■ 萬 丹 唐振華 夏中生 黃建燁，2 仵天培 蔣 芳

（1.廣西大學動物科技學院，廣西南寧530004；2.廣西參皇養(yǎng)殖集團有限公司，廣西玉林 537000）

寡糖（oligosaccharide）是由 2～10單糖分子以特殊的糖苷鍵聚合而成的化合物。寡糖可分為普通寡糖和功能性寡糖兩大類,普通寡糖，如蔗糖、麥芽糖和乳糖等，可被動物機體消化吸收；而功能性寡糖，如果寡糖（fructo-oligosaccharide，F(xiàn)OS）、甘露寡糖（mannan-oligosaccharide，MOS）、木寡糖(xylo-oligosaccharide，XOS)等[1]，不能被動物機體消化吸收,但可被腸道內(nèi)有益菌利用，從而促進雙歧桿菌、乳酸桿菌、酵母菌等快速增殖，改善動物腸道菌群體系，抑制有害病原菌的生長，增強動物機體的免疫機能，保障機體健康，

促進生長發(fā)育，提高飼糧養(yǎng)分的轉(zhuǎn)化效率[2-3]。功能性寡糖作為一種良好的腸道調(diào)節(jié)類新型飼料添加劑，相比抗生素添加劑，具有無污染、無殘留、無副作用的優(yōu)點，對于畜禽的健康養(yǎng)殖和食品安全生產(chǎn)具有重要的意義，其功能的有效性、特殊性使其作為抗生素替代物之一的新型綠色飼料添加劑具有廣闊發(fā)展前景。至今，國內(nèi)外對功能性寡糖在畜禽飼料中的應用上有較多的研究，但對其在種雞生產(chǎn)上的應用研究還較少；雖然功能性寡糖有其共同的作用特性，但不同種類的功能性寡糖的作用機理、使用劑量以及日糧類型的差異，

對于不同動物或相同動物不同的生長發(fā)育和生理階段的效果不盡一致[4-7]。本試驗目的旨在研究飼糧中添加使用果寡糖（FOS）、甘露寡糖（MOS）及其兩者復合物（復合寡糖）對廣西黃羽肉雞（玉林三黃雞）種雞產(chǎn)蛋性能、繁殖性能、血清生化指標、飼糧養(yǎng)分消化代謝率的影響，為功能性寡糖在種雞的品種繁育、健康養(yǎng)殖生產(chǎn)中合理使用提供理論依據(jù)和實踐應用參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用果寡糖（FOS）制劑由廣西奧立高生物有限公司提供，白色粉劑，純度30%；甘露寡糖（MOS）制劑由安琪酵母有限公司提供，灰色粉劑，純度20%。試驗在廣西玉林參皇養(yǎng)殖集團新橋種雞場進行，試驗動物為該場自繁自養(yǎng)的已開產(chǎn)的24周齡、各項生產(chǎn)指標無明顯差異的三黃雞種雞。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

選取432羽24周齡的產(chǎn)蛋三黃雞種雞，隨機分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共4個組，每組設(shè)3個重復，每個重復36羽(3只雞置1個籠內(nèi)飼養(yǎng))，環(huán)境條件一致。Ⅰ組為對照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧(本場種雞產(chǎn)蛋高峰期飼糧，其組成及營養(yǎng)水平見表1)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別飼喂基礎(chǔ)飼糧添加0.4%FOS、0.02%MOS、0.4%FOS+0.02%MOS的試驗飼糧。每天上午8:30、下午14:30定時兩次飼喂，根據(jù)采食情況、生產(chǎn)性狀和種雞的體重指標投料，每只每日約80 g，自由飲水，白天自然采光，晚上適時人工補照，保證每天光照16 h,雞群每隔4 d進行人工受精，預飼7 d，待各組產(chǎn)蛋指標等無顯著差異時正式試驗，為期7周（49 d）。雞群免疫程序及其他飼養(yǎng)管理按該種雞場常規(guī)進行。

