■郭元晟 張 敏

（1.錫林郭勒職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古錫林浩特 026000；2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018）

硒作為動(dòng)物必需的微量元素之一，參與機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖、預(yù)防疾病和保護(hù)組織的完整性等過(guò)程。缺硒可以導(dǎo)致羊生長(zhǎng)緩慢、免疫機(jī)能下降、羔羊白肌病、母羊不孕和羔羊腹瀉等癥狀[1-2],但過(guò)量的硒會(huì)引起家畜中毒，主要是蹣跚癥和動(dòng)物堿病[3]。據(jù)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究確定我國(guó)72%的面積為缺硒地區(qū)，其中內(nèi)蒙古錫林郭勒盟地區(qū)為缺硒嚴(yán)重地區(qū)。因此，在該地區(qū)肉羊日糧中添加適宜的硒源是非常必要的。硒可分為無(wú)機(jī)硒與有機(jī)硒兩種化學(xué)形態(tài)，硒酸鹽和亞硒酸鹽為常見(jiàn)的無(wú)機(jī)硒，是使用較普遍的硒源[4]。有機(jī)硒的主要形態(tài)包括酵母硒、硒氨基酸和硒蛋白。Se-met、Se-cys與硒胱氨酸(selenocystine)等為常見(jiàn)的硒氨基酸，其中Se-met與Se-cys是食物中廣泛存在的形式[5]，它們與常規(guī)氨基酸的唯一不同是硒取代了硫原子。有機(jī)硒與無(wú)機(jī)硒最大的差異在于有機(jī)硒易于被動(dòng)物體吸收與利用、安全無(wú)副作用并且減少對(duì)環(huán)境的污染[6-7]。目前,國(guó)內(nèi)的補(bǔ)硒來(lái)源主要是亞硒酸鈉，但大量研究已證實(shí)無(wú)論在生物利用率、組織器官中的沉積率、抗氧化效果、提高免疫力與繁殖性能等諸多方面有機(jī)硒都優(yōu)于無(wú)機(jī)硒[8-12]。酵母硒是一種安全、穩(wěn)定、生物利用率高，低污染的一種常見(jiàn)的有機(jī)硒，其中大部分的硒是以蛋白和多糖的形式存在于酵母中[13]。酵母硒正逐步取代亞硒酸鈉在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用。本試驗(yàn)主要從生長(zhǎng)性能、抗氧化功能及免疫功能等方面研究有機(jī)硒在蒙古羊養(yǎng)殖中的使用效果，確定適合錫盟地區(qū)蒙古羊日糧中有機(jī)硒的適宜添加劑量，提高飼料硒源的利用率。為進(jìn)一步推進(jìn)錫盟肉羊的舍飼圈養(yǎng)、在草蓄平衡前提下增加牲畜飼養(yǎng)量，提高農(nóng)牧民收入提供可靠的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)選擇240只5～6月齡體重相近的健康蒙古羊作為試驗(yàn)動(dòng)物。試驗(yàn)采用單因子隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將240只健康蒙古羊分成4組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。其中Ⅰ組為對(duì)照組，日糧添加無(wú)機(jī)硒（亞硒酸鈉）0.3 mg/kg DM,其他3組為有機(jī)硒組，日糧中分別添加0.3、0.6、0.9 mg/kg DM的有機(jī)硒（酵母硒）（見(jiàn)表1），預(yù)飼期15 d，正飼期60 d。

1.2 飼養(yǎng)管理及試驗(yàn)日糧

試驗(yàn)羊進(jìn)欄前對(duì)羊舍進(jìn)行全面消毒，預(yù)飼期間對(duì)羊只進(jìn)行健康檢查、驅(qū)蟲(chóng)、健胃等。每天清掃圈舍，以保持圈內(nèi)清潔，整個(gè)圈舍采取自然通風(fēng)，所有圈舍進(jìn)行不定期消毒。試驗(yàn)由專(zhuān)人管理，預(yù)飼期讓試驗(yàn)肉羊自由采食，以估測(cè)其每天的采食量，確定試驗(yàn)日糧的給量，并及時(shí)收集剩料，日飼喂2次，即每天 7：00和18：00各飼喂1次，先粗后精，自由飲水。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)日糧參照國(guó)內(nèi)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)NY/T816-2004飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，并做出適當(dāng)調(diào)整，其配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2，無(wú)機(jī)硒及有機(jī)硒按表1所示4種不同水平均勻混合于精料當(dāng)中。

表2 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

在試驗(yàn)第1、30 d和第60 d早晨對(duì)試驗(yàn)羊進(jìn)行空腹稱(chēng)重,并記錄各重復(fù)耗料量，分別計(jì)算各日糧處理組平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及增重耗料比(G/F)。

