倪 妍，賴(lài)勁虎，陳連水，萬(wàn)金保*

(1.南昌大學(xué) 環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院/鄱陽(yáng)湖環(huán)境與資源利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330047;2.東華理工大學(xué) 生物系，江西 撫州 344000)

硝磺草酮［(2-(4-甲磺?；?-2-硝基苯甲酰)環(huán)己烷-1，3-二酮，Mesotrione］屬三酮類(lèi)除草劑，主要用來(lái)防治玉米地中闊葉雜草及禾本科雜草。其具有觸殺作用、持效性和后茬作物危害小的特點(diǎn)，一直在歐洲國(guó)家大面積使用，近些年開(kāi)始進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)［1］。硝磺草酮起初是用化學(xué)方法從美國(guó)加州的桃金娘科(Myrtaceae)紅千層(Callistemon citrinus)中分離出來(lái)的一種揮發(fā)性油類(lèi)植物毒素纖精酮(Leptospermone)，能通過(guò)抑制羥基苯基丙酮酸酯雙氧化酶(p-HPPD)來(lái)影響植物的光合作用［2］。而p-HPPD 是將酪氨酸轉(zhuǎn)化成質(zhì)體醌和生育酚的重要物質(zhì)［3］。硝磺草酮在水中的溶解度為0.16 mg/mL(20 ℃)，在土壤中的降解半衰期為3～32 d，吸附常數(shù)Kd為0.12～5.0 L/kg，這種物理化學(xué)特性使其在土壤中的移動(dòng)性較強(qiáng)，較容易污染地表水和地下水［4］。硝磺草酮進(jìn)入水環(huán)境后，在自然光照射下比較穩(wěn)定，降解半衰期長(zhǎng)達(dá)84 d［5］。較長(zhǎng)的半衰期使硝磺草酮?dú)埩魧?duì)水體中非靶生物產(chǎn)生潛在危害，如降低黑麥草(Lolium perenne L.)的光化學(xué)效率，降低梨形四膜蟲(chóng)(Tetrahymena pyriformis)的非特異性酯酶活性和費(fèi)氏弧菌(Vibrio fischeri)的新陳代謝活性［6-8］。

藻類(lèi)是水生態(tài)系統(tǒng)的初級(jí)生產(chǎn)者，對(duì)維持水生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定具有重要意義。藻類(lèi)具有個(gè)體小、代謝周期短、對(duì)有毒有害化合物敏感等特點(diǎn)，在較短時(shí)間內(nèi)可得到化學(xué)物質(zhì)對(duì)藻類(lèi)世代及種群水平的影響評(píng)價(jià)，是較理想的測(cè)試生物［9-11］。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外關(guān)于除草劑對(duì)藻類(lèi)的毒性研究已有大量報(bào)道，如蔡衛(wèi)丹等［12］在對(duì)映體水平上研究了異丙甲草胺對(duì)斜生柵藻和普通核小球藻的急性毒性;Sabater等［13］對(duì)比了芐嘧磺隆和醚磺隆對(duì)四種淡水微藻生長(zhǎng)的影響;Ma 等［14］研究了7 種除草劑對(duì)3 種藍(lán)藻的敏感性差異。但關(guān)于硝磺草酮對(duì)微藻的毒性研究鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究擬選取藍(lán)藻水華常見(jiàn)有害藻種微囊藻(Microcystis sp.)和常見(jiàn)綠藻四尾柵藻(Scenedesmus quadricauda)為毒性指示生物，用急性毒性法分析并比較了10%硝磺草酮懸浮劑和硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)兩種淡水微藻的毒性差異，探討硝磺草酮對(duì)水體非靶生物的潛在危害，以期為這種新興除草劑的合理使用及生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藻細(xì)胞培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)藻種四尾柵藻(FACHB-1297)和微囊藻(FACHB-562)均購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院野生生物種質(zhì)庫(kù)淡水藻種庫(kù)。10%硝磺草酮懸浮劑購(gòu)自大連松遼化工有限公司，硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品(CAS 104206-82-8，純度99.0%)購(gòu)自德國(guó)Dr.Ehrenstorfer。四尾柵藻和微囊藻均于BG-11［15-16］培養(yǎng)液(pH 7.1)中擴(kuò)大培養(yǎng)數(shù)周，在無(wú)菌條件下反復(fù)轉(zhuǎn)接3 次以上，待達(dá)到同步培養(yǎng)后取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的藻細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)條件為溫度(25±1)℃，光照度80 μmol/(m2·s)，光暗比12∶12。

