張新新,梁晉如,趙文娜,郝群峰,孫文基，王 燕

(1.西北大學 陜西省生物醫(yī)藥重點實驗室, 陜西 西安 710069;2.陜西生物科技有限公司,陜西 西安 710061)

?

·生命科學·

氣相色譜法測定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量

張新新1,梁晉如1,趙文娜1,郝群峰2,孫文基1，王 燕1

(1.西北大學 陜西省生物醫(yī)藥重點實驗室, 陜西 西安 710069;2.陜西生物科技有限公司,陜西 西安 710061)

建立氣相色譜法測定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量。 采用SE-30毛細管柱(30 m×0.32 mm, 0.25 μm);載氣:N2;FID檢測器;檢測器溫度240℃,進樣口溫度220℃,分流比10∶1,程序升溫。采用氣相色譜法測定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量,桂皮醛在0.070～0.242 mg·mL-1范圍內(nèi),呈良好的線性關(guān)系(R2=0.999 1),平均回收率為98.93%;丁香酚在0.230～0.761 mg·mL-1范圍內(nèi),呈良好的線性關(guān)系(R2=0.999 6),平均回收率為99.58%。所建立的氣相色譜法,方便易行,重復性好,可以對瑞克衛(wèi)瑞消毒液桂皮醛和丁香酚的含量進行測定。

氣相色譜;瑞克衛(wèi)瑞消毒液;桂皮醛;丁香酚;含量測定

瑞克衛(wèi)瑞消毒液(陜衛(wèi)消證字(2010)第0062號)由肉桂、丁香、花椒、苦參和辛夷等中草藥精制而成,是由純中草藥制作而成的消毒液,主要用于物體及玩具表面的清潔,具有很強的殺菌作用。它含有桂皮醛和丁香酚,桂皮醛具有明顯的抗菌、消炎作用[1-3],丁香酚具有驅(qū)蟲及抗菌作用[4-6],為消毒液的主要活性成分。兩種成分具有揮發(fā)性,適合GC法分析,所以本文建立GC法同時測定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛[7-10]和丁香酚[11-16]的含量,并對方法學進行考察。以期為其質(zhì)量控制提供一種簡便易行的測定方法。

1 儀器與試劑

G-3900日立氣相色譜儀,氫火焰離子化檢測器,Anastar 色譜工作站。SPH-200氫氣發(fā)生器和SPB-3全自動空氣源。瑞克衛(wèi)瑞消毒液由陜西生物科技有限公司提供;桂皮醛(批號:20101025)對照品上海雙香助劑廠提供,丁香酚對照品由上海飛樣化工廠提供,無水乙醇為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

SE-30毛細管柱(30 m×0.32 mm, 0.25 μm);程序升溫:起始柱溫80℃,保留時間2 min,以20℃/min的速率升到150℃保留4 min,以10℃/min的速率升到170℃,最后以30℃/min的速率升到230℃保留8 min;載氣:氮氣;檢測器:FID;分流比10∶1;檢測器溫度:240℃;進樣口溫度:220℃。在此條件下,桂皮醛和丁香酚色譜峰完全分離,并且他們兩者之間也呈良好的分離。理論塔板數(shù)按桂皮醛峰和丁香酚峰計算應不低于10 000,見圖1。

圖1 氣相色譜圖Fig.1 GC chromatograms

2.2 對照品溶液的配制

2.2.1 桂皮醛溶液的配制 用200 μL移液槍精密吸取密度為1.05 g·mL-1的桂皮醛對照品溶液10 μL,加入到100 mL量瓶中,加無水乙醇溶解定容至刻度,配成濃度為0.105 mg·mL-1的溶液。

2.2.2 丁香酚溶液的配制 用200 μL移液槍精密吸取密度為1.067 g·mL-1的丁香酚對照品溶液10 μL,加入到25 mL量瓶中,加無水乙醇溶解定容至刻度,配成濃度為0.42 mg·mL-1的溶液。

2.3 供試品溶液的配制

用1 000 μL移液槍精密吸取500 μL瑞克衛(wèi)瑞消毒液,加入到10 mL量瓶中,用無水乙醇溶解定容至刻度,搖勻,即得。

2.4 系統(tǒng)適用性實驗

2.4.1 線性關(guān)系考察

1)桂皮醛線性關(guān)系 分別精密吸取1 μL濃度為0.084 mg·mL-1，0.105 mg·mL-1，0.126 mg·mL-1，0.157 mg·mL-1和0.210 mg·mL-1的桂皮醛對照品溶液進入氣相色譜儀,按“2.1”項下色譜條件進行測定,以桂皮醛濃度為橫坐標和桂皮醛吸收峰面積為縱坐標進行線性回歸得到方程:Y=1 472X-441.5 (R2=0.999 1)。結(jié)果表明桂皮醛在0.070～0.242 mg·mL-1范圍內(nèi)關(guān)系良好。

