相色譜法

      中圖分類號(hào):R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)18-4416-02

      天麻(Gastrodia elata Bl.)屬蘭科多年生草本共生植物,以地下塊莖入藥,是傳統(tǒng)名貴中藥材,具有息風(fēng)止痙、平抑肝陽、祛風(fēng)通絡(luò)等功效[1]。天麻素,又名對(duì)羥甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖甙(ρ-hydroxymethylphenyl-β-D-glucopyranoside)為天麻特征組分。王紹柏等[2,3]用宜昌紅天麻S2自交系與云南烏天麻S4自交系進(jìn)行正反交培育出“烏紅”、“紅烏”天麻品種,通過湖北省品種評(píng)審委員會(huì)審(認(rèn))定為“2個(gè)優(yōu)良雜交天麻新品種”,并命名為“鄂天麻1號(hào)”和“鄂天麻2號(hào)”。烏紅雜交天麻與紅天麻相比,形態(tài)好、天麻素含量比父本宜昌紅天麻增加17%[4]。

      湖北麻城市、羅田縣、英山縣和蘄春縣等天麻產(chǎn)區(qū)主要種植紅天麻。自2012年開始,在麻城市低海拔地區(qū)(約230 m)進(jìn)行烏紅雜交天麻種植試驗(yàn),并與本地區(qū)種植的紅天麻進(jìn)行了品質(zhì)對(duì)比。按照2010版藥典標(biāo)準(zhǔn)中的HPLC法,分析了烏天麻、紅天麻、烏紅雜交天麻中的天麻素含量[5],以期為該地區(qū)推廣烏紅雜交天麻提供參考。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      紅天麻和烏紅雜交天麻藥材均由湖北麻城市情添天麻種植專業(yè)合作社提供,烏天麻引自云南小草壩。

      天麻素(批號(hào)110807-201306),由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供。乙腈為色譜純,磷酸為分析純,去離子水。

      1.2 儀器

      戴安U3000高效液相色譜儀,配VWD-3100紫外檢測(cè)器,WPS-3000SL自動(dòng)進(jìn)樣器,KQ-100DB型數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

      1.3 方法

      1.3.1 預(yù)處理 洗凈樣品,置蒸籠中蒸制30 min,放55 ℃干燥箱中烘至半干(含水量30%),粉碎待用。1.3.2 樣品的制備 稱取粉末樣品約2.000 0 g于具塞錐形瓶中,加入乙醇50 mL稱重,加熱回流3 h,放冷,稱重并補(bǔ)足重量,搖勻,過濾,取濾液10 mL濃縮至近干。殘?jiān)右译?水(3∶97,V/V)混合溶液溶解,定容至25 mL容量瓶中,過濾后待測(cè)[5]。

      1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)品的制備 稱取適量天麻素標(biāo)準(zhǔn)品,以流動(dòng)相配制50 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

      1.3.4 色譜條件 固定相為依利特Hypersil ODS-2柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97,V/V),流速為1 mL/min,柱溫35℃;進(jìn)樣體積5 μL,檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

      吸取1~20 μL標(biāo)準(zhǔn)工作液,按上述色譜條件測(cè)定峰面積[6-8],結(jié)果見表1。以峰面積為x,進(jìn)樣量為y,進(jìn)行線性回歸分析,得方程為y=31.273 71 x - 0.029 86,R2=0.999 98,在0.046 1~0.922 0 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

      2.2 樣品分析結(jié)果

      稱取天麻樣品處理并進(jìn)行色譜分析,各品種的天麻樣品色譜圖如圖1至圖3所示,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品天麻素含量[9,10],烏天麻、紅天麻和烏紅雜交天麻中的天麻素含量見表2。由表2可知,烏天麻中的天麻素平均含量為0.423%,烏紅雜交天麻為0.321%,紅天麻為0.225%。

      3 小結(jié)

      3種天麻中的天麻素含量均高于2010版藥典的標(biāo)準(zhǔn)(不小于0.2%),其中在大別山低海拔地區(qū)(約230 m)種植的烏紅雜交天麻,其天麻素含量高于紅天麻,品質(zhì)優(yōu)于紅天麻,可為當(dāng)?shù)赝茝V烏紅雜交天麻提供參考。

      參考文獻(xiàn):

      [1] 雷載權(quán).中藥學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1995.

      [2] 王紹柏,余昌俊,許啟新,等.天麻生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(I)[J].中藥材,2003,26(3):159-161.

      [3] 王紹柏,余昌俊,許啟新,等.天麻生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(II)[J].中藥材,2003,26(4):238-242.