1.2 急性毒性實(shí)驗(yàn)

將10%硝磺草酮懸浮劑和標(biāo)準(zhǔn)品分別配制成1 g/L 的母液，用BG-11 培養(yǎng)液將母液稀釋至終濃度0.05，0.2，0.5，2，5，10 mg/L，每個(gè)濃度設(shè)置3 個(gè)平行，并設(shè)置一組空白對(duì)照。將藻液接種至含不同濃度硝磺草酮的100 mL 培養(yǎng)液中，四尾柵藻的初始藻細(xì)胞量為1.6×105～2.4×105cells/mL，微囊藻的初始藻細(xì)胞量為2.3×105～3.0×105cells/mL，每天定時(shí)搖動(dòng)3 次，并隨機(jī)更換錐形瓶位置，使光照均勻。培養(yǎng)期間每天用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)測(cè)定細(xì)胞密度。

取10 mL 藻液，8 000 r/min 離心10 min 收集藻細(xì)胞，加入5 mL 90%丙酮后4 ℃避光提取24 h，離心后收集上清液為提取液，以90%丙酮為參比，用光徑為1 cm 的比色杯在750，663，645，630 nm 波長(zhǎng)處測(cè)OD 值。校正后葉綠素a 含量按以下公式計(jì)算:

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 軟件(IBM SPSS Statistics 19)進(jìn)行單因素方差(ANOVA，LSD 檢驗(yàn))分析和處理，P＜0.05認(rèn)為差異顯著。生長(zhǎng)抑制率通過(guò)(對(duì)照組細(xì)胞密度-處理組細(xì)胞密度)/對(duì)照組細(xì)胞密度×100%計(jì)算后，采用Logistic model［17］計(jì)算其半效應(yīng)濃度(EC50)值。葉綠素a 抑制率通過(guò)(對(duì)照組葉綠素a 含量-處理組葉綠素a 含量)/對(duì)照組葉綠素a 含量×100%計(jì)算。作圖采用SigmaPlot 10.0。

2 結(jié)果與討論

2.1 硝磺草酮對(duì)四尾柵藻生長(zhǎng)的影響

用不同質(zhì)量濃度的硝磺草酮商品分別處理四尾柵藻培養(yǎng)液，以藻細(xì)胞密度為生長(zhǎng)指標(biāo)，其對(duì)四尾柵藻生長(zhǎng)的影響見(jiàn)圖1A。與對(duì)照組相比，0.05～10 mg/L 的硝磺草酮對(duì)四尾柵藻呈不同程度的抑制，且存在明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。

圖1 硝磺草酮商品(A)及其標(biāo)準(zhǔn)品(B)對(duì)四尾柵藻生長(zhǎng)的對(duì)比影響Fig.1 Effects of commercial(A)and analytical standards(B)mesotrione on growth of Scenedesmus quadricauda

暴露第2 天，高濃度組(＞0.2 mg/L)藻細(xì)胞數(shù)量急劇減少(P＜0.05)，隨后細(xì)胞密度緩慢上升，這可能與四尾柵藻自身的抗性增強(qiáng)，在硝磺草酮的脅迫下有一定的恢復(fù)能力有關(guān)。直至暴露第5 天，高濃度組(＞0.2 mg/L)藻細(xì)胞密度仍低于接種密度，表明高濃度硝磺草酮對(duì)四尾柵藻具有較強(qiáng)的抑制作用。暴露在0.05～0.5 mg/L的硝磺草酮商品下，四尾柵藻培養(yǎng)第5 d的生長(zhǎng)抑制率分別為11.11%、67.68%、160.61%、170.71%、172.73%和209.09%。使用不同濃度的硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品處理四尾柵藻藻液作為參考，其生長(zhǎng)曲線見(jiàn)圖1B。與硝磺草酮商品不同，低濃度組(0.05～0.2 mg/L)對(duì)四尾柵藻的生長(zhǎng)具有微弱的促進(jìn)作用。2 mg/L 的硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品開(kāi)始抑制四尾柵藻的生長(zhǎng)，且隨著處理濃度的增加，抑制作用逐漸增強(qiáng)。暴露在2～10 mg/L 的硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品下第5天，四尾柵藻的生長(zhǎng)抑制率分別為11.07%、43.38%和47.91%(P＜0.05)。