2)丁香酚線性關(guān)系 分別精密吸取1 μL濃度為0.242 mg·mL-1，0.336 mg·mL-1，0.420 mg·mL-1，0.504 mg·mL-1和0.630 mg·mL-1的丁香酚對照品溶液進入氣相色譜儀,按“2.1” 項下色譜條件進行測定,以丁香酚濃度為橫坐標和丁香酚吸收峰面積為縱坐標進行線性回歸得到方程:Y=4 313X+112.1 (R2=0.999 6)。結(jié)果表明丁香酚在0.230～0.761 mg·mL-1范圍內(nèi)關(guān)系良好。

2.4.2 精密度試驗 精密吸取瑞克衛(wèi)瑞消毒液(批號:1103037)供試品溶液1μL,連續(xù)進樣6次,測定桂皮醛峰面積分別為383，393，407，409，412和414,丁香酚峰面積分別為3 003，3 073，3 108，3 127，3 153和3 176。結(jié)果表明，桂皮醛含量的RSD(n=6)值為3.05%,丁香酚含量的RSD(n=6)值為1.20%,說明儀器精密性良好。

2.4.3 重復性試驗 取瑞克衛(wèi)瑞消毒液(批號:1103036)按照“2.3”配制供試品溶液方法制備6份溶液,按“2.1”項下條件,進樣1 μL測定峰面積。結(jié)果表明，桂皮醛含量平均值為0.79 mg·mL-1,RSD(n=6)為2.20%,丁香酚含量平均值為6.67 mg·mL-1,RSD(n=6)為3.67%。說明氣相色譜法重復性良好。

2.4.4 穩(wěn)定性試驗 取瑞克衛(wèi)瑞消毒液(批號:1103038)按照“2.3”項下方法制備供試品溶液,然后分別在0, 2, 6, 10, 16h進樣1 μL。按照“2.1”色譜條件進行峰面積測定。結(jié)果表明，桂皮醛含量平均值是0.92 mg·mL-1,RSD為2.3%,丁香酚含量平均值為7.15 mg·mL-1,RSD為2.2%,表明樣品在16 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.5 回收率試驗 精密量取已知含量的6份瑞克衛(wèi)瑞消毒液樣品(批號:1103036)各5 mL,置100 mL量瓶中,再分別精密加入密度為1.05 g·mL-1的桂皮醛對照品溶液4 μL和密度為1.067 g·mL-1的丁香酚對照品溶液30 μL。按照“2.3”項下方法制備供試品溶液,按“2.1”項下條件進樣1 μL,計算樣品加樣回收率。結(jié)果表明，桂皮醛平均加樣回收率是98.93%,RSD(n=6)為3.28%,丁香酚平均回收率為99.58%,RSD(n=6)為2.58%。結(jié)果如表1和表2所示。

表1 桂皮醛加樣回收率試驗Tab.1 The results of cinnamaldehyde recovery

表2 丁香酚加樣回收率試驗Tab.2 The results of eugenol recovery

2.5 實驗結(jié)果

分別取3批樣品按照“2.3”項下方法制備供試品溶液，平行試驗兩份。按照“2.1”項下的色譜條件，測定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量，結(jié)果見表3。

表3 瑞克衛(wèi)瑞消毒液桂皮醛和丁香酚含量測定結(jié)果(n=2)Tab.3 The content of cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid

3 討 論

3.1 進樣方式的選擇

桂皮醛和丁香酚為揮發(fā)油中的主要成分。采用頂空進樣方法測定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量時,發(fā)現(xiàn)桂皮醛和丁香酚不能夠全部從溶液中蒸發(fā)出來。但是，溶液中一些容易揮發(fā)的成分被蒸出來,影響桂皮醛和丁香酚的含量測定,使測定結(jié)果不準確,因此進樣方式采用直接進樣。

3.2 柱子的選擇

用PEG-20M毛細管色譜柱能夠使桂皮醛和丁香酚呈現(xiàn)良好的分離效果,其中桂皮醛出峰時間為14.767 min左右,丁香酚出峰時間為16.283 min左右。但是,程序升溫的過程很長,完成一次進樣測定大約需要40 min的時間。而選用SE-30毛細管色譜柱,桂皮醛和丁香酚的出峰時間分別為8.492 min左右和10.200 min左右,桂皮醛和丁香酚呈現(xiàn)較好的分離效果。用此毛細管色譜柱進行含量測定,完成一次進樣大約需要20 min的時間,程序縮短到原來的一半,在很大的程度上節(jié)約了時間。

3.3 時間的選擇

用SE-30毛細管色譜柱摸索條件的時候發(fā)現(xiàn),80℃保留2 min,150℃保留4 min,170℃不保留,230℃保留8 min,是比較理想的程序升溫條件。一方面程序升溫的時間較短;另一方面在230℃時保留的時間不宜過短也不宜過長。如果過短,使得每次留在柱子上的雜質(zhì)過多,影響柱子的壽命。如果過長,會使程序升溫的時間過長。通過對比發(fā)現(xiàn)，8 min的時間比較理想。

采用此方法對陜西生物科技有限公司的瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量進行測定,結(jié)果簡便可行,重復性也較好。

[1] 曾利杰,王巖,彭紅英.GC法測定一種治療關(guān)節(jié)炎成方制劑的SEF-CO2提取物桂皮醛含量[J].海峽藥學,2008,20(6):81-82.