      [4] 余昌俊,王紹柏,劉雪梅.天麻6個(gè)品種重要性狀比較分析[J]. 生物學(xué)通報(bào),2010,45(3):13-15.

      [5] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.

      [6] 李德勛,陳 桂,李輔碧,等.天麻不同變異類型藥材中天麻素含量比較[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐[J],2007,22(3):23-24.

      [7] 忻日易,陳龍勝,陳 濤,等.RP-HPLC測(cè)定大別山區(qū)不同產(chǎn)地天麻藥材中天麻素含量研究[J].光譜實(shí)驗(yàn)室,2005,22(6): 1187-1188.

      [8] 王新勝,吳艷芳,王有為,等.紅天麻中天麻素含量的動(dòng)態(tài)變化[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,34(22):5960-5961.

      [9] 劉小琴,汪鋆植,袁 琴,等.天麻不同品種及不同組織中天麻素的含量比較[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20(4):908-909.

      [10] 徐自升,丁安偉,潘 揚(yáng),等.HPLC測(cè)定天舒滴丸中天麻素的含量[J].中成藥,2004,26(3):252-253.endprint

      摘要:為分析不同天麻(Gastrodia elata Bl.)品種中的天麻素含量,采用高效液相色譜法,以Hypersil ODS-2色譜柱為固定相,乙腈-0.05%(V/V)磷酸溶液(3∶97)為流動(dòng)相,比較了烏天麻(產(chǎn)地云南)、紅天麻、烏紅雜交天麻(產(chǎn)地湖北麻城)中天麻素含量。結(jié)果表明,烏天麻中的天麻素含量為0.423%,烏紅天麻為0.321%,紅天麻為0.225%。大別山低海拔地區(qū)種植的烏紅雜交天麻中天麻素含量高于紅天麻。

      關(guān)鍵詞:天麻(Gastrodia elata Bl.);天麻素;高效液相色譜法

      中圖分類號(hào):R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)18-4416-02

      天麻(Gastrodia elata Bl.)屬蘭科多年生草本共生植物,以地下塊莖入藥,是傳統(tǒng)名貴中藥材,具有息風(fēng)止痙、平抑肝陽、祛風(fēng)通絡(luò)等功效[1]。天麻素,又名對(duì)羥甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖甙(ρ-hydroxymethylphenyl-β-D-glucopyranoside)為天麻特征組分。王紹柏等[2,3]用宜昌紅天麻S2自交系與云南烏天麻S4自交系進(jìn)行正反交培育出“烏紅”、“紅烏”天麻品種,通過湖北省品種評(píng)審委員會(huì)審(認(rèn))定為“2個(gè)優(yōu)良雜交天麻新品種”,并命名為“鄂天麻1號(hào)”和“鄂天麻2號(hào)”。烏紅雜交天麻與紅天麻相比,形態(tài)好、天麻素含量比父本宜昌紅天麻增加17%[4]。

      湖北麻城市、羅田縣、英山縣和蘄春縣等天麻產(chǎn)區(qū)主要種植紅天麻。自2012年開始,在麻城市低海拔地區(qū)(約230 m)進(jìn)行烏紅雜交天麻種植試驗(yàn),并與本地區(qū)種植的紅天麻進(jìn)行了品質(zhì)對(duì)比。按照2010版藥典標(biāo)準(zhǔn)中的HPLC法,分析了烏天麻、紅天麻、烏紅雜交天麻中的天麻素含量[5],以期為該地區(qū)推廣烏紅雜交天麻提供參考。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      紅天麻和烏紅雜交天麻藥材均由湖北麻城市情添天麻種植專業(yè)合作社提供,烏天麻引自云南小草壩。

      天麻素(批號(hào)110807-201306),由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供。乙腈為色譜純,磷酸為分析純,去離子水。

      1.2 儀器

      戴安U3000高效液相色譜儀,配VWD-3100紫外檢測(cè)器,WPS-3000SL自動(dòng)進(jìn)樣器,KQ-100DB型數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

      1.3 方法

      1.3.1 預(yù)處理 洗凈樣品,置蒸籠中蒸制30 min,放55 ℃干燥箱中烘至半干(含水量30%),粉碎待用。1.3.2 樣品的制備 稱取粉末樣品約2.000 0 g于具塞錐形瓶中,加入乙醇50 mL稱重,加熱回流3 h,放冷,稱重并補(bǔ)足重量,搖勻,過濾,取濾液10 mL濃縮至近干。殘?jiān)右译?水(3∶97,V/V)混合溶液溶解,定容至25 mL容量瓶中,過濾后待測(cè)[5]。

