液基細(xì)胞學(xué)檢查在痰脫落細(xì)胞診斷中的應(yīng)用

張文杰，聞春艷*，孫大菊

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 病理科，吉林 長春130033)

肺癌是比較常見的惡性腫瘤，早期缺乏明顯癥狀，給診斷帶來困難，痰脫落細(xì)胞學(xué)檢查是肺癌早期診斷的重要手段之一。傳統(tǒng)的涂片方法很難提高痰診斷陽性率，利用液基細(xì)胞學(xué)檢測(LPT)是目前比較先進(jìn)的痰脫落細(xì)胞檢查方法，現(xiàn)就應(yīng)用 LPT 法與傳統(tǒng)涂片法用于痰細(xì)胞學(xué)診斷進(jìn)行對比，探討其臨床使用價值。

1資料和方法

1.1標(biāo)本的收集與處理收集我院2010年1-12月臨床高度可疑為肺腫瘤住院患者120例痰標(biāo)本，先取痰標(biāo)本涂片2-4張，放入95%酒精中，固定15-20分鐘以上作常規(guī)檢查，余下部分倒入利普保存液中。①每一體積痰液混合相同體積保存液中，每10 ml加入1 ml黏液溶解液混合后放置30 min，將混合液在振蕩器上震動15 min；②將混合液全部倒入離心管后，在加入4 ml清潔液1 500 r/min離心7 min。③將上清液倒掉，用吸管將離心管邊緣的殘液吸干，加入相當(dāng)于細(xì)胞團(tuán)2倍的細(xì)胞基液，充分混勻，吸取50 μl均懸液涂在載玻片上。

1.2方法所有涂片 95%酒精固定15-20 min以上，巴氏染色后由醫(yī)師于顯微鏡下閱片診斷。

2結(jié)果

液基薄層細(xì)胞涂片中，細(xì)胞集中于直徑20 mm的利普專用玻片限定范圍內(nèi)，背景清晰，層次分明，去除了黏液和雜質(zhì)，有效細(xì)胞成份增多，且細(xì)胞呈三維立體結(jié)構(gòu)，核膜、核仁、染色質(zhì)清晰可見，提高了痰的陽性檢出率，涂片面積縮小，省時省力，提高醫(yī)務(wù)人員工作效率。而傳統(tǒng)痰涂片背景多很污穢、紅細(xì)胞、炎性滲出物及黏液混雜。120例高度可疑肺癌的患者經(jīng)組織病理確診肺癌52例。在52例確診肺癌標(biāo)本，傳統(tǒng)涂片確診癌32例，陰性20例。其中鱗癌20例，腺癌9例，小細(xì)胞癌3例；LPT確診癌45例，陰性7例。其中鱗癌31例，腺癌11例，小細(xì)胞癌3例。二種制法片方法差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。兩種涂片檢查結(jié)果對比發(fā)現(xiàn)，LPT涂片比傳統(tǒng)涂片檢查陽性率明顯提高。

3討論

傳統(tǒng)痰脫落細(xì)胞學(xué)檢查的方法沿用多年，為臨床診斷提供了幫助，但由于采集過程通常由病理科技師選取有價值的部分涂片，其余痰液扔掉，這會造成假陰性率增高，且直接涂片導(dǎo)致背景不清晰，紅細(xì)胞、炎性滲出物及黏液混雜，細(xì)胞容易腫脹、退變影響診斷，又由于受標(biāo)本新鮮程度、脫落細(xì)胞數(shù)量、涂片厚薄均勻等因素影響，造成細(xì)胞不易觀察，細(xì)胞性質(zhì)難以明確診斷，導(dǎo)致漏診或無法診斷。近年來液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)廣泛開展，改善了標(biāo)本收集及制片方法，提高了制片質(zhì)量。

本組通過兩種方法對比，我們發(fā)現(xiàn)LPT對鱗癌診斷陽性率明顯高于傳統(tǒng)涂片。它消除了傳統(tǒng)痰涂片過多的黏液絲、炎細(xì)胞及細(xì)胞碎屑的干擾，使鱗癌特征更加明顯，核大、核深染、核畸形、核大小不一及N/C比高，但鱗癌特有的腫瘤素質(zhì)不如傳統(tǒng)涂片明顯。由于LPT制片技術(shù)改進(jìn)，對標(biāo)本及時固定，收集到細(xì)胞量明顯增多，背景干凈清晰，細(xì)胞分布均勻，層次分明，保持細(xì)胞完整性，染色鮮艷，制片良好，這一點上腺癌尤為突出。改變了傳統(tǒng)涂片容易腫脹、退變，腫瘤細(xì)胞容易變形，核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)不清。小細(xì)胞癌呈桑椹狀或鑲嵌狀結(jié)構(gòu)，癌細(xì)胞小、胞質(zhì)少、核漿比例大，核異形明顯等特征。

與傳統(tǒng)痰制片方法比較，LPT法是收集全部患者痰液，放入保存液中，保持細(xì)胞完整性，大大減少了粘液、雜質(zhì)、紅細(xì)胞及炎細(xì)胞成份，有效上皮細(xì)胞成份明顯增多，且細(xì)胞保持完好，易于閱片，涂片面積明顯縮小，縮短了閱片時間，提高病理科人員的工作效力，降低假陰性率，提高痰陽性檢出率。痰液基細(xì)胞學(xué)另一個優(yōu)勢是可以根據(jù)需要制作多張涂片，以備做免疫組織化學(xué)檢查。

液基薄層細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)(LPT)是一種全新的細(xì)胞學(xué)檢測方法[1，2]，且操作更加簡單，無需特殊設(shè)備儀器的投入，將采集到細(xì)胞全部制片成有效識別細(xì)胞，從而降低了假陰性率?？傊琇PT 在痰液制片染色等方面便于質(zhì)量控制是值得推廣的一種新技術(shù)，與傳統(tǒng)涂片對照應(yīng)用，具有重要臨床價值。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳慰霖，李洪愛，王靖華,等.液基細(xì)胞學(xué)在肺腫瘤檢查中的探討[J].醫(yī)學(xué)研究生報，2005， 18(3):283.

[2]吳廣平，王恩華，李建華,等.液基細(xì)胞學(xué)檢查系統(tǒng)在肺癌患者痰液檢查中的臨床應(yīng)用價值[J].中國肺癌雜志，2006,9(2):192.

[3]徐進(jìn)志，高儉，李野，等.液基細(xì)胞學(xué)檢測對痰脫落細(xì)胞診斷的研究[J].中華腫瘤防治雜志，2007,8(14):1173.

收稿日期：(2013-06-11)

文章編號：1007-4287(2015)04-0634-02

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