黃 聰，王福蓮*，張桂芬，李傳仁，李詠軍

(1.長江大學(xué)農(nóng)學(xué)院，湖北荊州 434025;2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，植物病蟲害生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193)

柑桔大實(shí)蠅Bactrocera minax (Enderlein)俗稱柑蛆，屬于雙翅目Diptera，實(shí)蠅科Tephritidae，離腹寡毛實(shí)蠅屬Bactrocera Macquart (汪興鑒和羅祿怡，1995)，是柑桔生產(chǎn)上最具毀滅性的一種害蟲。在國外主要分布于印度和不丹，為歐洲和地中海植物保護(hù)組織(European and Mediterranean Plant Protection Organization，EPPO)的A1 類檢疫性有害生物之一(http://www.eppo.org/)。在我國主要分布于陜西、四川、重慶、貴州、云南、江蘇、江西、湖北、湖南、廣西、臺(tái)灣等省/直轄市(吳志清，1958;汪興鑒和羅祿怡，1995;黃聰?shù)龋?013)，是我國禁止進(jìn)境的二類有害生物(中華人民共和國農(nóng)業(yè)部，2006)。柑桔大實(shí)蠅以幼蟲在桔果內(nèi)取食為害，被害果實(shí)腐爛，完全失去食用價(jià)值，嚴(yán)重影響了我國柑桔產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展(尹素芬等，2011)。目前防治柑桔大實(shí)蠅最為農(nóng)民所接受的方法為化學(xué)防治法，尤其是成蟲的毒餌誘殺。常用的柑桔大實(shí)蠅成蟲引誘劑有獵蠅、蛋白誘餌(Erabaitpellets)、果瑞特、桔豐、糖酒醋液等(冉峰等，2011)，其中桔豐和果瑞特作為食物誘劑應(yīng)用范圍較為廣泛。然而，由于這兩種引誘劑的有效成分不同，因此對(duì)柑桔大實(shí)蠅的誘集效果各異，而且對(duì)雌性和雄性成蟲的誘集能力也存在區(qū)別(劉雄，2011)。

早在上世紀(jì)90年代，我國便開展了有關(guān)柑桔大實(shí)蠅輻照不育技術(shù)機(jī)理及其應(yīng)用技術(shù)的初步研究(李元英等，1992;劉瓊?cè)愕龋?992)。如，王華篙等(1993)在33.3 ha的桔園內(nèi)，隔年釋放6-9 萬頭不育雄蠅，取得了顯著的防治效果，使柑桔果實(shí)被害率由7.5% 下降到0.005%。此外，有研究顯示，引起某些昆蟲不育或亞不育的輻照劑量，可能會(huì)導(dǎo)致成蟲羽化率降低、壽命縮短、畸形率增加等(張金棟和趙文彬，1986;楊榮新等，1990;夏大榮等，1999;Luxs et al.，2002;James et al.，2003;Ayvaz et al.，2006;李詠軍等，2006，2008);但亦有研究表明，柑桔大實(shí)蠅蛹經(jīng)不育劑量的60Co-γ 射線輻照后，雌蟲羽化后在特定日齡的爬行和趨上運(yùn)動(dòng)的能力明顯提高(黃聰?shù)龋?013)。然而，輻照是否影響柑桔大實(shí)蠅成蟲對(duì)引誘劑的趨向能力，誘集誘殺技術(shù)是否可以與輻照不育技術(shù)協(xié)調(diào)應(yīng)用，尚不得而知。

本研究圍繞輻照后昆蟲的行為會(huì)有所改變，并進(jìn)而可能導(dǎo)致引誘劑敏感性發(fā)生變化的問題，以柑桔大實(shí)蠅為靶標(biāo)，以田間常用的引誘劑桔豐和果瑞特為對(duì)象，研究柑桔大實(shí)蠅田間自然發(fā)生的成蟲和輻照成蟲對(duì)引誘劑的敏感性差異。研究結(jié)果對(duì)輻射不育技術(shù)的有效利用，以及柑桔大實(shí)蠅的可持續(xù)控制具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 蟲源

10月下旬于湖北省宜都市枝城鎮(zhèn)收集落果，手剝蛆果獲得老熟幼蟲，化蛹后于含水量為15%的細(xì)沙中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 引誘劑與誘捕器