      1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)品的制備 稱取適量天麻素標(biāo)準(zhǔn)品,以流動(dòng)相配制50 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

      1.3.4 色譜條件 固定相為依利特Hypersil ODS-2柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97,V/V),流速為1 mL/min,柱溫35℃;進(jìn)樣體積5 μL,檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

      吸取1~20 μL標(biāo)準(zhǔn)工作液,按上述色譜條件測(cè)定峰面積[6-8],結(jié)果見表1。以峰面積為x,進(jìn)樣量為y,進(jìn)行線性回歸分析,得方程為y=31.273 71 x - 0.029 86,R2=0.999 98,在0.046 1~0.922 0 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

      2.2 樣品分析結(jié)果

      稱取天麻樣品處理并進(jìn)行色譜分析,各品種的天麻樣品色譜圖如圖1至圖3所示,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品天麻素含量[9,10],烏天麻、紅天麻和烏紅雜交天麻中的天麻素含量見表2。由表2可知,烏天麻中的天麻素平均含量為0.423%,烏紅雜交天麻為0.321%,紅天麻為0.225%。

      3 小結(jié)

      3種天麻中的天麻素含量均高于2010版藥典的標(biāo)準(zhǔn)(不小于0.2%),其中在大別山低海拔地區(qū)(約230 m)種植的烏紅雜交天麻,其天麻素含量高于紅天麻,品質(zhì)優(yōu)于紅天麻,可為當(dāng)?shù)赝茝V烏紅雜交天麻提供參考。

      參考文獻(xiàn):

      [1] 雷載權(quán).中藥學(xué)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1995.

      [2] 王紹柏,余昌俊,許啟新,等.天麻生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(I)[J].中藥材,2003,26(3):159-161.

      [3] 王紹柏,余昌俊,許啟新,等.天麻生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(II)[J].中藥材,2003,26(4):238-242.

      [4] 余昌俊,王紹柏,劉雪梅.天麻6個(gè)品種重要性狀比較分析[J]. 生物學(xué)通報(bào),2010,45(3):13-15.

      [5] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.

      [6] 李德勛,陳 桂,李輔碧,等.天麻不同變異類型藥材中天麻素含量比較[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐[J],2007,22(3):23-24.

      [7] 忻日易,陳龍勝,陳 濤,等.RP-HPLC測(cè)定大別山區(qū)不同產(chǎn)地天麻藥材中天麻素含量研究[J].光譜實(shí)驗(yàn)室,2005,22(6): 1187-1188.

      [8] 王新勝,吳艷芳,王有為,等.紅天麻中天麻素含量的動(dòng)態(tài)變化[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,34(22):5960-5961.

      [9] 劉小琴,汪鋆植,袁 琴,等.天麻不同品種及不同組織中天麻素的含量比較[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20(4):908-909.

      [10] 徐自升,丁安偉,潘 揚(yáng),等.HPLC測(cè)定天舒滴丸中天麻素的含量[J].中成藥,2004,26(3):252-253.endprint

      摘要:為分析不同天麻(Gastrodia elata Bl.)品種中的天麻素含量,采用高效液相色譜法,以Hypersil ODS-2色譜柱為固定相,乙腈-0.05%(V/V)磷酸溶液(3∶97)為流動(dòng)相,比較了烏天麻(產(chǎn)地云南)、紅天麻、烏紅雜交天麻(產(chǎn)地湖北麻城)中天麻素含量。結(jié)果表明,烏天麻中的天麻素含量為0.423%,烏紅天麻為0.321%,紅天麻為0.225%。大別山低海拔地區(qū)種植的烏紅雜交天麻中天麻素含量高于紅天麻。

      關(guān)鍵詞:天麻(Gastrodia elata Bl.);天麻素;高效液相色譜法

      中圖分類號(hào):R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)18-4416-02

      天麻(Gastrodia elata Bl.)屬蘭科多年生草本共生植物,以地下塊莖入藥,是傳統(tǒng)名貴中藥材,具有息風(fēng)止痙、平抑肝陽、祛風(fēng)通絡(luò)等功效[1]。天麻素,又名對(duì)羥甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖甙(ρ-hydroxymethylphenyl-β-D-glucopyranoside)為天麻特征組分。王紹柏等[2,3]用宜昌紅天麻S2自交系與云南烏天麻S4自交系進(jìn)行正反交培育出“烏紅”、“紅烏”天麻品種,通過湖北省品種評(píng)審委員會(huì)審(認(rèn))定為“2個(gè)優(yōu)良雜交天麻新品種”,并命名為“鄂天麻1號(hào)”和“鄂天麻2號(hào)”。烏紅雜交天麻與紅天麻相比,形態(tài)好、天麻素含量比父本宜昌紅天麻增加17%[4]。