顯微觀察發(fā)現(xiàn)，四尾柵藻在硝磺草酮商品處理下暴露1 d 后出現(xiàn)聚集，且聚集程度與硝磺草酮濃度呈正相關(guān)，這種現(xiàn)象與斜生柵藻在毒死蜱處理下細(xì)胞體積增大，形態(tài)改變，子細(xì)胞分裂畸形，出現(xiàn)人字形和褲型相似［18］。可能是浮游植物抵御有害環(huán)境脅迫、保護(hù)自身的方式。

2.2 硝磺草酮對(duì)微囊藻生長(zhǎng)的影響

圖2 硝磺草酮商品(A)及其標(biāo)準(zhǔn)品(B)對(duì)微囊藻生長(zhǎng)的對(duì)比影響Fig.2 Effects of commercial(A)and analytical standards(B)mesotrione on growth of Microcystis sp.

用不同質(zhì)量濃度(0.05～10 mg/L)的硝磺草酮商品分別處理微囊藻培養(yǎng)液，其對(duì)微囊藻生長(zhǎng)的影響見(jiàn)圖2A。與對(duì)照組相比，硝磺草酮商品無(wú)論濃度高低對(duì)微囊藻均呈抑制作用，且抑制程度與其濃度呈正相關(guān)。暴露第5 天，微囊藻隨硝磺草酮商品濃度的遞增依次被抑制19.75%、17.28%、98.77%、109.88%、130.86%和172.84%。與硝磺草酮商品不同，不同水平的硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)微囊藻生長(zhǎng)的影響呈現(xiàn)低濃度(0.05～0.2 mg/L)促進(jìn)、高濃度(＞2 mg/L)抑制趨勢(shì)(圖2B)。由圖1 和圖2 對(duì)比得知，硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品的毒性遠(yuǎn)低于商品(P＜0.05)，可能由于硝磺草酮商品中含有溶劑與乳化劑等助劑，這些助劑對(duì)藻類(lèi)也具有潛在危害。這與Ma 等［19］研究結(jié)果一致，農(nóng)藥助劑對(duì)四尾柵藻和普通小球藻的生長(zhǎng)也具有抑制作用，且抑制程度與藻種和助劑類(lèi)型有關(guān)。

微囊藻的生長(zhǎng)曲線比四尾柵藻的更平緩，藻細(xì)胞未出現(xiàn)聚集和急劇死亡，表明微囊藻對(duì)硝磺草酮商品及其標(biāo)準(zhǔn)品的敏感性低于四尾柵藻，與Fairchild 等［20］研究結(jié)果一致，藍(lán)藻的敏感性低于綠藻。藻類(lèi)不同的敏感程度在其他除草劑處理下也有出現(xiàn)，如暴露在草甘膦下，柵藻比小球藻敏感，絲藻比微囊藻敏感［21-22］。這種敏感性差異與藻類(lèi)的細(xì)胞大小、結(jié)構(gòu)差異，以及分泌物和酶的不同，使藻細(xì)胞對(duì)有毒物質(zhì)的親和性不同有關(guān)［23］。一般而言，暴露在相同的農(nóng)藥下，綠藻和硅藻的敏感性高于藍(lán)藻［20，24］。這種敏感性差異導(dǎo)致群落中的敏感種逐漸被抗性種替代，群落組成發(fā)生變化［22］。這一結(jié)果提示，水體中硝磺草酮?dú)埩艨赡芨淖冊(cè)孱?lèi)群落的優(yōu)勢(shì)種，對(duì)藍(lán)藻水華的爆發(fā)起著促進(jìn)作用。