以桔豐和果瑞特作為柑桔大實(shí)蠅引誘劑，其中，桔豐為湖北省宜昌桔豐實(shí)蠅誘劑銷售公司的專利產(chǎn)品“大實(shí)蠅食物誘劑”(改進(jìn)型糖醋液)(專利號(hào):200710053497)，使用方法為500 mL 桔豐兌水3-4 kg，加一袋滅多威(24%萬靈水溶性液劑，廣東省江門農(nóng)藥廠生產(chǎn));果瑞特由湖北谷瑞特生物技術(shù)有限公司出產(chǎn)，180 mL/袋，使用時(shí)1 份果瑞特兌水3 份。

誘捕器由誘集杯、防雨罩和20 號(hào)鉛絲組裝而成，其中誘集杯為一次性塑料杯(口徑12 cm，高15 cm)，防雨罩為一次性塑料碗(口徑15 cm，高12 cm)，二者由鉛絲相連并固定成型;使用時(shí)，每個(gè)誘集杯中加入2/3 引誘劑。

1.3 柑桔大實(shí)蠅的輻照、釋放與回收

翌年5月上中旬當(dāng)50%的柑桔大實(shí)蠅蛹發(fā)育至4 級(jí)(復(fù)眼黑綠色)時(shí)(張維等，1991;趙毓潮等，2002)，以60Co-γ 射線(劑量率2 Gy/min，總劑量90 Gy)進(jìn)行輻照，輻照總蟲量約為12 萬頭，由北京師范大學(xué)化學(xué)學(xué)院鈷源研究室協(xié)助完成。

試驗(yàn)地點(diǎn)位于湖北省宜都市枝城鎮(zhèn)紙坊沖村，桔園總面積為4 ha，由4個(gè)小區(qū)組成，小區(qū)面積為0.93-1.07 ha，小區(qū)之間以田間小路和雜草帶(寬約2 m)隔開。以小區(qū)的中心點(diǎn)作為釋放點(diǎn)，每點(diǎn)釋放3 萬頭經(jīng)熒光粉(北京化工廠(北京華騰化工有限公司))標(biāo)記的柑桔大實(shí)蠅輻照蛹，并在每個(gè)小區(qū)均勻設(shè)置13-14個(gè)誘集回收點(diǎn)，然后，在每個(gè)誘集點(diǎn)的相鄰兩株柑桔樹上同時(shí)懸掛桔豐和果瑞特誘捕器各1個(gè)。于輻照蟲釋放后的第三天開始調(diào)查各誘捕器內(nèi)誘集到的成蟲數(shù)量，之后根據(jù)天氣情況每隔7-10 d 調(diào)查1 次，并同時(shí)更換誘捕器中的引誘劑。誘集到的成蟲以紫外分析儀檢測(cè)分析是否為輻照蟲，當(dāng)連續(xù)3 次誘集不到成蟲時(shí)，調(diào)查結(jié)束。

1.4 數(shù)據(jù)分析

各時(shí)間段誘集到的成蟲進(jìn)行熒光檢測(cè)后，區(qū)分為輻照蟲和自然蟲;然后，分雌雄記錄蟲口數(shù)量。以誘集時(shí)間為橫坐標(biāo)、各小區(qū)平均誘集蟲量為縱坐標(biāo)做動(dòng)態(tài)趨勢(shì)圖，分析敏感起始時(shí)間、結(jié)束時(shí)間和敏感歷期。以成對(duì)數(shù)據(jù)t 測(cè)驗(yàn)分析兩種引誘劑單日和整個(gè)誘集期誘集蟲量的差異 (SPSS 17.0，Inc.，Chicago，IL，USA)。

