古 莉
(涪陵區(qū)畜牧獸醫(yī)局,重慶 408000)
檢測(cè)飼料中霉菌毒素的方法及防控措施
古 莉
(涪陵區(qū)畜牧獸醫(yī)局,重慶 408000)
霉菌毒素種類繁多,廣泛存在于自然界中,并且經(jīng)常污染飼料。(1)霉菌可以引起飼料的變質(zhì),使飼用價(jià)值降低,甚至完全失去商品價(jià)值,從而造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失;(2)飼料被霉菌污染后,霉菌毒素可引起畜禽中毒致死,或使畜禽的免疫機(jī)能下降,長(zhǎng)期處于亞健康狀態(tài),降低生產(chǎn)性能,使畜禽免疫失敗和頻頻發(fā)病,同時(shí),通過(guò)肉、蛋、奶等食物鏈給人類健康帶來(lái)危害。
霉菌毒素可以污染飼料,所以,飼料的日常管理十分重要,目測(cè)檢驗(yàn)飼料霉變是檢測(cè)霉菌毒素的重要方法之一。另外,實(shí)驗(yàn)檢測(cè)霉菌毒素的方法主要包括酶聯(lián)免疫吸附法、光譜法、高效液相色譜法及色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等方法。
1.1 目測(cè)法
在飼養(yǎng)畜禽實(shí)踐中,如果出現(xiàn)拒食,飼料和谷物發(fā)熱,有輕度異味,色澤變暗,飼料結(jié)塊等跡象時(shí)應(yīng)考慮飼料可能霉變。菌絲體可與飼料縱橫交織,形成菌絲蛛網(wǎng)狀物,這些結(jié)構(gòu)使得飼料結(jié)塊。在我們?nèi)庋鬯軌蛴^察到這些菌絲網(wǎng)狀物以前,菌絲體已經(jīng)在大范圍內(nèi)生長(zhǎng)繁殖,這就表明已經(jīng)存在霉菌毒素。因此,飼料結(jié)塊是診斷飼料霉變的最簡(jiǎn)易實(shí)用的方法之一。
1.2 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)
ELISA 法是利用抗原抗體反應(yīng)原理,將已知抗原吸附在酶標(biāo)板上,加入酶標(biāo)記抗體和樣品提取液并混合均勻,充分反應(yīng)后用去離子水洗去多余抗體,再加入酶的底物,產(chǎn)生有色物質(zhì),最后加入終止液使反應(yīng)終止,用酶標(biāo)儀測(cè)定酶底物的降解量,參照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算試樣中的抗原量。如,黃曲霉毒素B1,煙曲霉毒素的檢測(cè)。ELISA 法一般對(duì)樣品作凈化處理,操作簡(jiǎn)單,檢測(cè)速度快,成本低,適用于大批量樣品的快速篩選。
1.3 氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法
這項(xiàng)技術(shù)從20 世紀(jì)70 年代開始用于霉菌毒素的檢測(cè)。例如T-2 毒素等單端孢霉烯族毒素,由于其羥基洐生化處理之后有良好的揮發(fā)性,常采用氣相色譜法檢測(cè),例如檢測(cè)谷物中的玉米赤霉烯酮和單端孢霉烯族毒素等。氣質(zhì)聯(lián)用法能對(duì)霉菌毒素做準(zhǔn)確的定性分析,并且靈敏度也有比較大的提高,檢測(cè)限更低。
2.1 降低飼料的營(yíng)養(yǎng)及適口性
飼料產(chǎn)生霉菌毒素后營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量大大降低,并散發(fā)一股難聞的霉味,飼料中的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素發(fā)生質(zhì)變。飼料霉菌的生長(zhǎng)會(huì)發(fā)出難聞的氣味,從而使飼料的適口性變差。
2.2 引起畜禽免疫抑制