2.3 硝磺草酮對(duì)四尾柵藻和微囊藻的急性毒性

表1 為硝磺草酮商品及其標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)四尾柵藻和微囊藻的24，48，72，96 h 的EC50值。由表1 可知，硝磺草酮商品及其標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)兩種藻的毒害效應(yīng)不同，對(duì)微囊藻的毒性較小，EC50值大于相同暴露時(shí)間的四尾柵藻的EC50值。隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，四尾柵藻的EC50值總體呈下降趨勢(shì)，毒性越來(lái)越大，但在72 h上升，表明該藻在72 h 對(duì)硝磺草酮有一定的抗性。微囊藻并未顯示出類(lèi)似的抗性，其毒性隨著時(shí)間的延長(zhǎng)增加。總體上，硝磺草酮商品及其標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)兩種藻的毒性都隨著暴露時(shí)間的增加而增強(qiáng)。硝磺草酮商品及其標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)微囊藻的EC50，24h、EC50，48h、EC50，72h分別是對(duì)四尾柵藻EC50值的1.87、1.67、1.18倍和1.43、1.28、0.98 倍，兩者的差異性隨暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而減小，在暴露初期最為明顯。

表1 硝磺草酮商品及其標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)四尾柵藻和微囊藻的急性毒性Tab.1 Acute toxicity of commercial and analytical standards mesotrione on Scenedesmus quadricauda and Microcystis sp.

硝磺草酮作為阿特拉津的替代品，與阿特拉津?qū)λ奈矕旁搴臀⒛以宓?6 h EC50值0.04 mg/L、0.09 mg/L相比，硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)兩者的96 h EC50值更大，表明硝磺草酮的生物毒性比阿特拉津低，其水體殘留對(duì)水生生物的影響比阿特拉津?。?0，25］。硝磺草酮對(duì)水生生物毒性大小因受試生物物種不同而有一定差異，對(duì)浮生植物浮萍的EC50值為0.04 mg/L，對(duì)原核生物費(fèi)氏弧菌的LC50值為69.2 mg/L，對(duì)原生動(dòng)物梨形四膜蟲(chóng)的LC50值為322.7 mg/L［8，26］。而硝磺草酮對(duì)月芽藻的EC50值為7.81 mg/L［26］，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。因此，藻類(lèi)對(duì)硝磺草酮的敏感性低于浮生植物，高于原核生物和原生動(dòng)物。硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品的EC50值遠(yuǎn)高于商品的EC50值，可能由于市售硝磺草酮農(nóng)藥為提高藥效和安全施藥添加的磷酸酯、非離子及陰離子表面活性劑本身也具有一定毒性［27］。因此，使用商品農(nóng)藥和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比研究其毒性效應(yīng)能使該農(nóng)藥對(duì)生態(tài)環(huán)境影響的評(píng)估更為全面。

2.4 硝磺草酮對(duì)四尾柵藻和微囊藻葉綠素a 含量的影響

圖3 硝磺草酮商品及其標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)四尾柵藻(A)和微囊藻(B)葉綠素a 的抑制百分率Fig.3 Inhibition rate of chlorophyll a of Scenedesmus quadricauda(A)and Microcystis sp.(B)under commercial and analytical standards mesotrione exposure