2 結(jié)果與分析

2.1 柑桔大實(shí)蠅輻照成蟲對(duì)桔豐和果瑞特的敏感性

誘集蟲量監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，輻照顯著降低了柑桔大實(shí)蠅成蟲對(duì)桔豐和果瑞特的敏感性(表1)。桔豐對(duì)田間自然發(fā)生的柑桔大實(shí)蠅的雌性成蟲、雄性成蟲以及整個(gè)種群的誘集數(shù)量分別為1.8 頭(P=0.002)、1.6 頭(P=0.003)和3.5 頭/誘捕器(P=0.001)，顯著高于誘集的輻照成蟲的數(shù)量。果瑞特對(duì)田間自然發(fā)生的柑桔大實(shí)蠅的雌性成蟲、雄性成蟲以及整個(gè)種群的誘集數(shù)量分別為0.6 頭(P=0.025)、0.4 頭(P=0.01)和1.0 頭/誘捕器(P=0.008)，亦顯著高于誘集的輻照成蟲的數(shù)量;而且，果瑞特對(duì)輻照雄蟲已不具有引誘作用(表1)。

2.2 柑桔大實(shí)蠅輻照成蟲對(duì)桔豐和果瑞特的敏感性動(dòng)態(tài)趨勢(shì)

誘集蟲量動(dòng)態(tài)趨勢(shì)監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，盡管未達(dá)到顯著差異水平，但輻照降低了柑桔大實(shí)蠅成蟲對(duì)常用引誘劑的趨向性。在柑桔大實(shí)蠅成蟲發(fā)生高峰期桔豐誘集到的輻照成蟲的數(shù)量僅為誘集總蟲量的2.6%-11.6%，果瑞特為5.0%-50.0%，而在柑桔大實(shí)蠅發(fā)生初期和末期未能誘集到輻照成蟲(桔豐:田間自然發(fā)生的成蟲vs.輻照成蟲，P=0.069;果瑞特:田間自然發(fā)生的成蟲vs.輻照成蟲，P=0.147;成對(duì)數(shù)據(jù)t 測(cè)驗(yàn))(圖1)。桔豐誘集到田間自然發(fā)生的柑桔大實(shí)蠅成蟲的起止日期為5月17 日-6月28 日，歷時(shí)42 d;而輻照成蟲對(duì)桔豐的敏感起始日期較田間自然發(fā)生的成蟲延遲了17 d，結(jié)束時(shí)間提前了7 d，敏感歷期只有19 d;但田間自然發(fā)生的成蟲和輻照成蟲對(duì)桔豐的敏感高峰期相同，均為6月上中旬;而且在誘集高峰期內(nèi)，誘集到的田間自然發(fā)生的成蟲數(shù)量始終高于輻照蟲量(6月3 日:P=0.004;6月11日:P=0.014;6月21 日:P=0.014)。果瑞特誘集到田間自然發(fā)生的柑桔大實(shí)蠅成蟲的起止日期為6月3-28 日，歷時(shí)25 d;而輻照成蟲對(duì)果瑞特的敏感起始時(shí)間比田間自然發(fā)生的成蟲延遲了8 d，結(jié)束時(shí)間一致，敏感歷期僅為18 d;而且，輻照成蟲對(duì)果瑞特的敏感高峰期較田間自然發(fā)生的成蟲延遲了10 d;6月11 日果瑞特誘集到的田間自然發(fā)生的成蟲的數(shù)量顯著高于輻照成蟲(P=0.007)(圖1)。此外，誘集結(jié)果還顯示，桔豐對(duì)田間自然發(fā)生的柑桔大實(shí)蠅成蟲和輻照成蟲的誘集效果優(yōu)于果瑞特(田間自然發(fā)生的成蟲:P=0.007;輻照成蟲:P＜0.001)(圖1)。

表1 柑桔大實(shí)蠅輻照成蟲對(duì)桔豐和果瑞特的敏感性(誘蟲數(shù)量/誘捕器)(Mean±SE)(5月中旬-7月下旬)Table 1 Sensitivity of irradiated Bactrocera minax adult to two kinds of lures，Jufeng and Great(Numbers of trapped adult/trap)(from mid-May to end-July)

2.3 柑桔大實(shí)蠅輻照雌雄性成蟲對(duì)桔豐和果瑞特的敏感性動(dòng)態(tài)趨勢(shì)

圖1 柑桔大實(shí)蠅輻照成蟲對(duì)桔豐和果瑞特的敏感性動(dòng)態(tài)趨勢(shì)Fig.1 Sensitivity dynamics of irradiated Bactrocera minax adults to Jufeng and Great

圖2 柑桔大實(shí)蠅輻照雌雄性成蟲對(duì)桔豐和果瑞特的敏感性動(dòng)態(tài)趨勢(shì)Fig.2 Sensitivity dynamics of irradiated Bactrocera minax adults to Jufeng and Great

