腦脊液tau蛋白和磷酸化tau蛋白測定在阿爾茨海默病診斷中的應用價值

陳兵

（中國人民解放軍第309醫(yī)院神經內科，北京 100091）

阿爾茨海默病（AD）是一種呈進行性發(fā)展的神經系統(tǒng)退行性病變，起病較為隱匿，早期不易察覺，患者主要表現(xiàn)為認知和行為功能減退，并伴有不同程度的精神障礙，多見于老年患者。目前，常用的AD診斷檢查包括神經心理學測驗、血液學檢查、腦電圖和腦脊液檢測，其中特異的AD生化指標檢測已成為國內外學者［1－3］研究的重點。Tau蛋白主要在中樞神經系統(tǒng)神經元的軸突表達，它能結合并穩(wěn)定微管系統(tǒng)，而高度磷酸化tau（p－tau）蛋白與微管的結合力下降，導致微管系統(tǒng)解體，進一步可引起神經軸突退化［4］。同時由p－tau蛋白形成的神經元纖維纏結（NFT）也是AD患者腦病變的基礎［5］。由于AD患者神經細胞膜通透性增加，可以通過檢測進入腦脊液中的tau蛋白和p－tau蛋白來間接反映患者腦組織中tau蛋白和p－tau蛋白的含量。因此，本研究通過檢測AD患者腦脊液tau蛋白和p－tau蛋白的含量，探討其在AD患者鑒別診斷中的應用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2012年4月～2014年4月在中國人民解放軍第309醫(yī)院和佳木斯大學附屬醫(yī)院接受治療的AD患者、血管性癡呆（VD）患者及非神經系統(tǒng)疾病患者共150例。其中，AD組患者50例，男27例，女23例，平均（75.3±4.5）歲；VD組患者50例，男30例，女20例，平均（74.5±5.2）歲；非神經系統(tǒng)疾病組患者50例，男24例，女26例，平均（75.9±4.8）歲。3組患者年齡、性別比例等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。入選AD患者均符合世界衛(wèi)生組織國際疾病分類ICD－10中關于AD的診斷標準。所有患者均接受簡易智能精神狀態(tài)檢查量表（MMSE）與缺血指數(shù)量表（Hachinski評分）檢測，其中AD患者MMSE評分10～23分，Hachinski評分≤4分；VD患者MMSE評分8～21分，Hachinski評分≥7分，且伴有腦中卒病史或出現(xiàn)神經系統(tǒng)定位體征。

1.2 檢驗方法

所有患者麻醉后行腰椎穿刺術抽取腦脊液2 mL，其中AD患者和VD患者于發(fā)病后30～60d內抽取腦脊液。采用人p－tau蛋白檢測試劑盒（Innotest hTAUAg，Innogenetics NV 公 司，Belgium），利用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法測定腦積液中總tau蛋白和p－tau蛋白含量。

1.3 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件對實驗數(shù)據(jù)進行處理，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用方差分析，兩兩比較采用t檢驗，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 患者腦脊液tau蛋白和p－tau蛋白含量比較

AD組患者腦脊液tau蛋白含量為（488.2±173.3）pg／mL，顯著高于 VD組的（306.2±129.2）pg／mL和非神經系統(tǒng)疾病組的（217.3±79.1）pg／mL（P＜0.05）；AD組患者腦脊液中p－tau蛋白含量為（190.3±83.1）pg／mL，顯著高于 VD組患者的（73.4±36.2）pg／mL和非神經系統(tǒng)疾病組的（55.4±35.2）pg／mL（P＜0.05）；VD組患者腦脊液中tau蛋白和p－tau蛋白含量與非神經系統(tǒng)疾病組患者比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）（見表1）。

表1 患者腦脊液tau蛋白和p－tau蛋白的含量（pg／mL）

2.2 靈敏度和特異性分析

結合AD組和VD組患者腦脊液tau蛋白和ptau蛋白含量測定值繪制受試者工作特征曲線（ROC曲線）。結果顯示，以腦脊液tau蛋白≥370 pg／mL作為診斷切點，所得的靈敏度為89.6%，特異度為78.8%，檢驗可靠性和與VD患者鑒別率為82.4%和66.8%；以腦脊液 p－tau蛋白≥120pg／mL作為診斷切點，所得到的靈敏度為93.5%，特異度為89.9%，檢驗可靠性和與VD患者鑒別率為91.7%和82.6%（見圖1）。

圖1 tau蛋白和p－tau蛋白含量測定的ROC曲線

3 討論

人體中樞神經和外周神經富含tau蛋白，其N－末端是聯(lián)系微血管與膜成分之間的橋梁，能夠維持人體微血管的穩(wěn)定［6］。正常情況下，1mol tau蛋白磷酸化2mol磷，當病變等其他因素引起tau蛋白高度磷酸化時，異常tau蛋白與微血管結合能力下降，還可競爭性與正常微管蛋白結合，進而破壞微血管系統(tǒng)的動態(tài)穩(wěn)定，最終引起AD等神經系統(tǒng)病變［7－9］。AD以老年斑和 NFT為病理特點，多發(fā)于老年群體，患者常出現(xiàn)記憶和執(zhí)行功能障礙、人格或行為改變、失語、失用、失認和視空間技能損害等癥狀，嚴重影響生活質量［10，11］。

