■ 胡彥茹 何余湧 陸 偉 程宗佳
(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,江西南昌 330045;2.中糧營(yíng)養(yǎng)健康研究院,北京 100020)
畜禽飼料消化吸收程度的高低與其糞污污染的嚴(yán)重程度直接相關(guān),飼料消化吸收好,則畜禽糞污對(duì)環(huán)境的污染程度就低。飼料調(diào)質(zhì)有助于減少飼料中的病原微生物含量、提高飼料淀粉糊化程度和促進(jìn)蛋白質(zhì)變性,從而改善畜禽腸道內(nèi)環(huán)境、促進(jìn)腸上皮細(xì)胞的發(fā)育和提高飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率,減少糞污對(duì)環(huán)境的污染,這對(duì)推動(dòng)生態(tài)畜牧業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展具有重要的科學(xué)意義和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前,不同調(diào)質(zhì)溫度對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和畜禽生產(chǎn)性能影響的研究已見報(bào)道,盧新流(1996)[1]報(bào)道了不同調(diào)質(zhì)溫度(65、69、76、81、85、90 ℃)對(duì)顆粒飼料粉化率的影響,結(jié)果表明:隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高,顆粒飼料粉化率呈下降趨勢(shì);Abdollahi等(2005,2010)[2-3]比較了玉米型、小麥型和高粱型日糧分別在60、75、90℃調(diào)質(zhì)后對(duì)蛋白質(zhì)表觀消化率和肉雞生產(chǎn)性能的影響,試驗(yàn)表明調(diào)質(zhì)溫度對(duì)肉雞日增重和采食量的影響與日糧類型有關(guān),但提高調(diào)質(zhì)溫度不利于改善肉雞的料肉比;Creswell等(2006)[4]將6種不同的基礎(chǔ)日糧分別經(jīng)65~105℃調(diào)質(zhì)后制粒,結(jié)果表明過高的調(diào)質(zhì)溫度將降低肉雞生產(chǎn)性能,主要表現(xiàn)在體重和料重比的降低;Cowieson等(2005)[5]研究了不同調(diào)質(zhì)溫度(80、85、90 ℃)條件下的小麥型飼料對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響,數(shù)據(jù)表明當(dāng)制粒溫度超過80℃時(shí),肉雞的生產(chǎn)性能就會(huì)下降。上述研究結(jié)果表明,過高和過低的調(diào)質(zhì)溫度對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和肉雞生產(chǎn)性能有不利的影響,生產(chǎn)顆粒飼料適宜的調(diào)質(zhì)溫度為80℃左右,這有助于降低顆粒飼料粉化率和提高家禽生產(chǎn)性能。已有文獻(xiàn)中未見有關(guān)于經(jīng)不同調(diào)質(zhì)溫度處理的玉米-豆粕型日糧對(duì)肉雞小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)與消化酶活性影響的報(bào)道。本文設(shè)置70、80、90℃三個(gè)調(diào)質(zhì)溫度,研究經(jīng)不同調(diào)質(zhì)溫度處理的玉米-豆粕型日糧對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、肉雞小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)與消化酶活性的影響。本文擬通過比較經(jīng)不同調(diào)質(zhì)溫度處理的玉米-豆粕型日糧對(duì)肉雞生產(chǎn)性能和小腸黏膜形態(tài)與消化酶活力間的差異顯著性,獲得適宜的調(diào)質(zhì)溫度,為肉雞飼料的生產(chǎn)加工提供技術(shù)支持,以生產(chǎn)出高品質(zhì)的肉雞飼料,從而提高肉雞對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收效果和肉雞生產(chǎn)性能,降低肉雞糞便對(duì)環(huán)境的污染。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及分組
選擇1日齡艾維茵肉雞558只,根據(jù)體重大小隨機(jī)分為I、II和III共3個(gè)處理組,每組設(shè)6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)31只,3個(gè)處理組間的小雞平均體重?zé)o顯著差異(P>0.05)。另外,設(shè)置70、80、90 ℃三個(gè)調(diào)質(zhì)溫度,按表1配方將試驗(yàn)料配成全價(jià)粉料,將全價(jià)粉料分別經(jīng)70、80、90 ℃調(diào)質(zhì)后制粒,其中1~28日齡肉雞顆粒料用模孔直徑為3.0 mm的環(huán)模制粒并破碎,29~49日齡肉雞顆粒料用??字睆綖?.8 mm的環(huán)模進(jìn)行制粒,隨機(jī)選取其中的一種飼料飼喂其中的一組小雞。
1.2 肉雞全價(jià)粉料日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(見表1)
表1 肉雞全價(jià)粉料配方及營(yíng)養(yǎng)水平
