劉　丹，武　燁，劉　鑫，劉慧榮△(首都醫(yī)科大學(xué)，北京00069)

小鼠Omi/HtrA2基因啟動(dòng)子螢光素酶報(bào)告載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)錄活性分析*

劉丹1，武燁1，劉鑫1，劉慧榮1△
(首都醫(yī)科大學(xué)，北京100069)

目的:通過(guò)構(gòu)建小鼠Omi/HtrA2基因啟動(dòng)子螢光素酶報(bào)告載體并進(jìn)行轉(zhuǎn)錄活性分析，深入研究小鼠Omi/HtrA2轉(zhuǎn)錄調(diào)控發(fā)生的機(jī)制。方法:本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建覆蓋小鼠Omi/HtrA2基因5’側(cè)翼區(qū)(－1 205 bp～+93 bp)區(qū)域的一系列啟動(dòng)子螢光素酶報(bào)告基因載體，將其轉(zhuǎn)染至小鼠成纖維細(xì)胞NIH3T3、大鼠心肌細(xì)胞H9c2和人胚腎細(xì)胞HEK293，并進(jìn)行螢光素酶活性檢測(cè)。結(jié)果:小鼠Omi/HtrA2啟動(dòng)子在－1 205 bp～－838 bp和－146 bp～+93 bp區(qū)域活性最高，生物信息學(xué)分析這些啟動(dòng)子區(qū)域可能存在HSF1、SP1、AP、p53等轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。結(jié)論:初步證實(shí)－1 205 bp～－838 bp和－146 bp～+93 bp區(qū)域?yàn)镃FL2啟動(dòng)子的活性區(qū)域。

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81270283)

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