五味沙棘散抗電磁輻射能力的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)＊

張少麟，阿古拉，李富玉

五味沙棘散，由沙棘、甘草、木香、梔子等藥物組成，具有清熱祛痰，止咳定喘功效。用于肺熱久嗽，喘促痰多，胸中滿悶，胸脅作痛；慢性支氣管炎等病癥，是蒙古族呼吸系統(tǒng)常用藥。經(jīng)對(duì)方藥的前期研究結(jié)果表明有很好的輻射防護(hù)作用。為探究其療效機(jī)制，筆者進(jìn)行了五味沙棘散對(duì)提高受高功率微波輻射大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力及受高功率微波輻射大鼠的精子活動(dòng)度的實(shí)驗(yàn)研究。

1 材料與方法

1．1 藥品試劑 五味沙棘散由庫倫蒙藥廠提供，批號(hào)120935。

1．2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及儀器 二級(jí)雄性Wistar大鼠60只，體重（190±20）g，購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證明號(hào)：SCXK－（軍）2007－004，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備使用許可證號(hào)：SYXK－（軍）2007－004。S 波段 HPM 模擬源，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院八所提供。倒置顯微鏡CKX 41 Olympas公司。

1．3 實(shí)驗(yàn)方法

1．3．1 Morris水迷宮測(cè)試 將60只大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、輻射對(duì)照組、低劑量藥物組（0．75 g／kg·d）和高劑量藥物組（1．5 g／kg·d），15 只 ／組。輻射前 2 周上午灌胃給藥 1 次 ／d，至輻射前1 d，共連續(xù)給藥14 d。采用軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院S波段HPM模擬源進(jìn)行一次性全身均勻輻射。輻照條件：頻率為 2．856 GHz、峰值功率不密度為 200 W／cm2、脈沖頻率為 1000 pps、脈寬為 150 ns、平均功率密度為 30 mW／cm2、輻射時(shí)間為15 min。于照后檢測(cè)逃避潛伏期。

1．3．2 神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡檢測(cè) 輻射前2周上午灌胃給藥1次／d，至輻射前1 d，共連續(xù)給藥14 d。采用軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院S波段HPM模擬源進(jìn)行一次性全身均勻輻射。

1．3．3 精子活動(dòng)度檢測(cè) 輻射條件及動(dòng)物分組同上，采用軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院S波段HPM模擬源進(jìn)行一次性全身均勻輻射，檢測(cè)五味沙棘散提高受高功率微波輻射大鼠的精子活動(dòng)度。

2 結(jié) 果

2．1 五味沙棘散對(duì)Morris受高功率微波輻射大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力的影響 2個(gè)給藥組均可在照后2、4、14 d明顯縮短逃避潛伏期，證明五味沙棘散對(duì)HPM輻射引起的大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力下降有保護(hù)作用（表1）。

表1 4組大鼠Morris水迷宮潛伏期（±s，d）

表1 4組大鼠Morris水迷宮潛伏期（±s，d）

注：與輻射對(duì)照組比較，＊P＜0．05； △P＜0．01；＃P＜0．001

組別 n正常對(duì)照組 15輻射對(duì)照組 15低劑量組 15高劑量組 15照后2 d 照后4 d 照后14 d 15．5±5．6 12．5±2．7 8．7±3．7 19．8±7．3 14．7±4．2＊ 15．5±3．5△17．4±5．7 9．5±3．5＃ 8．7±2．7＃11．1±3．5＃ 10．3±2．5＃ 9．3±2．7＃

2．2 五味沙棘散對(duì)微波輻射后大鼠神經(jīng)元細(xì)胞的影響照后第14天大鼠腦海馬組織病理形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)各組海馬組織同一部位神經(jīng)元細(xì)胞，正常組神經(jīng)元細(xì)胞圓整清晰，輻射組多數(shù)細(xì)胞深染、界限模糊、核固縮、進(jìn)入凋亡期或已凋亡，給藥組凋亡細(xì)胞明顯減少，與正常對(duì)照組無顯著性差別（圖1）。

圖1 照后第14天大鼠腦海馬組織病理形態(tài)

2．3 五味沙棘散對(duì)受高功率微波輻射大鼠精子活動(dòng)度的影響 取照后第14天大鼠睪丸組織做精液常規(guī)分析檢測(cè)精子活動(dòng)度：HPM輻射后2周內(nèi)，大鼠的精子數(shù)量減少，精子畸形、死亡。給藥組可一定程度的提高精子活動(dòng)度，顯著降低精子死亡率，對(duì)輻射所致的生殖能力有明顯保護(hù)作用（表2）。

3 討 論

本次實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)五味沙棘散可以提高受高功率微波輻射大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力；抑制微波輻射后神經(jīng)元細(xì)胞凋亡；提高受高功率微波輻射大鼠的精子活動(dòng)度。這與國內(nèi)同領(lǐng)域相關(guān)研究的結(jié)果趨勢(shì)一致［1－5］。本次實(shí)驗(yàn)的價(jià)值在于，今后研究五味沙棘散在體內(nèi)外損傷模型上對(duì)DNA損傷修復(fù)、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞凋亡等的影響，揭示五味沙棘散具有輻射損傷細(xì)胞功能的保護(hù)作用；通過應(yīng)用基因芯片技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)、生物信息學(xué)等技術(shù)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)五味沙棘散輻射防護(hù)作用相關(guān)基因、相關(guān)蛋白及五味沙棘散潛在的作用靶分子，從分子水平揭示五味沙棘散具有輻射防護(hù)作用的作用機(jī)制，有望二次開發(fā)成具有抗電磁輻射作用的新藥物。

表2 4組大鼠的精子活動(dòng)度（±s）

表2 4組大鼠的精子活動(dòng)度（±s）

注：與其他組比較，＊P＜0．05

組別 向前運(yùn)動(dòng)精子比例（%） 極慢或不動(dòng)精子比例（%）正常對(duì)照組 69．7±16．1 7．1±8．4輻射對(duì)照組 48．3±12．1＊ 17．8±10．5＊低劑量組 63．1±11．5 9．5±7．6高劑量組 58．9±13．0 10．3±7．9

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