1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)
本試驗(yàn)在江西省飼料科學(xué)研究所肉雞試驗(yàn)場(chǎng)進(jìn)行。
1.4 飼養(yǎng)管理
試驗(yàn)分1~28日齡和29~49日齡兩期進(jìn)行、試驗(yàn)期間自由采食和飲水、所有肉雞均按常規(guī)飼養(yǎng)管理及免疫程序接種疫苗。
1.5 樣品采集
1.5.1 飼料樣品
記錄每天每個(gè)重復(fù)組肉雞的喂料量和剩料量并抽取飼料樣品、粉碎后于4℃冰箱溫保存。
1.5.2 糞便樣品
分別在試驗(yàn)的第4周和第7周收集各重復(fù)組雞只的新鮮糞便并稱重、剔除羽毛雜物、混勻后按總重的1/10~1/50取樣、然后每100 g鮮糞加入10%鹽酸10 ml、充分混勻、于65~75℃鼓風(fēng)烘干至恒重、回潮、粉碎后制成風(fēng)干樣品,連續(xù)收集4 d,用于測(cè)定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。
1.5.3 腸內(nèi)容物及腸組織樣品
在第50 d的早上8:00,從每組隨機(jī)選取12只雞,每重復(fù)2只,公母各半,斷頸屠宰雞只、打開腹腔、分離十二指腸、空腸、回腸和盲腸、收集十二指腸和空腸食糜和黏膜后充分混合,用于測(cè)定消化酶活性。擠出消化道內(nèi)容物后,剪取肉仔雞十二指腸中段,空腸前段(前1/4處)和回腸中段等部位的腸道組織2 cm左右、用生理鹽水沖洗凈內(nèi)容物,置于10%甲醛磷酸緩沖液中固定(37%~40%福爾馬林100 ml,NaH2P04·H2O 6.5 g,Na2HPO44.0 g,加水定容至1 000 ml)、用于腸黏膜形態(tài)指標(biāo)的測(cè)定。
1.6 測(cè)定指標(biāo)和方法
1.6.1 肉雞體重
分別于試驗(yàn)開始、第29 d和第50 d對(duì)供試肉雞進(jìn)行空腹稱重。
1.6.2 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率
飼料和糞便樣品的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、鈣和總磷的測(cè)定均按張麗英主編的第二版《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[6]中的方法進(jìn)行測(cè)定。
1.6.3 小腸消化酶活性
淀粉酶和胰蛋白酶活性測(cè)定按南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒方法進(jìn)行。
1.6.4 絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度
將固定的小腸標(biāo)本用自來水沖洗12 h、經(jīng)梯度酒精(75%、85%、90%、95%、100%、100%)脫水→透明(無水酒精∶二甲苯為2∶3)→浸蠟→包理等處理后、在室溫下切成7 μm厚的切片、最后用蘇木精-伊紅染色法(HE)染色。在低倍鏡下觀測(cè)切片、選擇典型視野、用Leica Qwin圖象分析系統(tǒng)檢測(cè)、每個(gè)樣品觀察5個(gè)非連續(xù)性7 μm的縱切片、每張切片測(cè)量5個(gè)最長(zhǎng)腸絨毛高度和最深隱窩深度。
1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析和Duncan's法多重比較、數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差形式表示。
2.1 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞采食量的影響(見表2)
表2數(shù)據(jù)可知,不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)采食量沒有顯著影響(P>0.05),但當(dāng)調(diào)質(zhì)溫度超過80℃后,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)采食量有降低的趨勢(shì)。
表2 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞采食量的影響(g/d)
2.2 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響(見表3)
在1~28日齡階段,70℃處理組的粗蛋白消化率顯著高于90℃組(P<0.05),而70℃組與80℃組,80℃組與90℃組的粗蛋白消化率之間差異均不顯著(P>0.05);另外,各處理組其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率均無顯著差異(P>0.05)。
2.3 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響(見表4)
在1~28日齡階段,各處理組之間的平均日增重和飼料報(bào)酬均無顯著差異(P>0.05),但80℃處理組肉雞的平均日增重和飼料報(bào)酬最好;在29~49日齡階段,隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高,肉雞平均日增重和飼料報(bào)酬均呈下降趨勢(shì),但各處理組之間差異不顯著(P>0.05);在1~49日齡階段,80℃組肉雞的平均日增重和平均料重比最好。
2.4 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞十二指腸和空腸消化酶活性的影響(見表5)