AD臨床治療方法主要是給予乙酰膽堿酶抑制劑類的藥物治療，可增強中樞神經系統(tǒng)活動，延緩癡呆等病情的進一步惡化。AD患者神經元纖維糾結度明顯高于非神經系統(tǒng)疾病人群，而神經元纖維纏結又與tau蛋白異常磷酸化相關，因此，AD患者腦脊液中p－tau蛋白含量可能對于AD患者早期診斷具有潛在意義［12］。Hampel等［13］報道了 AD 患者腦脊液中p－tau蛋白顯著增高。本研究中，AD組腦脊液tau蛋白含量顯著高于VD組和非神經系統(tǒng)疾病組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；AD組腦脊液p－tau蛋白含量顯著高于VD組和非神經系統(tǒng)疾病組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。對于AD患者的檢測，以tau蛋白含量≥370pg／mL為AD診斷標準時，靈敏度、特異度、檢驗可靠性和與VD患者鑒別率分別為89.6%、78.8%、82.4%和66.8%；以p－tau蛋白含量≥120pg／mL為AD診斷標準時，靈敏度、特異度、檢驗可靠性和與VD患者鑒別率分別為93.5%、89.9%、91.7%和82.6%。因而將p－tau蛋白作為AD患者鑒別診斷具有潛在臨床價值。然而，由于實驗中選取對象具有一定局限性，建議選取正常人作為對照組，以進一步驗證p－tau蛋白含量在AD診斷中的價值。

綜上所述，腦脊液p－tau蛋白含量的測定作為輔助指標，有助于AD患者的鑒別診斷。同時，應不斷完善現(xiàn)有的診斷系統(tǒng)，合理使用不同量表和生化指標，對AD患者做到早診斷、早治療，從而改善患者的生活質量。

［1］冉軍，崔建嬌，劉強，等.阿爾茨海默病患者腦脊液磷酸化tau蛋白的檢測及臨床意義［J］.中國老年學雜志，2013，33（15）：3602－3603.

［2］劉曉蘭，陸連第，陳子祥.阿爾茨海默病患者腦脊液a－突觸核蛋白，Ab1－42，T－tau，P－tau，NF－L 水平變化及意義［J］.山東醫(yī)藥，2013，53（3）：90－92.

［3］Buchhave P，Minthon L，Zetterberg H，et al.Cerebrospinal Fluid Levels ofβ－Amyloid 1－42，but Not of Tau，Are Fully Changed Already 5to 10Years Before the Onset of Alzheimer Dementia［J］.Archives of General Psychiatry，2012，69（1）：98－06.

［4］方宇，張璐，朱紅燦，等.腦脊液磷酸化tau蛋白及β淀粉樣蛋白檢測在老年期癡呆患者早期鑒別診斷中的價值［J］.中國老年學雜志，2011，31（13）：2561－2562.

［5］Desikan RS，McEvoy LK，Thompson WK，et al.Amyloid－βassociated clinical decline occurs only in the presence of elevated P－tau［J］.Archives of Neurology，2012，69（6）：709－713.

［6］鮑琳琳，趙紅，張仁澤，等.阿爾茨海默病患者腦脊液核心生物標記與認知功能的相關性［J］.中國老年學雜志，2013，33（1）：39－41.

［7］O＇Dowd ST，Ardah MT，Johansson P，et al.The ELISAMeasured Increase in Cerebrospinal Fluid Tau that Discriminates Alzheimer＇s Disease from other Neurodegenerative Disorders is not Attributable to Differential Recognition of Tau Assembly Forms ［J］.Journal of Alzheimer＇s Disease，2013，33（4）：923－928.

［8］Desikan RS，McEvoy LK，Thompson WK，et al.Amyloid－βassociated clinical decline occurs only in the presence of elevated P－tau［J］.Archives of Neurology，2012，69（6）：709－713.

［9］Albert MS，DeKosky ST，Dickson D，et al.The diagnosis of mild cognitive impairment due to Alzheimer＇s disease：Recommendations from the National Institute on Aging－Alzheimer＇s Association workgroups on diagnostic guidelines for Alzheimer＇s disease［J］.Alzheimer＇s ＆ Dementia，2011，7（3）：270－279.

［10］Buchhave P，Minthon L，Zetterberg H，et al.Cerebrospinal Fluid Levels ofβ－Amyloid 1－42，but Not of Tau，Are Fully Changed Already 5to 10Years Before the Onset of Alzheimer Dementia［J］.Archives of General Psychiatry，2012，69（1）：98－106.

［11］Bateman RJ，Xiong C，Benzinger TL，et al.Clinical and biomarker changes in dominantly inherited Alzheimer＇s disease［J］.New England Journal of Medicine，2012，367（9）：795－804.

［12］De Souza LC，Chupin M，Lamari F，et al.CSF tau markers are correlated with hippocampal volume in Alzheimer＇s disease［J］.Neurobiology of Aging，2012，33（7）：1253－1257.

［13］Hampel H，Blennow K，Shaw LM，et al.Total and phosphorylated tau protein as biological markers of Alzheimer＇s disease［J］.Experimental Gerontology，2010，45（1）：30－40.