一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)工作能否達(dá)到比較確實(shí)可靠的結(jié)論，在于實(shí)驗(yàn)前的周密考慮和擬訂出盡可能詳盡、客觀和符合實(shí)驗(yàn)要求的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。2014年，長(zhǎng)沙市為研究市面上不同口蹄疫疫苗對(duì)豬的保護(hù)效果及生長(zhǎng)豬接種疫苗后免疫抗體消長(zhǎng)過(guò)程，進(jìn)行了疫苗免疫效果比較實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，本人深感動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)至關(guān)重要，現(xiàn)就幾點(diǎn)粗略看法，與大家共同探討。

1　動(dòng)物實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所的選擇方面

同一來(lái)源的動(dòng)物群，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比較性較為可靠。因此，盡可能選擇同一養(yǎng)殖場(chǎng)同欄舍待產(chǎn)母豬成為實(shí)驗(yàn)考慮因素之一。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)，制定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的日程表，注明實(shí)驗(yàn)步驟、時(shí)間、樣本采集情況、觀察數(shù)據(jù)等內(nèi)容，嚴(yán)格按照技術(shù)流程操作，確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安全性，避免動(dòng)物的人為性損失，非常重要。同時(shí)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所實(shí)驗(yàn)人員的責(zé)任心和專業(yè)技術(shù)能力的選擇也是確定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所必須考慮因素之一。

2　動(dòng)物實(shí)驗(yàn)疫苗的選定方面

口蹄疫病毒有7個(gè)血清型，其中O型對(duì)畜牧業(yè)影響最為嚴(yán)重。目前，最有效的預(yù)防措施就是對(duì)動(dòng)物進(jìn)行疫苗接種，我國(guó)實(shí)行強(qiáng)制免疫政策，受到各級(jí)政府高度重視。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x定政府發(fā)放疫苗和市場(chǎng)銷售疫苗8種類型疫苗，全面覆蓋當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)市面上口蹄疫常見(jiàn)疫苗，具有現(xiàn)實(shí)意義。

3　動(dòng)物實(shí)驗(yàn)診斷試劑盒的選擇方面

防治口蹄疫的關(guān)鍵是做出及時(shí)、準(zhǔn)確的診斷，目前用于口蹄疫診斷的血清學(xué)技術(shù)有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、病毒中和試驗(yàn)（VNT）、間接血凝試驗(yàn)（IHA）等，其中ELISA由于具有特異性強(qiáng)、敏感度高、操作簡(jiǎn)便、實(shí)驗(yàn)快速、可靠性好等優(yōu)點(diǎn)，成為國(guó)際上檢測(cè)口蹄疫的最常用方法之一。ELISA又包括液相阻斷ELISA、間接ELISA、固相競(jìng)爭(zhēng)ELISA、間接夾心ELISA、單克隆抗體ELISA、PCR-ELISA、Dot-ELISA等。液相阻斷ELISA由于主要應(yīng)用于檢測(cè)免疫抗體，評(píng)價(jià)口蹄疫疫苗免疫效力而適用于本次實(shí)驗(yàn)。

4　動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)間的設(shè)定方面

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，必須充分預(yù)計(jì)母豬生產(chǎn)時(shí)間，必須充分考慮生長(zhǎng)豬免疫抗體消亡波動(dòng)，必須充分留出生長(zhǎng)豬實(shí)驗(yàn)間隔時(shí)間，充分估計(jì)到動(dòng)物不可預(yù)料的死亡或是自然死亡可能給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的影響。

5　動(dòng)物免疫程序的制定方面

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，雖然疫苗生產(chǎn)廠家在使用說(shuō)明書中提供一個(gè)參考免疫程序，但由于各地疫病流行特點(diǎn)、飼養(yǎng)管理、母源抗體干擾以及疫苗性質(zhì)、類型和免疫途徑等各方面因素影響，目前還沒(méi)有一個(gè)免疫程序可通用。因此，有必要根據(jù)本地的實(shí)際情況，參考本地區(qū)疫病流行特點(diǎn)和免疫監(jiān)測(cè)結(jié)果，制定合適的動(dòng)物免疫程序來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

6　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇方面

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇應(yīng)充分考慮母源抗體的影響，在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前對(duì)待產(chǎn)母豬進(jìn)行采血檢測(cè)，選取口蹄疫母源抗體水平基本一致的母豬所產(chǎn)臨床健康、個(gè)體差異不明顯仔豬進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，確保實(shí)驗(yàn)的一致性。同時(shí)，設(shè)置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)照組，“對(duì)照”是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最重要的概念之一，任何沒(méi)有對(duì)照組的實(shí)驗(yàn)，其結(jié)果一般說(shuō)都是不可靠的。對(duì)照組設(shè)置不適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)，同樣也是不可靠的。

7　動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)方面

7.1 實(shí)驗(yàn)全過(guò)程的觀察

存活率即是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)全程觀察最直觀的體現(xiàn)。動(dòng)物疫苗實(shí)驗(yàn)主要目的是驗(yàn)證疫苗效果，確保動(dòng)物健康。如果不同動(dòng)物疫苗之間存活率差異顯著，則說(shuō)明不同動(dòng)物疫苗之間免疫效果不同。

7.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物形態(tài)學(xué)上觀察

動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究中，臨床觀察到的數(shù)據(jù)是最重要的第一手資料。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，動(dòng)物的飼喂情況、運(yùn)動(dòng)方式、健康狀況、數(shù)量、個(gè)體大小、免疫副反應(yīng)狀況等信息必須記錄在案。同時(shí)，根據(jù)接種后不同臨床表現(xiàn)，給予無(wú)、輕微、中度、中度、死亡五種免疫副反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)，便于直觀表述動(dòng)物疫苗免疫的臨床狀況。

7.3 動(dòng)物疫苗免疫后抗體水平比較