同時(shí)，研究還發(fā)現(xiàn)，輻照具有降低柑桔大實(shí)蠅雌雄性成蟲引誘劑敏感性的趨勢(shì)。在柑桔大實(shí)蠅成蟲發(fā)生高峰期桔豐誘集到的輻照雌性成蟲的數(shù)量僅為誘集的所有雌性成蟲數(shù)量的4.4%-11.8%，果瑞特為33.7%-50.0%，而在柑桔大實(shí)蠅發(fā)生始盛期和末期未能誘集到輻照雌性成蟲(桔豐:田間自然發(fā)生的雌性成蟲vs.輻照雌性成蟲，P=0.065;果瑞特:田間自然發(fā)生的雌性成蟲vs.輻照雌性成蟲，P=0.097;成對(duì)數(shù)據(jù)t 測(cè)驗(yàn))(圖2A)。田間自然發(fā)生的雌性成蟲對(duì)桔豐的敏感起止日期為5月24 日-6月28 日，歷時(shí)35 d，高峰期為6月上中旬;而輻照雌性成蟲僅在6月上中旬對(duì)桔豐具有趨向性，歷時(shí)只有25 d;而且在誘集高峰期，誘集到的田間自然發(fā)生的雌性成蟲的數(shù)量始終高于輻照雌性成蟲(6月3 日:P=0.001;6月11 日:P=0.022;6月21 日:P=0.014)。田間自然發(fā)生的雌性成蟲對(duì)果瑞特的敏感期為25 d (6月3-28 日);輻照雌性成蟲對(duì)果瑞特的敏感起始日期較田間自然發(fā)生的雌性成蟲推遲了8 d，而結(jié)束日期與田間自然發(fā)生的雌性成蟲一致(圖2A)。

在柑桔大實(shí)蠅成蟲發(fā)生高峰期桔豐誘集到的輻照雄性成蟲的數(shù)量僅為誘集的所有雄性成蟲的5.3%-11.4%，而果瑞特始終未能誘集到輻照雄性成蟲(桔豐:田間自然發(fā)生的雄性成蟲vs.輻照雄性成蟲，P=0.077;成對(duì)數(shù)據(jù)t 測(cè)驗(yàn))(圖2B)。田間自然發(fā)生的雄性成蟲對(duì)桔豐的敏感時(shí)長為35 d(5月17 日-6月21 日)，敏感高峰期為6月中旬。輻照雄性成蟲對(duì)桔豐的敏感起始日期較自然發(fā)生的成蟲延遲了17 d，結(jié)束日期提前了10 d。而且在誘集高峰期，誘集到的田間自然發(fā)生的雄性成蟲的數(shù)量始終高于輻照雄性成蟲(6月3 日:P=0.01;6月11 日:P=0.011;6月21 日:P=0.025)。田間自然發(fā)生的雄性成蟲對(duì)果瑞特的敏感期為18 d (6月3-21 日)，敏感高峰為6月11日(圖2B)。

3 結(jié)論與討論

目前，防治柑桔大實(shí)蠅最常用的方法就是采用引誘劑結(jié)合殺蟲劑進(jìn)行成蟲的誘集誘殺。然而，柑桔大實(shí)蠅為一化性昆蟲，一年只發(fā)生一代，成蟲將卵產(chǎn)于柑桔果內(nèi)，卵孵化為幼蟲后在桔果內(nèi)取食并完成發(fā)育，以蛹在土壤中越冬，整個(gè)生活史中只有成蟲可以自由活動(dòng)，且成蟲在羽化之后、性成熟之前尚需飛離桔園補(bǔ)充營養(yǎng)，性成熟以后方返回桔園進(jìn)行交配產(chǎn)卵(余樂明，2007;郭鄂平等，2008);因此，成蟲較其他發(fā)育階段在桔園內(nèi)的活動(dòng)時(shí)間短，進(jìn)而使誘集誘殺防治效果不甚理想，加之柑桔大實(shí)蠅雌性成蟲的抱卵量多，達(dá)100多粒/頭(謝天寶等，2006)，即使較低的蟲口密度也會(huì)導(dǎo)致來年柑桔大實(shí)蠅的大暴發(fā)。昆蟲輻照不育技術(shù)，是一種通過射線(如γ 射線)輻射使害蟲喪失繁育能力并最終徹底消滅靶標(biāo)害蟲的方法(Takahisa，2011)。與其他害蟲防治方法相比，輻照不育技術(shù)具有專一性強(qiáng)、無公害、防治徹底等優(yōu)點(diǎn)(Parker and Mehta，2007;Helinski et al.，2008;鐘國華等，2012)。李元英(1985)指出，應(yīng)用昆蟲不育技術(shù)防治害蟲可以避免殺蟲劑對(duì)自然天敵、人畜以及環(huán)境的危害，并能避免抗藥性的產(chǎn)生;昆蟲不育技術(shù)尤其對(duì)鉆蛀和隱蔽為害的害蟲具有良好的控制效果，而輻照不育技術(shù)與其他防治方法的有機(jī)結(jié)合，有望使某種害蟲在某一區(qū)域趨于滅絕。