葉綠素是光合作用中參與吸收、傳遞光能的關(guān)鍵物質(zhì)，是描述藻類(lèi)將無(wú)機(jī)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物質(zhì)能力的重要指標(biāo)。用不同質(zhì)量濃度的硝磺草酮商品和標(biāo)準(zhǔn)品處理四尾柵藻和微囊藻培養(yǎng)液，隨時(shí)間的延長(zhǎng)，葉綠素a 含量變化與其生長(zhǎng)曲線相似(數(shù)據(jù)未列出)，暴露第5 天，2 種藻葉綠素a 的抑制百分率見(jiàn)圖3A、3B。硝磺草酮對(duì)2 種藻細(xì)胞葉綠素a 含量的影響與硝磺草酮?jiǎng)┝肯嚓P(guān)，隨著濃度的增加，四尾柵藻和微囊藻的葉綠素a 抑制率均增大。在硝磺草酮商品處理下，與對(duì)照組相比，四尾柵藻和微囊藻葉綠素a 抑制率分別為27.8%～91.2%和27.2%～81.3%。而這2 種藻的葉綠素a 抑制率在硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品處理下更低，分別為1%～51.2%和3.6%～52.6%。硝磺草酮商品的毒性高于標(biāo)準(zhǔn)品的毒性，這與其對(duì)2 種藻生長(zhǎng)的影響結(jié)論一致。Valiente 等［28］研究結(jié)果也表明，0.02 mg/L 的硝磺草酮降低了四尾盤(pán)星藻細(xì)胞內(nèi)的葉綠素a 含量。與本研究中硝磺草酮能使四尾柵藻和微囊藻的葉綠素a 含量降低吻合。葉綠素a 含量降低的原因可能由藻細(xì)胞密度降低或者單細(xì)胞內(nèi)葉綠素a 含量減少引起。而后者可能由于葉綠體片層中捕光Chla/b-Pro 復(fù)合體合成受到抑制，使細(xì)胞內(nèi)的葉綠素合成受阻［29］。

3 結(jié)論

0.05～10 mg/L 的硝磺草酮商品及其標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)四尾柵藻和微囊藻的生長(zhǎng)均呈抑制作用，且存在顯著的劑量-效應(yīng)關(guān)系。硝磺草酮商品的毒性遠(yuǎn)高于標(biāo)準(zhǔn)品，可能與商品中添加助劑有關(guān)。四尾柵藻對(duì)硝磺草酮的敏感性高于微囊藻，敏感性差異隨暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而減小，在暴露初期最為明顯。暴露第5天，四尾柵藻和微囊藻葉綠素a 抑制率在硝磺草酮商品處理下為27.8%～91.2%、27.2%～81.3%;在硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品處理下為1%～51.2%、3.6%～52.6%。

［1］Shaner D，Brunk G，Nissen S，et al.Role of soil sorption and microbial degradation on dissipation of mesotrione in plant-available soil water［J］.Journal of Environmental Quality，2012，41(1):170-178.

［2］Mitchell G，Bartlett D W，F(xiàn)raser T E M，et al.Mesotrione:a new selective herbicide for use in maize［J］.Pest Management Science，2001，57(2):120-128.

［3］Norris S R，Barrette T R，Dellapenna D.Genetic dissection of carotenoid synthesis in Arabidopsis defines plastoquinone as an essential component of phytoene desaturation［J］.The Plant Cell Online，1995，7(12):2139-2149.

［4］Dyson J S，Beulke S，Brown C D，et al.Adsorption and degradation of the weak acid mesotrione in soil and environmental fate implications［J］.Journal of Environmental Quality，2002，31(2):613-618.

［5］ter Halle A，Richard C.Simulated solar light irradiation of mesotrione in natural waters［J］.Environmental Science ＆ Technology，2006，40(12):3842-3847.

［6］Abou W H，Abou S M M，Nigg H N，et al.Growth response of freshwater algae，anabaena flos-aquae and selenastrum capricornutum to atrazine and hexazinone herbicides［J］.Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology，1991，46(2):223-229.

［7］Mccurdy J D，Mcelroy J S，Kopsell D A，et al.Effects of mesotrione on perennial ryegrass(Lolium perenne L.)carotenoid concentrations under varying environmental conditions［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2008，56(19):9133-9139.

［8］Bonnet J L，Bonnemoy F，Dusser M，et al.Toxicity assessment of the herbicides sulcotrione and mesotrione toward two reference environmental microorganisms:Tetrahymena pyriformis and Vibrio fischeri［J］.Archives of Environmental Contamination and Toxicology，2008，55(4):576-583.

［9］陳傳紅，劉振乾，傅鳳，等.丁草胺對(duì)杜氏鹽藻生理生化的影響［J］.生態(tài)科學(xué)，2007，26(1):18-21.

［10］鐘遠(yuǎn)，樊娟，劉春光，等.硫酸鹽對(duì)淡水浮游藻類(lèi)群落結(jié)構(gòu)的影響研究［J］.環(huán)境科學(xué)，2009，30(8):2253-2258.