由表5可知,不同調(diào)質(zhì)溫度日糧對(duì)肉雞十二指腸及空腸的胰蛋白酶和淀粉酶活性均無顯著影響(P>0.05),兩種酶的活性表現(xiàn)為隨調(diào)質(zhì)溫度的升高而呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),但空腸中的胰蛋白酶例外。
表3 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響(%)
表4 飼喂經(jīng)不同溫度調(diào)質(zhì)的飼料對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響
表5 不同調(diào)質(zhì)溫度日糧對(duì)肉雞十二指腸及空腸消化酶活性的影響
2.5 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞十二指腸和空腸組織形態(tài)的影響(見表6)
由表6可知,不同調(diào)質(zhì)溫度日糧對(duì)肉雞十二指腸和空腸組織形態(tài)有影響,但差異不顯著(P>0.05)。其中、十二指腸的V/C值表現(xiàn)為隨調(diào)質(zhì)溫度的升高而呈下降的趨勢(shì),而空腸的V/C值則以80℃組最大。
表6 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞十二指腸和空腸組織形態(tài)的影響
3.1 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)采食量的影響
調(diào)質(zhì)溫度影響顆粒飼料的硬度和顆料飼料耐久性,而顆粒飼料的硬度和顆料飼料耐久性又與動(dòng)物的采食量有關(guān)[7]。本研究結(jié)果表明,三種調(diào)質(zhì)溫度對(duì)肉雞的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)采食量沒有顯著影響(P>0.05),這說明在實(shí)際生產(chǎn)中可選擇其中的任何一種溫度進(jìn)行肉雞飼料的調(diào)質(zhì)處理,但究竟哪種更好、還需結(jié)合飼料的生產(chǎn)成本和肉雞的生產(chǎn)性能進(jìn)行綜合考慮。
3.2 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響
不同調(diào)質(zhì)溫度對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響主要與調(diào)質(zhì)溫度對(duì)淀粉糊化,蛋白質(zhì)變性及其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)變性的影響有關(guān)。趙思明等(2002)[8]認(rèn)為,一定條件下,淀粉在淀粉酶的作用下被水解的程度與淀粉的糊化程度有關(guān),酶解力隨糊化程度的增加而上升。熱處理能夠鈍化如胰蛋白酶抑制因子,植物凝集素等熱敏性及水溶性抗?fàn)I養(yǎng)因子的活性,也有利于動(dòng)物的消化吸收,但是如果熱處理強(qiáng)度過高,反而會(huì)降低蛋白質(zhì)的消化率[9]。這是由于當(dāng)有還原性糖類存在時(shí),蛋白質(zhì)分子經(jīng)過加熱,賴氨酸殘基上的ε-氨基將與糖分子發(fā)生美拉德反應(yīng)所致,并且隨溫度升高,蛋白質(zhì)因褐變的損失越嚴(yán)重。本試驗(yàn)對(duì)粉料進(jìn)行不同溫度的調(diào)質(zhì)后加工成顆粒料飼喂肉雞,測(cè)定其對(duì)蛋白質(zhì)的消化率。結(jié)果表明,隨調(diào)質(zhì)溫度的升高,蛋白質(zhì)消化率有降低的趨勢(shì),當(dāng)調(diào)質(zhì)溫度為90℃時(shí)最低(P>0.05)。
有研究表明調(diào)質(zhì)溫度對(duì)總磷(主要是植酸磷)的表觀消化率產(chǎn)生一定的影響。袁洪嶺試驗(yàn)表明,制??商岣吖任镲暳现锌偭祝ㄖ饕侵菜崃祝┑挠行訹10];而邢建軍等(2001)[11]研究卻發(fā)現(xiàn),調(diào)質(zhì)溫度越高,植酸酶活性損失越大,當(dāng)仔豬飼料的調(diào)質(zhì)溫度從50℃升到70℃時(shí),植酸酶回收率由95%降為73%。本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著調(diào)質(zhì)溫度升高總磷的消化率有降低趨勢(shì),可能是由于高溫破壞了飼料中的天然植酸酶。本試驗(yàn)結(jié)果也發(fā)現(xiàn)調(diào)質(zhì)溫度對(duì)粗脂肪,粗纖維和鈣的消化率也有一定的影響、但是有關(guān)調(diào)質(zhì)制粒對(duì)這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響尚未見報(bào)道,調(diào)質(zhì)溫度對(duì)顆粒料中其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響有待進(jìn)一步的研究。
3.3 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響