1.3 樣品采集與測定

1.3.1 產(chǎn)蛋性能指標

在試驗開始、結(jié)束時和每隔兩周，各組分別按重復進行定位欄稱重，每個重復抽9羽雞分別進行空腹稱重，并統(tǒng)計各階段的飼料消耗情況。

試驗開始后，每天分三次(早上9:00、中午12:00、下午17:00)各組按重復收集所產(chǎn)種蛋，記錄各組的產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重和飼料消耗量；合格種蛋鑒定方法:種蛋重量達標(35.5 g≤m≤44.5 g),雙黃蛋、破裂蛋、沙殼蛋、軟殼蛋、形狀不規(guī)則、顏色過淺或過深的種蛋均屬不合格種蛋，每周收集各組合格種蛋進行編號，送入孵化場,7 d后照蛋,記錄各組合格種蛋的受精數(shù),經(jīng)過21 d全自動恒溫孵化器孵化后，觀測記錄孵化結(jié)果，去除弱雛和死雛，記錄各組出殼的健雛數(shù)。并按以下公式計算產(chǎn)蛋率、蛋均重、料蛋比、種蛋合格率、受精率、孵化率等指標。

產(chǎn)蛋率（%）=產(chǎn)蛋總數(shù)/(產(chǎn)蛋母雞數(shù)×產(chǎn)蛋天數(shù))×100；

蛋均重為各組合格種蛋的平均質(zhì)量（g）；

料蛋比=試驗期間總采食量/試驗期間總產(chǎn)蛋的重量；

種蛋合格蛋率（%）=合格蛋數(shù)/產(chǎn)蛋數(shù)×100；

受精率（%）=受精種蛋數(shù)/合格種蛋數(shù)×100；

孵化率（%）=出殼的健雛數(shù)/受精種蛋數(shù)×100。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.3.2 飼糧養(yǎng)分消化率的測定

飼糧養(yǎng)分的表觀消化率測定采取內(nèi)源指示劑酸不溶灰分法（AIA法），試驗結(jié)束前3 d各組按重復收集雞糞樣本，混合取樣，每組3個樣本，同時采集飼料樣本；試驗結(jié)束后，將各組糞樣、飼料樣帶回實驗室進行分析，先分別測出飼料和糞樣中的AIA含量，再進行其它成分的分析測定。用常規(guī)方法測定飼料及糞樣中的粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪（EE）、粗纖維（CF）、總鈣、總磷，飼糧養(yǎng)分代謝率按下列公式計算：

飼糧中某養(yǎng)分的表觀代謝率(%)=[1-(b/a)×(c/d)]×100。

式中：a——飼料中某養(yǎng)分的含量(%)；

b——糞樣中某養(yǎng)分的含量(%)；

c——飼料中AIA含量(%)；

d——糞樣中AIA含量(%)。

1.3.3 血清生化指標的檢測

飼養(yǎng)試驗結(jié)束當天上午，各組試驗雞群按重復進行采樣，抽血，每個重復取2只種雞（空腹狀態(tài)），取血部位為雞翅根靜脈，體積約5 ml，先于45°角靜置2 h，4℃低溫保存。用全自動生化分析儀進行血清生化指標的測定。各項血清生化指標檢測方法：總蛋白(TP)采用雙縮脲法，白蛋白(ALB)采用溴甲酚綠法，總膽固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)采用酶終點比色法，血糖(GLU)采用GOD-PAP終點法，血清尿素氮(BUN)采用IFCC動力法，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和堿性磷酸酶(ALP)采用比色法。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件進行方差分析，結(jié)果用“平均值±標準誤(X±SE)”來表示，用LSD法進行各組之間的多重比較，顯著水平為0.05(P＜0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 產(chǎn)蛋性能（見表2）

表2 各組種雞產(chǎn)蛋性能比較

由表2可見，與對照組(Ⅰ組)相比，各組種雞的產(chǎn)蛋率均有顯著提高，Ⅱ（0.4%FOS）、Ⅲ（0.02%MOS）和Ⅳ（0.4%FOS+0.02%MOS）組產(chǎn)蛋率分別提高了6.2%、5.3%和4.2%（P＜0.05）；與對照組相比，各組種蛋合格率均有不同程度的提高，其中Ⅱ組和Ⅲ組分別提高了3.2%和3.1%，差異顯著（P＜0.05）；Ⅱ組和Ⅲ組合格種蛋的受精率分別提高了2.1%和2.0%，差異顯著（P＜0.05）；同時，Ⅱ組和Ⅲ組受精種蛋的孵化率分別提高2.1%和1.0%，差異顯著（P＜0.05）；Ⅱ、Ⅳ組種蛋均重分別比對照組提高了3.0%和3.7%，差異顯著（P＜0.05）；與對照組相比，各組的料蛋比有所降低，其中Ⅱ、Ⅳ組分別比對照組降低了8.9%和9.50%，差異顯著（P＜0.05）。