［11］Mofeed J，Mosleh Y Y.Toxic responses and antioxidative enzymes activity of Scenedesmus obliquus exposed to fenhexamid and atrazine，alone and in mixture［J］.Ecotoxicology and Environmental Safety，2013，95:234-240.

［12］蔡衛(wèi)丹，劉惠君，方治國(guó).Rac-及S-異丙甲草胺對(duì)2 種微藻毒性特征影響研究［J］.環(huán)境科學(xué)，2012，33(2):448-453.

［13］Sabater C，Cuesta A，Carrasco R.Effects of bensulfuron-methyl and cinosulfuron on growth of four freshwater species of phytoplankton［J］.Chemosphere，2002，46(7):953-960.

［14］Ma J，Tong S，Wang P，et al.Toxicity of seven herbicides to the three cyanobacteria anabaena flos-aquae，microcystis flosaquae and mirocystis aeruginosa［J］.International Journal of Environmental Research，2010，4(2):347-352.

［15］Rippka R.Methods in enzymology［M］，New York:Academic Press，1988，167:3-27.

［16］Rippka R，Deruelles J，Waterbury J B，et al.Generic assignments，strain histories and properties of pure cultures of cyanobacteria［J］.Journal of General Microbiology，1979，111(1):1-61.

［17］Isnard P，F(xiàn)lammarion P，Roman G，et al.Statistical analysis of regulatory ecotoxicity tests［J］.Chemosphere，2001，45(4):659-669.

［18］葛順，陳敏東，宋玉芝，等.毒死蜱對(duì)斜生柵藻急、慢性毒性效應(yīng)的研究［J］.環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2013，36(1):56-60.

［19］Ma J，Lin F，Zhang R，et al.Differential sensitivity of two green algae，Scenedesmus quadricauda and Chlorella vulgaris，to 14 pesticide adjuvants［J］.Ecotoxicology and Environmental safety，2004，58(1):61-67.

［20］Fairchild J F，Ruessler D S，Carlson A R.Comparative sensitivity of five species of macrophytes and six species of algae to atrazine，metribuzin，alachlor，and metolachlor［J］.Environmental Toxicology and Chemistry，1998，17(9):1830-1834.

［21］Vendrell E，De Barreda Ferraz D G，Sabater C，et al.Effect of glyphosate on growth of four freshwater species of phytoplankton:A microplate bioassay［J］.Bull Environ Contam Toxicol，2009，82(5):538-542.

［22］Saxton M A，Morrow E A，Bourbonniere R A，et al.Glyphosate influence on phytoplankton community structure in Lake Erie［J］.Journal of Great Lakes Research，2011，37(4):683-690.

［23］陳海柳，潘綱，閆海，等.六價(jià)鉻抑制淡水藍(lán)綠藻生長(zhǎng)的毒性效應(yīng)［J］.環(huán)境科學(xué)，2003，24(2):13-18.

［24］Peterson H G，Boutin C，F(xiàn)reemark K E，et al.Toxicity of hexazinone and diquat to green algae，diatoms，cyanobacteria and duckweed［J］.Aquatic Toxicology，1997，39(2):111-134.

［25］Ma J，Lin F，Wang S，et al.Toxicity of 21 herbicides to the green alga Scenedesmus quadricauda［J］.Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology，2003，71(3):0594-0601.

［26］Cedergreen N，Streibig J C.The toxicity of herbicides to non-target aquatic plants and algae:Assessment of predictive factors and hazard［J］.Pest Management Science，2005，61(12):1152-1160.

［27］張家斌.硝磺草酮懸浮制劑的助劑研制［J］.現(xiàn)代農(nóng)藥，2013，12(3):22-25.

［28］Valiente M C，Bricheux G，Portelli C，et al.Comparative effects of the herbicides chlortoluron and mesotrione on freshwater microalgae［J］.Environmental Toxicology and Chemistry，2012，31(4):778-786.

［29］Wong P K.Effects of 2，4-D，glyphosate and paraquat on growth，photosynthesis and chlorophyll-a synthesis of Scenedesmus quadricauda Berb 614［J］.Chemosphere，2000，41(1):177-182.