計(jì)算公式如下：

平均日增重=(末重-初重)/試驗(yàn)天數(shù)；

平均日采食量=耗料量/試驗(yàn)天數(shù)；

增重耗料比=增重/耗料量。

1.3.2 樣品采集

在試驗(yàn)第1、30 d和60 d早晨，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取2只羊，每處理組共12只，進(jìn)行靜脈采血，離心制備血清，至于-20℃低溫冰箱中凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 血清測(cè)定指標(biāo)及方法

血清中GSH-Px、MDA、SOD、IgG、IgM、IgA 的含量采用試劑盒測(cè)定（購(gòu)自南京建成生物有限公司），具體操作見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用EXCEL2007進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)后，利用SAS9.0軟件的ANOVA統(tǒng)計(jì)程序進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)和多重比較。其中P<0.05表示處理組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊生長(zhǎng)性能的影響(見(jiàn)表3)

表3 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊羔羊生長(zhǎng)性能的影響

由表3可以看出，添加有機(jī)硒可以顯著提高Ⅲ組、Ⅳ組蒙古羊0～30 d和30～60 d的平均日增重（P<0.05）,然而對(duì)平均日采食量和飼料增重比沒(méi)有影響。

2.2 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊抗氧化性能的影響(見(jiàn)表4)

表4 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊血清中GSH-Px、SOD活性和MDA含量的影響

由表4可以看出，Ⅲ組、Ⅳ組在30 d和60 d血清中GSH-Px、SOD的活性均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），在60 d時(shí)血清中的MDA含量顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。但添加有機(jī)硒對(duì)30 d時(shí)血清中MDA的含量沒(méi)有影響。

2.3 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊免疫機(jī)能的影響(見(jiàn)表5)

表5 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊血清中免疫球蛋白含量的影響（g/l）

由表5可以看出，添加有機(jī)硒可以顯著提高60 d時(shí)蒙古羊血清中的IgG、IgM和IgA含量及30 d時(shí)血清中的IgG和IgM的含量（P<0.05）。但對(duì)30 d時(shí)血清中IgA的含量沒(méi)有影響。

3 討論

3.1 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊生長(zhǎng)性能的影響

國(guó)內(nèi)外大量關(guān)于日糧中添加硒對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能影響的研究及報(bào)道，結(jié)果卻大相徑庭。林長(zhǎng)光研究給育肥豬飼喂酵母硒可顯著提高其生產(chǎn)性能，但張乙山等[14]等報(bào)道，將納米硒、酵母硒和亞硒酸鈉3種硒源飼喂生長(zhǎng)肥育豬，其生長(zhǎng)性能無(wú)顯著差異（P>0.05)。黃志秋等[15]研究結(jié)果表明,精料中補(bǔ)充亞硒酸鈉0.245 mg/kg，青年荷斯坦母牛體增重效果顯著,比對(duì)照組平均體增重提高34.89%，同時(shí)徐娥等[16]研究添加有機(jī)硒可以顯著提高肉牛的飼料轉(zhuǎn)化率和平均日采食量。郭孝等[17]研究表明,在杜泊羊日糧中添加15%高硒苜蓿青干草,體增重和飼料轉(zhuǎn)化率均達(dá)到極顯著水平，但黃玉邦等[18]在灘羊羔羊日糧中添加0.1 mg/kg DM亞硒酸鈉和富硒酵母60 d后，其富硒酵母組羔羊的生長(zhǎng)性能與亞硒酸鈉組差異不顯著。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在日糧中添加0.6 mg/kg DM及0.9 mg/kg DM的有機(jī)硒可以顯著提高蒙古羊的平均日增重，這與多數(shù)試驗(yàn)結(jié)果，在日糧中添加一定量的硒具有提高肉羊生長(zhǎng)性能的報(bào)道相一致[19]。產(chǎn)生這一結(jié)果的主要原因可能是添加硒能夠促進(jìn)瘤胃微生物的生長(zhǎng)[20-21]，并可提高瘤胃消化日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力[22-23]。同時(shí)硒具有調(diào)節(jié)甲狀腺素、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的活性，能增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體對(duì)糖原、蛋白質(zhì)、脂肪的分解，有利于機(jī)體能量的供給，促進(jìn)生長(zhǎng)[24]。此外，硒還具有提高動(dòng)物機(jī)體抗應(yīng)激、抗氧化及免疫作用，間接地促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)[25]。