2.2 血清生化指標（見表3）

表3 各組種雞血清生化指標

由表3可見，與對照組比較，Ⅱ組血清總蛋白（TP）含量顯著提高了8.0%（P＜0.05），Ⅲ組和Ⅳ組與對照組無顯著差異（P＞0.05）；Ⅳ組血清白蛋白含量顯著高于其他組（P＜0.05），Ⅱ組血清球蛋白（Glo）含量較對照組顯著提高了21.1%（P＜0.05），Ⅲ組和Ⅳ組與對照組無顯著差異（P＞0.05）；Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性較對照組均有上升趨勢，但組間差異不顯著（P＞0.05）；各組天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性（AST）也無顯著差異（P＞0.05）。Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組血清中總膽固醇（T-CHO）含量顯著低于對照組（P＜0.05），其中果寡糖和甘露寡糖兩者聯(lián)合使用的Ⅳ組，血清T-CHO下降幅度最大；Ⅱ組和Ⅳ組甘油三酯（TG）顯著低于對照組（P＜0.05），其中0.4%FOS組（Ⅱ組）TG含量下降幅度最大。Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組血清BUN含量均低于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）；Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組血糖（GLU）含量較對照組均有不同程度的上升，其中Ⅱ組與對照組比較差異顯著（P＜0.05）。

2.3 飼糧養(yǎng)分代謝率（見表4）

表4 各組種雞飼糧養(yǎng)分代謝率(%)

由表4可見，與對照組相比，Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組飼糧粗蛋白質(zhì)(CP)的表觀代謝率分別提高了8.2%、6.9%和8.5%（P＜0.05）；Ⅱ組和Ⅳ組飼糧EE的代謝率分別較對照組提高了4.6%和5.5%（P＜0.05）；飼糧磷（P）的表觀代謝率分別提高了14.0%和14.7%（P＜0.05）；Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組飼糧粗纖維（CF）的表觀代謝率提高了39.1%、42.1%和35.0%（P＜0.05）；飼糧中鈣（Ca）的表觀代謝率相對于對照組略有所提高，但組間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 FOS、MOS對種雞產(chǎn)蛋性能的影響

產(chǎn)蛋性能是評價種雞重要的生產(chǎn)指標，也是評價飼糧質(zhì)量水平和添加劑效果的重要指標。從試驗結(jié)果中可以看出，飼糧中添加一定量的FOS、MOS或這兩種寡糖的復合物，種雞的產(chǎn)蛋性能均有所不同程度的改善。兩種寡糖單一使用時均可以顯著提高種雞的產(chǎn)蛋率、合格蛋率、受精率、孵化率，其中FOS可以顯著降低料蛋比（P＜0.05），提高飼料利用率；兩種寡糖聯(lián)合使用時，也可顯著降低料蛋比，提高產(chǎn)蛋率、合格蛋率和蛋均重（P＜0.05），受精率雖有提高趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。從試驗效果來看，兩者聯(lián)用對生產(chǎn)性能的促進作用不如單一組，兩者聯(lián)用的合格蛋率和受精率均低于單一組（P＜0.05），產(chǎn)蛋率和孵化率也低于單一組，但差異不顯著（P＞0.05）。可見這兩種寡糖聯(lián)合使用并未產(chǎn)生加性效應。