      湖北麻城市、羅田縣、英山縣和蘄春縣等天麻產(chǎn)區(qū)主要種植紅天麻。自2012年開始,在麻城市低海拔地區(qū)(約230 m)進(jìn)行烏紅雜交天麻種植試驗(yàn),并與本地區(qū)種植的紅天麻進(jìn)行了品質(zhì)對(duì)比。按照2010版藥典標(biāo)準(zhǔn)中的HPLC法,分析了烏天麻、紅天麻、烏紅雜交天麻中的天麻素含量[5],以期為該地區(qū)推廣烏紅雜交天麻提供參考。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      紅天麻和烏紅雜交天麻藥材均由湖北麻城市情添天麻種植專業(yè)合作社提供,烏天麻引自云南小草壩。

      天麻素(批號(hào)110807-201306),由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供。乙腈為色譜純,磷酸為分析純,去離子水。

      1.2 儀器

      戴安U3000高效液相色譜儀,配VWD-3100紫外檢測(cè)器,WPS-3000SL自動(dòng)進(jìn)樣器,KQ-100DB型數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

      1.3 方法

      1.3.1 預(yù)處理 洗凈樣品,置蒸籠中蒸制30 min,放55 ℃干燥箱中烘至半干(含水量30%),粉碎待用。1.3.2 樣品的制備 稱取粉末樣品約2.000 0 g于具塞錐形瓶中,加入乙醇50 mL稱重,加熱回流3 h,放冷,稱重并補(bǔ)足重量,搖勻,過濾,取濾液10 mL濃縮至近干。殘?jiān)右译?水(3∶97,V/V)混合溶液溶解,定容至25 mL容量瓶中,過濾后待測(cè)[5]。

      1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)品的制備 稱取適量天麻素標(biāo)準(zhǔn)品,以流動(dòng)相配制50 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

      1.3.4 色譜條件 固定相為依利特Hypersil ODS-2柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97,V/V),流速為1 mL/min,柱溫35℃;進(jìn)樣體積5 μL,檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

      吸取1~20 μL標(biāo)準(zhǔn)工作液,按上述色譜條件測(cè)定峰面積[6-8],結(jié)果見表1。以峰面積為x,進(jìn)樣量為y,進(jìn)行線性回歸分析,得方程為y=31.273 71 x - 0.029 86,R2=0.999 98,在0.046 1~0.922 0 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

      2.2 樣品分析結(jié)果

      稱取天麻樣品處理并進(jìn)行色譜分析,各品種的天麻樣品色譜圖如圖1至圖3所示,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品天麻素含量[9,10],烏天麻、紅天麻和烏紅雜交天麻中的天麻素含量見表2。由表2可知,烏天麻中的天麻素平均含量為0.423%,烏紅雜交天麻為0.321%,紅天麻為0.225%。

      3 小結(jié)

      3種天麻中的天麻素含量均高于2010版藥典的標(biāo)準(zhǔn)(不小于0.2%),其中在大別山低海拔地區(qū)(約230 m)種植的烏紅雜交天麻,其天麻素含量高于紅天麻,品質(zhì)優(yōu)于紅天麻,可為當(dāng)?shù)赝茝V烏紅雜交天麻提供參考。

      參考文獻(xiàn):

      [1] 雷載權(quán).中藥學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1995.

      [2] 王紹柏,余昌俊,許啟新,等.天麻生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(I)[J].中藥材,2003,26(3):159-161.

      [3] 王紹柏,余昌俊,許啟新,等.天麻生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(II)[J].中藥材,2003,26(4):238-242.

      [4] 余昌俊,王紹柏,劉雪梅.天麻6個(gè)品種重要性狀比較分析[J]. 生物學(xué)通報(bào),2010,45(3):13-15.

      [5] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.

      [6] 李德勛,陳 桂,李輔碧,等.天麻不同變異類型藥材中天麻素含量比較[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐[J],2007,22(3):23-24.

      [7] 忻日易,陳龍勝,陳 濤,等.RP-HPLC測(cè)定大別山區(qū)不同產(chǎn)地天麻藥材中天麻素含量研究[J].光譜實(shí)驗(yàn)室,2005,22(6): 1187-1188.

      [8] 王新勝,吳艷芳,王有為,等.紅天麻中天麻素含量的動(dòng)態(tài)變化[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,34(22):5960-5961.

      [9] 劉小琴,汪鋆植,袁 琴,等.天麻不同品種及不同組織中天麻素的含量比較[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20(4):908-909.

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