3.2 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊抗氧化性能的影響

動(dòng)物機(jī)體靠新陳代謝活動(dòng)來(lái)保持自身與環(huán)境的平衡，當(dāng)動(dòng)物機(jī)體受到外部環(huán)境與內(nèi)在因素的影響會(huì)造成體內(nèi)產(chǎn)生自由基和活性氧，活性氧會(huì)直接攻擊生物分子，或間接活化蛋白酶及核酸酶，造成DNA斷裂、脂質(zhì)過(guò)氧化、蛋白質(zhì)及DNA傷害，DNA傷害可能引起或促進(jìn)細(xì)胞癌化。李素娟[26]報(bào)道，硒既是抗氧化酶的組分也可以直接清除血液自由基。硒還可以與細(xì)胞膜結(jié)合以保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整進(jìn)而發(fā)揮其抗氧化作用[27]。機(jī)體抗氧化能力的指標(biāo)主要有GSH-Px、SOD、MDA等，血液中GSH-Px活性與硒濃度間有呈高度正相關(guān)。Arthington[28]研究表明,肉用閹牛日糧中添加硒組(每頭2.5 mg/d)在試驗(yàn)60 d和90 d時(shí)其肝臟、血漿中的硒含量和血漿中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性都比不添加組有明顯升高。倪麗麗[29]結(jié)果表明，奶牛日糧中添加酵母硒可以提高血清中T-AOC、GSHPx和SOD的活性，降低了MDA的含量。Juniper等[30]在奶牛、肉牛、小牛和山羊的日糧中都加入酵母硒6.63 mg/kg DM,結(jié)果顯示添加組的血硒含量與谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活性均顯著高于不添加組。黃玉邦等[18]研究發(fā)現(xiàn)，添加有機(jī)硒可以顯著提高羔羊的抗氧化能力。石磊等[31]研究表明，飼喂酵母硒可以顯著提高妊娠母羊血清中T-AOC、GSH-Px和SOD的活性，降低了MDA的含量。本試驗(yàn)結(jié)果與上述結(jié)果基本一致，添加有機(jī)硒可以顯著提高蒙古羊血清中GSH-Px和SOD的活性，降低MDA的含量，其中以添加0.6 mg/kg DM和0.9 mg/kg DM兩組效果最為明顯。

3.3 有機(jī)硒對(duì)蒙古羊免疫機(jī)能的影響

硒是免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)的重要組分，主要參與調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞及非特異性免疫的效應(yīng)細(xì)胞的功能[32]。關(guān)于硒對(duì)反芻動(dòng)物體液免疫影響報(bào)道并不一致，Swecker等[33]發(fā)現(xiàn)，奶牛補(bǔ)硒后可增加初乳及犢牛血清IgG水平，但對(duì)IgM無(wú)影響。雒國(guó)彬等[34]報(bào)道隨著酵母硒添加量的提高，奶牛血清IgM、IgG和IgA的含量先升高后降低。Kanada等[35]報(bào)道，給缺硒犢牛適量加硒可提高新生犢牛血漿IgA水平。Rock等[36]研究報(bào)道，母羊補(bǔ)硒后及其所產(chǎn)羔羊的IgG水平均比對(duì)照組的高。本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，添加相同劑量的有機(jī)硒與無(wú)機(jī)硒對(duì)蒙古羊血清中IgM、IgG和IgA的含量無(wú)顯著影響，而添加高劑量的有機(jī)硒與添加無(wú)機(jī)硒相比可以顯著提高蒙古羊血清中IgM、IgG和IgA的含量，其中以添加0.6 mg/kg DM時(shí)效果最好。體液免疫的關(guān)鍵是抗體的產(chǎn)生，缺硒時(shí)，會(huì)降低機(jī)體合成免疫球蛋白的功能[37]，IgG、IgA和IgM滴度下降[38]，但硒攝入過(guò)量，則會(huì)抑制體液免疫功能[39-40]。目前關(guān)于硒對(duì)肉羊體液免疫的影響的報(bào)道較少且試驗(yàn)結(jié)果也存在一定的差異，其影響機(jī)制尚未得到定論，有待于進(jìn)一步深入研究。

4 結(jié)論

在蒙古羊日糧中添加有機(jī)硒可以顯著平提高均日增重、血清的抗氧化力及血清中免疫球蛋白的含量。通過(guò)有機(jī)硒對(duì)蒙古羊生產(chǎn)性能、抗氧化能力、免疫機(jī)能的影響結(jié)果、飼料成本、環(huán)境保護(hù)等方面的綜合考慮，確定錫盟地區(qū)蒙古羊日糧中有機(jī)硒的最適添加劑量為0.6 mg/kg DM。