[2] 陸頌規(guī),王巖,彭紅英.不同產(chǎn)地桂枝中桂皮醛的GC含量測定[J]. 中藥材,2007,30(2):174-175.

[3] 許利平,張強,沈映君.桂枝揮發(fā)油中桂皮醛的氣象色譜定量分析[J].北京中醫(yī)藥大學學報,2006,29(3):193-195.

[4] 欽浩,嚴麗麗,江培.木樨科丁香葉中丁香酚含量測定[J].黑龍江醫(yī)藥,2007,20(1):2-2.

[5] 周茂君,楊長曉,付松.氣相色譜-質(zhì)譜法檢測保健品軟膠囊中檸檬烯和丁香酚[J].預防醫(yī)學情報雜志,2010,26(9):763-765.

[6] 王喆桅,金城,焦懿.氣相色譜法測定行軍散中丁香酚的含量[J].解放軍藥學學報,2010,26(2):137-138.

[7] 杜慶鵬,田金改,石上梅. GC法測定進口肉桂中桂皮醛的含量[J].中國藥事,2002,16(1):37-38.

[8] 徐艷春,魏璐雪,王亞麗.氣相色譜法測定黃連配伍肉桂前后桂皮醛的含量[J].藥物分析雜志,2002,22(1):11-14.

[9] 張華林,李宗悟,楊學斌.氣相色譜法測定通立康膏中樟腦、異龍腦、龍腦、桂皮醛、丁香酚的含量[J].中藥新藥與臨床藥理,2005,16(1):61-63.

[10] 黃家宇,李莉,萬先倫.氣相色譜法測定小建中膠囊中桂皮醛的含量[J].貴陽醫(yī)學院學報,2005,30(6):529-530.

[11] 林生文,李逸,朱炳輝. GC法測定丁蔻理中丸中丁香酚的含量[J].中國藥品標準,2003,4(5):38-40.

[12] 曾惠芳,黃耀海,李湘力.百草油中薄荷腦、肉桂醛、丁香酚的含量測定[J].中成藥,2007,29(4):558-560.

[13] 刑俊波,曹紅,陳玉敏.氣相色譜法測定更年舒注射液中丁香酚含量[J].藥物鑒定,2009,18(21):35.

[14] 周羽琪,章建民,張紅.氣象色譜法測定經(jīng)不痛巴布膏中丁香酚的含量[J].中成藥,2002,24(5):347-349.

[15] 董小平,伍乃英,葉崇義.氣象色譜法測定洛通噴霧劑中丁香酚的含量[J].中國藥品標準,2003,4(1):55-56.

[16] 郭素華,潘馨,林元桐.氣相色譜法測定小兒健胃靈中丁香酚的含量[J].中國藥學雜志,2000,35(5):344-345.

(編 輯徐象平)

Determination of cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid by GC method

ZHANG Xin-xin1, LIANG Jin-ru1, ZHAO Wen-na1, HAO Qun-feng2，SUN Wen-ji1, WANG Yan1

(1.Biomedicine Key Laboratory of Shaanxi Province, Northwest University, Xi′an 710069, China; 2.Shaanxi Biological Technology Co.Ltd, Xi′an 710061, China)

Establishing GC method to determine cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid. SE-30(30 m×0.32 mm, 0.25 μm) capillary column was used with nitrogen as carrier gas and FID as detector.The column temperature rise programming with split ratio of 10∶1.The detector temperature was 240℃ and the sample injection temperature was 220℃. The linear range of the content of cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid by GC method was 0.070～0.242 mg·mL-1(R2=0.999 1) and 0.230～0.661 mg·mL-1(R2=0.999 6), respectively,which showed good linearity, and the average recovery was 98.93% and 99.58%, respectively. The methods is convenient, reliable and reproducible so that it can be used to determine cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid.

GC; Ruikeweirui disinfectant fluid; cinnamaldehyde; eugenol; content determination

2014-04-11

教育部高等學校博士學科點專項科研基金資助項目(20126202230026)

張新新，男，內(nèi)蒙古赤峰人，從事天然產(chǎn)物提取與分離研究。

王燕，女，寧夏固原人，工程師，從事藥物分析(儀器)研究。

R284.1

：ADOI：10.16152/j.cnki.xdxbzr.2015-02-017