目前，益生元（寡糖）和益生素（菌）兩者聯(lián)合使用在動物營養(yǎng)中的應用研究是一個熱點，相關(guān)研究報道較多，一般均可達到更好的試驗效果。其原因可能是由于益生元、益生素之間的相互組合可以彌補各自作用效果上的不足，產(chǎn)生加性效應，對生產(chǎn)性能的提高有更大的促進作用。陸娟娟在羅非魚中的試驗中證明，枯草芽孢桿菌和FOS聯(lián)用比各自單一使用效果更好[8]。而華雪銘等在暗紋東方魨的飼料中添加殼聚糖和益生菌，兩者合用比單一使用并無顯著影響[9]。不同寡糖聯(lián)合使用的試驗研究較少。郭芳等研究了MOS、XOS等復合寡糖對AA肉雞生產(chǎn)性能和免疫器官指數(shù)的影響，結(jié)果表明復合寡糖對肉雞前期生產(chǎn)性能有明顯促進作用(P＜0.01),后期趨于平緩,但對AA肉雞的免疫器官指數(shù)影響不明顯[10]。本試驗在種雞飼料中使用FOS+MOS復合寡糖，未表現(xiàn)出比FOS或MOS單一使用更好的效果，因而認為它們之間沒有協(xié)同作用，但有關(guān)影響不同寡糖的相互作用因素是多方面的，與使用劑量、動物的種類、飼料類型、環(huán)境條件、生長階段等有著密切的關(guān)系[11]，尚需進一步的研究和證實。

3.2 FOS、MOS對種雞血清生化指標的影響

血清生化指標是可以反映動物生理狀況及健康狀況的改變，例如血清中的蛋白水平一般和動物的免疫功能相關(guān)，球蛋白與白蛋白的比值（G/A）與動物體的免疫呈正相關(guān)，比值升高，則證明處于一個較好的免疫狀態(tài)，反之則證明動物的免疫機能下降，肖宇等在奶山羊上的試驗也得到了相同的結(jié)論[12]。本試驗FOS、MOS組G/A值較對照組均有上升的趨勢，可見寡糖能夠提高種雞血清的免疫指標，使種雞處于一個較好的免疫狀態(tài)。

血清BUN值反映了動物體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的平衡情況，當其含量下降時，說明飼料蛋白質(zhì)利用、機體蛋白質(zhì)合成率較高；當其含量過高時，則會使體內(nèi)的氮以尿素或尿酸的形式排出體外，從而降低飼料中氮的利用率。本試驗FOS、MOS及FOS+MOS組的BUN值有降低趨勢，這可能是因為功能性寡糖提高動物體內(nèi)蛋白質(zhì)、氨基酸的利用率。

血清中膽固醇（T-CHO）和甘油三酯(TG)的含量與動物對脂類物質(zhì)的代謝有關(guān)，種雞在產(chǎn)蛋高峰期，脂類代謝旺盛，一方面作為體內(nèi)的能量和必需脂肪酸的來源，另一方面為種蛋蛋黃的形成和后代雛雞的生長提供營養(yǎng)基礎(chǔ)，脂類物質(zhì)的代謝效率，反映在血清T-CHO和TG水平，T-CHO和TG水平降低，證明脂類物質(zhì)的消化代謝加快，減少了種雞的肝臟對脂肪代謝的負擔，對種雞的生產(chǎn)是有利的。Delzenne等研究發(fā)現(xiàn)，功能性寡糖可以顯著降低畜禽血清中T-CHO和TG濃度，改善脂類代謝[13]，本試驗很好證實了這一觀點，同時也證明了不同的寡糖聯(lián)合使用，對T-CHO水平降低效果更顯著。其原理可能是通過增加腸道雙歧桿菌的作用來間接實現(xiàn)的，雙歧桿菌對脂類的調(diào)節(jié)可表現(xiàn)在對T-CHO的作用，同時寡糖可以吸收部分膽汁酸，降低動物體內(nèi)膽固醇的合成。

血清中肝臟的轉(zhuǎn)氨酶的水平代表肝臟的受損程度，或者肝臟的負荷程度，其活力就越高，證明肝臟的活動越強，比值的改變也會反映這一點。在本試驗中，飼糧中添加FOS、MOS及兩者的復合物，對種雞血清AST、ALT均無無顯著影響，說明其對肝臟功能沒有不良影響；ALP作為一種和磷酸轉(zhuǎn)移相關(guān)的酶，在磷酸基團的轉(zhuǎn)移運輸方面其著重要的作用。ALP偏高一般為病理或生理情況，病理為肝臟損傷，生理上表現(xiàn)為骨組織活躍，鈣磷的吸收代謝旺盛，本試驗堿性磷酸酶升高有利于雞利用鈣、磷合成雞蛋內(nèi)的有機物質(zhì)和蛋殼的形成等。