大量研究表明,對(duì)家禽日糧進(jìn)行熱處理能夠提高家禽的生產(chǎn)性能。Svihus等(2004)[12]研究發(fā)現(xiàn),與飼喂粉料相比,給肉雞飼喂經(jīng)75℃調(diào)質(zhì)的顆粒料顯著提高肉雞生產(chǎn)性能;Silversides等(1999)[13]研究指出,調(diào)質(zhì)溫度過高將降低雛雞的生長(zhǎng)性能(特別是當(dāng)溫度超過95℃時(shí))、而Nissinen(1994)[14]的研究也得到了類似的結(jié)論,并且其試驗(yàn)結(jié)果還顯示85℃是肉雞顆粒料的最佳調(diào)質(zhì)溫度,隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高,肉雞增重和飼料報(bào)酬均顯著降低,特別是當(dāng)調(diào)質(zhì)溫度達(dá)到95℃時(shí)。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高,肉雞的體重,日增重以及飼料報(bào)酬均大致呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)、當(dāng)調(diào)質(zhì)溫度為80℃時(shí)達(dá)到最高。這與Nissinen[14]的研究結(jié)論類似。調(diào)質(zhì)溫度過高將降低肉雞生長(zhǎng)性能可能是因?yàn)檫^度的熱處理使飼料里的酶和維生素失活造成的,另外,蛋白質(zhì)和氨基酸發(fā)生美拉德反應(yīng)利用率降低也有一定的影響。
3.4 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞十二指腸和空腸消化酶活性的影響
家禽小腸中各種酶的活性決定了其對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用程度,而小腸不同部位酶活性的不同,則影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在小腸的消化率[15]。研究表明、食糜在空腸內(nèi)的停留時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于十二指腸[16]、肉雞日增重與小腸內(nèi)淀粉酶,蛋白酶的活性呈正相關(guān)[17]。王瀟等(2006)[18]研究發(fā)現(xiàn),膨化處理的玉米可顯著提高十二指腸和空腸內(nèi)容物的淀粉酶活力(P<0.05)。本試驗(yàn)結(jié)果也發(fā)現(xiàn)、隨調(diào)質(zhì)溫度的升高,十二指腸和空腸淀粉酶活性均呈下降趨勢(shì),這與王瀟等(2006)[18]的研究結(jié)不一致、可能是由于調(diào)質(zhì)溫度過高、使得飼料中可利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失過多,從而使進(jìn)入到小腸上皮泌酶細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)減少,抑制了內(nèi)源淀粉酶的分泌。
Bird等(1978)[19]研究指出、高蛋白飼料使禽胰蛋白酶活性升高,而提高日糧碳水化合物的采食量能使胰淀粉酶活性升高。Larsen等(1994)[20]的試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧黏度增強(qiáng)使胰蛋白酶活性增強(qiáng)。本試驗(yàn)結(jié)果與以上研究結(jié)論一致,隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高,十二指腸和空腸胰蛋白酶的活性呈先上升后下降的趨勢(shì),80℃組的胰蛋白酶活性最高,90℃組的胰蛋白酶活性最低。可能是由于調(diào)質(zhì)溫度過高使日糧中賴氨酸與還原糖發(fā)生美拉德反應(yīng)從而造成了蛋白質(zhì)和氨基酸的損失。
3.5 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對(duì)肉雞小腸黏膜組織形態(tài)的影響
小腸絨毛高度,隱窩深度以及V/C等指標(biāo)是用來衡量小腸消化吸收功能的主要指標(biāo)[21]。腸絨毛高度與細(xì)胞數(shù)量呈顯著正相關(guān),絨毛長(zhǎng)度變短時(shí),腸上皮細(xì)胞量減少,對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力降低。而隱窩深度則反映了腸道絨毛的發(fā)育狀況,隱窩變淺,意味著腸上皮細(xì)胞成熟率上升,吸收能力提高。V/C反映了小腸的功能狀態(tài)、比值上升,則黏膜的消化吸收功能增強(qiáng),生長(zhǎng)發(fā)育加快[22]。
本試驗(yàn)的結(jié)果表明,70℃、80℃組的V/C值均比90℃組高,隱窩均淺于90℃組,V/C均大于90℃組。其原因可能是隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高,飼料抗?fàn)I養(yǎng)因子被降解得越多,淀粉糊化和蛋白變性效果越好,使得腸絨毛的生長(zhǎng)得以改善;但調(diào)質(zhì)溫度過高會(huì)使得美拉德反應(yīng)加劇,降低了蛋白質(zhì)和能量的利用效率,使能被小腸黏膜利用的養(yǎng)分減少,導(dǎo)致腸絨毛的生長(zhǎng)受阻。
4.1 調(diào)質(zhì)溫度過高將降低肉雞的日增重和飼料報(bào)酬,采食經(jīng)80℃調(diào)質(zhì)處理飼料的肉雞表現(xiàn)出最好的生長(zhǎng)速度和飼料報(bào)酬。
4.2 調(diào)質(zhì)溫度從70℃升高到80℃,十二指腸、空腸中淀粉酶和胰蛋白酶的活性提高,但過高溫度(90℃)將降低消化酶的活性。
4.3 飼喂經(jīng)70℃和80℃調(diào)質(zhì)處理飼料的肉雞,其十二指腸和空腸的V/C均大于飼喂經(jīng)90℃調(diào)質(zhì)處理飼料的肉雞。
4.4 綜合考慮飼料生產(chǎn)成本和肉雞生產(chǎn)性能,建議進(jìn)行玉米-豆粕型肉雞顆粒飼料生產(chǎn)時(shí)將調(diào)質(zhì)溫度控制在70~80℃。
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