王華嵩等(1990，1995)于上世紀(jì)90年代進(jìn)行了輻射不育技術(shù)防治柑桔大實(shí)蠅的示范試驗(yàn)，并取得成功，但釋放的輻照成蟲的比例高達(dá)12.5 ∶1-45 ∶1 (1987-1989年)，釋放量為5000-8500 頭/ha (1993-1994年)，成本相對(duì)較高。為探明柑桔大實(shí)蠅輻照不育技術(shù)能否與誘集誘殺技術(shù)協(xié)調(diào)應(yīng)用，有效指導(dǎo)柑桔大實(shí)蠅的可持續(xù)控制，本研究以桔豐和果瑞特為引誘劑，監(jiān)測(cè)分析了柑桔大實(shí)蠅輻照成蟲和田間自然發(fā)生的成蟲對(duì)常用引誘劑的敏感性，結(jié)果顯示，輻照顯著降低了柑桔大實(shí)蠅成蟲對(duì)引誘劑桔豐和果瑞特的敏感性，無論是雌性和雄性成蟲，還是柑桔大實(shí)蠅的整個(gè)種群，輻照成蟲對(duì)兩種引誘劑的趨向性均顯著低于田間自然發(fā)生的成蟲(表1);同時(shí)，輻照還縮短了柑桔大實(shí)蠅成蟲對(duì)兩種引誘劑的敏感歷期(圖1)。進(jìn)而表明，輻照不育技術(shù)和誘集誘殺技術(shù)可以協(xié)調(diào)用于柑桔大實(shí)蠅的有效防控。此外，研究結(jié)果還顯示，輻照改變了柑桔大實(shí)蠅成蟲對(duì)兩種誘劑趨向的起止時(shí)間和高峰期(圖1)。表明，當(dāng)誘殺技術(shù)和輻照不育技術(shù)協(xié)同用于防治柑桔大實(shí)蠅時(shí)，可以通過合理選擇誘殺劑的種類和誘殺時(shí)期以最大程度地降低誘殺劑對(duì)輻照成蟲的傷害。如本文結(jié)果中，桔豐初次誘集到田間自然發(fā)生的柑桔大實(shí)蠅成蟲和輻照成蟲的日期分別為5月17日和6月3 日，二者相差17 d，但誘集高峰期相同，均為6月11 日;果瑞特初次誘集到田間自然發(fā)生的成蟲和輻照成蟲的日期分別為6月3 日和6月11 日，而對(duì)輻照成蟲的誘集高峰期延遲了10 d，分別為6月11 日和6月21 日(圖1)。據(jù)此建議，在柑桔大實(shí)蠅輻照不育技術(shù)應(yīng)用時(shí)，6月上旬之前以桔豐進(jìn)行誘集誘殺，6月中旬以果瑞特進(jìn)行誘集誘殺，均能顯著降低誘殺劑對(duì)輻照成蟲的傷害。此外，輻照雄性成蟲完全喪失了對(duì)果瑞特的趨向性(圖2B)，因此在釋放不育雄蟲時(shí)，可在6月初之前以桔豐進(jìn)行誘殺，或在整個(gè)成蟲發(fā)生期以果瑞特進(jìn)行誘集誘殺。

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