血糖GLU含量在正常值范圍內(nèi)的高低代表動物機體對碳水化合物的代謝程度，通常情況下，GLU值升高被認為是動物體內(nèi)的糖類物質(zhì)代謝旺盛。本試驗中，飼糧中單一添加寡糖或者兩種寡糖聯(lián)用，種雞血清GLU的含量均有上升的趨勢，作用機理可能是寡糖促進了動物體對糖類物質(zhì)消化代謝。

3.3 FOS和MOS對種雞飼糧養(yǎng)分代謝率的影響

研究表明，適宜添加量的功能性寡糖可以顯著調(diào)節(jié)動物胃腸道的微生物菌群，減少胃腸道的病原微生物，提高畜禽的免疫反應，保持腸道黏膜的完整性，從而提高動物的生產(chǎn)性能。本研究中可以看出,飼糧中單獨添加FOS和MOS，均可不同程度地提高飼糧中各類營養(yǎng)物質(zhì)的代謝率，與對照組相比，F(xiàn)OS組和兩種寡糖聯(lián)用組能顯著提高飼糧中除Ca以外的各類營養(yǎng)物質(zhì)的代謝率，但MOS組中EE、Ca和P的代謝率相對于對照組差異不顯著，而兩種寡糖聯(lián)用對除Ca以外飼糧養(yǎng)分代謝率提高與單獨添加FOS的差異不顯著（P＜0.05），這可能是由于甘露寡糖的添加量不足或總寡糖過量。因為甘露寡糖的添加量不足，無法促進有益菌增長；而寡糖添加過度，不但對腸道微生物的調(diào)節(jié)無明顯的累加效應，還可能引起畜禽消化道后部的微生物利用寡糖發(fā)酵過度，引起食物通過消化道的速度加快，嚴重時會導致腹瀉或死亡。寡糖促進畜禽飼糧養(yǎng)分吸收的原理有多種解釋，一是腸道環(huán)境的改變，表現(xiàn)在腸道內(nèi)pH值的降低，揮發(fā)性脂肪酸增多，腸道有益菌菌群的增加，有害菌菌群的減少，降低了飼糧養(yǎng)分的額外消耗，提高了飼糧養(yǎng)分在畜禽體內(nèi)的沉積。Mathewd等的試驗表明，飼糧中添加1.0%的乳寡糖可以降低斷奶仔豬回腸pH值和大腸內(nèi)容物中揮發(fā)性脂肪酸的含量；腸道形態(tài)的改變，可以增加腸道與飼糧養(yǎng)分的接觸面積，也增加了食糜在消化道內(nèi)停留時間，這對于飼料利用率的提高是有利的。王卓報道，寡聚糖可以一定程度提高仔豬的十二指腸、空腸的絨毛高度，且寡糖與益生菌的組合能夠顯著增加大鼠十二指腸和空腸的絨毛長度、降低隱窩深度和黏膜厚度，擴大了小腸的吸收面積，從而提高了飼糧養(yǎng)分消化率的作用[14]。本試驗中，飼糧中添加一定量的FOS、MOS及兩者復合物，種雞飼糧的CP、EE、CF消化代謝率較對照組均有不同程度的提高。寡糖促進礦物質(zhì)的吸收機理是通過雙歧桿菌的間接作用完成的，益生菌產(chǎn)生的VFA可以溶解腸道的不溶性鈣鹽等，并通過旁細胞途徑吸收。朱志懷等將FOS與雌鼠作用，發(fā)現(xiàn)雌鼠Ca元素吸收率達70.18%[15]；王紅芹等在育肥豬飼糧中添加果寡糖，可以提高育肥豬對飼料Ca離子吸收，同時有增加飼糧養(yǎng)分消化代謝率的趨勢[16]。

4 結(jié)論

在黃羽肉種雞飼糧中添加FOS、MOS及兩者復合物均可一定程度上提高種雞的產(chǎn)蛋性能和繁殖性能，提高飼料效率，提高血清堿性磷酸酶活性，降低血清膽固醇、甘油三酯和血清尿素氮的水平；同時可一定程度上提高種雞對飼糧養(yǎng)分代謝率，但FOS、MOS在種雞飼糧中兩者聯(lián)合使用，沒有明顯的協(xié)同效應；單獨添加FOS組在提高生產(chǎn)性能、增強機體免疫力和提高飼糧養(yǎng)分代謝率等方面的綜合效果最優(yōu)。