霉菌毒素對(duì)畜禽的核心危害是對(duì)免疫系統(tǒng)的破壞及對(duì)免疫應(yīng)答的強(qiáng)烈抑制,可表現(xiàn)為降低T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的活性,抑制免疫球蛋白和抗體的產(chǎn)生,降低補(bǔ)體和干擾素的活性,損害抗原呈遞細(xì)胞或噬菌細(xì)胞的功能。
在所有的霉菌毒素當(dāng)中,黃曲霉毒素可高強(qiáng)度抑制動(dòng)物免疫系統(tǒng)。黃曲霉毒素對(duì)畜禽的毒性取決于攝入毒素的數(shù)量,飼料中含有相當(dāng)數(shù)量的黃曲霉毒素時(shí),食入這類飼料的畜禽才會(huì)出現(xiàn)臨床癥狀。畜禽長(zhǎng)期少量攝入黃曲霉毒素,雖不會(huì)出現(xiàn)明顯的中毒癥狀,但毒素能損害畜禽的免疫機(jī)能,引起畜禽抵抗力下降,引發(fā)繼發(fā)性傳染病。
2.3 影響畜禽生殖功能和生長(zhǎng)發(fā)育
黃曲霉毒素中毒會(huì)引起母豬流產(chǎn),產(chǎn)弱仔、死胎、木乃伊胎及產(chǎn)仔數(shù)減少;母豬的卵巢畸形,子宮黏膜對(duì)雌激素感受性受到抑制;導(dǎo)致母畜發(fā)情周期延長(zhǎng)、繁殖力下降及公畜睪丸萎縮、雌性化。黃曲霉毒素可降低某些胰腺酶的活性,抑制酶及其他激素的合成,導(dǎo)致吸收和代謝障礙。有些霉菌毒素甚至有致癌作用。
(1)保持環(huán)境、用具、飼料、墊料清潔、干燥,防止飼草、飼料發(fā)霉。
(2)飼料貯存溫度應(yīng)低于25℃,相對(duì)濕度應(yīng)保持在85%以下。防止飼料發(fā)熱、受潮。定期檢查飼料,霉變者及時(shí)挑除,防止霉菌擴(kuò)散。
(3)添加高于NRC 標(biāo)準(zhǔn)30%~40%的蛋氨酸,以降低毒性,提高維生素及硒的添加量。
(4)飼料防霉可采用氣體法、固體防霉劑法和電離輻射法。常用防霉劑有丙酸鈉、丙酸鈣,每1 000 kg 飼料中添加1~2 kg。
(5)去毒法。飼料受黃曲霉污染后,可用化學(xué)方法、水沖法、物理吸附法和微生物去毒法去毒。流水沖洗法把飼料盛入容器內(nèi),以流水沖洗,直至沖洗用水無(wú)色。吸附脫毒法使用霉菌毒素吸附劑減少霉菌毒素對(duì)畜禽的危害。可用霉可吸,在1 000 kg飼料添加1 kg 即可吸附80%以上的霉菌毒素。
(6)定期監(jiān)測(cè)。嚴(yán)防飼料霉菌。
霉菌毒素是霉菌次級(jí)代謝產(chǎn)物,屬于化學(xué)污染物,對(duì)人和動(dòng)物都會(huì)產(chǎn)生非常嚴(yán)重的危害。拿黃曲霉毒素來(lái)說(shuō),含有黃曲霉毒素的食品被人誤食后容易出現(xiàn)肝臟病變,甚至導(dǎo)致肝癌,因此,霉菌毒素檢測(cè)是非常迫切需要解決的問(wèn)題??梢哉f(shuō),越早進(jìn)行霉菌毒素檢測(cè)就越容易將霉菌毒素產(chǎn)生的危害降到最低。如果在飼料原料采購(gòu)環(huán)節(jié)就采用快速篩選的方法,查看飼料原料是否含有霉菌毒素,則可以使企業(yè)避免使用含霉菌毒素的原料生產(chǎn)飼料,或者在原料緊缺又必須生產(chǎn)的情況下,可以針對(duì)檢測(cè)結(jié)果采取有效的霉菌毒素處理技術(shù),全面降低霉菌毒素的毒害性。所以,研制對(duì)霉菌毒素快速、高靈敏、高特異性的檢測(cè)方法顯得尤為重要。
霉菌毒素造成的危害如此之大,這就要求我們平時(shí)要時(shí)常防止飼料霉變的產(chǎn)生,特別是要求飼料管理員在管理飼料過(guò)程中要有較高的責(zé)任心和科學(xué)素質(zhì),熟悉防止飼料霉變的常規(guī)方法,一旦發(fā)生異常要及時(shí)報(bào)告處理,使霉菌毒素的危害降到最低。
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