楊樹東 王輝 王樂奇 張默涵

護(hù)肝片中鉛、鎘含量測定

楊樹東 王輝 王樂奇 張默涵

目的對護(hù)肝片的鉛(Pb)、鎘(Cd)含量進(jìn)行考察。方法采用微波消解——石墨爐原子吸收光譜法相結(jié)合進(jìn)行含量測定。結(jié)果加樣回收率為94.81％～100.47％, 標(biāo)準(zhǔn)曲線R值分別為0.9978和0.9971, 精密度分別為2.0％和2.5％。Pb含量為72.77～931.8 ng/g。Cd含量為未檢出～20.77 ng/g。結(jié)論不同生產(chǎn)廠家的護(hù)肝片中Pb、Cd含量差距較大。本檢測方法簡單、快速、靈敏, 可作為護(hù)肝片中重金屬元素的測定一種可靠方法。

護(hù)肝片；原子吸收光譜；鉛；鎘

護(hù)肝片由柴胡、茵陳、板藍(lán)根、五味子、豬膽粉、綠豆6種中藥組成, 主要功能是疏肝理氣、健脾消食, 具有降低轉(zhuǎn)氨酶作用, 用于慢性肝炎及早期肝硬化。購買者較多。中國藥典2010版(一部)的收載品種,但相關(guān)檢驗中未規(guī)定其重金屬的限度［1］。

Pb和Cd是對人體有害的元素, Pb使得免疫系統(tǒng)障礙并引起神經(jīng)、內(nèi)分泌、肝、腎功能受損, 甚至引起腫瘤［2］, Cd對神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的毒性, 即使當(dāng)Cd含量較低時也可造成不同程度的損傷［3］。同時, Pb和Cd在人體內(nèi)又可以富集,近年來有關(guān)Pb中毒的臨床報道屢見不鮮［4-6］。該藥目前生產(chǎn)廠家較多, 因此對其進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控顯得非常重要。本研究對不同產(chǎn)地的11批護(hù)肝片進(jìn)行Pb、Cd測定, 考察其含量,旨在建立護(hù)肝片中Pb、Cd含量的測定方法及對研究護(hù)肝片質(zhì)量控制與安全性評價標(biāo)準(zhǔn)等提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 ①儀器：MARS微波消解儀(CEM儀器公司)、AA-7000原子吸收分光光度計(島津儀器公司)、電子天平(A&D compony)。②試劑與試藥：Pb標(biāo)準(zhǔn)品(中國計量科學(xué)研究院, 中國標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW08619)；Cd標(biāo)準(zhǔn)品(中國計量科學(xué)研究院, 中國標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW08612)；硝酸(J.T.Baker公司)；水(純化水)。

1.2 樣品 樣品來源、藥品名稱、生產(chǎn)廠家和批號, 見表1。

表1 樣品名稱、生產(chǎn)廠家和批號

1.3 方法

1.3.1 對照品制備

1.3.1.1 Pb標(biāo)準(zhǔn)液制備 ①Pb標(biāo)準(zhǔn)儲備液的制備：精密量取Pb單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量, 用2％硝酸溶液稀釋, 制成每毫升含Pb1 μg的溶液, 即得(0～5℃貯存)。②標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密量取Pb標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量, 用2％硝酸溶液制成每毫升分別含Pb 0、5 、10 、15 、20 、30 ng的溶液。

1.3.1.2 Cd標(biāo)準(zhǔn)液制備 ①Cd標(biāo)準(zhǔn)儲備液的制備：精密量取Cd單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量, 用2％硝酸溶液稀釋, 制成每毫升含Cd 0.4 μg的溶液, 即得(0～5℃貯存)。②標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密量取Cd標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量, 用2％硝酸溶液制成每1毫升分別含Pb 0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 ng的溶液。

1.3.2 樣品處理 取上述11批樣品, 分別研細(xì), 混合均勻后, 精密稱取約0.5 g加入10 ml硝酸, 浸泡過夜, 后放入微波消解儀消化(條件：5 min, 室溫20～120℃, 保持5 min；5 min,120～150℃, 保持20 min；取出放置室溫后重新放入微波消解儀中；5 min, 室溫20～120℃, 保持5 min；5 min,120～150℃, 保持20 min；5 min,150～170℃, 保持20 min), 消解完全后, 取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡, 并繼續(xù)緩緩濃縮至1～2 ml, 放冷, 用純化水定容置25 ml容量瓶中定容。同法同時制備試劑空白溶液。

1.3.3 加樣回收率 取2號樣品, 研碎, 混合均勻后, 取6份, 精密稱取約0.5 g樣品, 加入Cd25 ng, Pb270 ng 后加入10 ml硝酸浸泡過夜, 后放入微波消解儀消化(條件：同樣品處理條件), 消解完全后, 取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡, 并繼續(xù)緩緩濃縮至1～2 ml, 放冷, 用純化水定容置25 ml容量瓶中定容。

1.3.4 測定方法 ①Pb條件：波長283.3 nm, 干燥溫度120℃, 持續(xù)20 s, 灰化溫度700℃, 持續(xù)25 s；原子化溫度2000℃, 持續(xù)5 s, 背景校正為氘燈。精密吸取20 μl注入石墨爐原子化器, 測定吸光度, 以吸光度為縱光標(biāo), 濃度為橫坐標(biāo), 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。②Cd條件：波長228.8 nm, 干燥溫度120℃, 持續(xù)20 s, 灰化溫度400℃, 持續(xù)25 s；原子化溫度1500℃, 持續(xù)5 s, 背景校正為氘燈。精密吸取10 μl注入石墨爐原子化器, 測定吸光度, 以吸光度為縱光標(biāo), 濃度為橫坐標(biāo), 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4 方法學(xué)考察標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：①Pb標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程：Abs=0.011948Conc+0.020197 (r=0.9978), 0～30 ng/ml線性關(guān)系良好。②Cd標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程：Abs=0.26975Conc+0.031169 (r=0.9971), 0～3 ng/ml線性關(guān)系良好。

2 結(jié)果

2.1 最低檢出限 平行制備11 批試劑空白, 按選定的儀器條件, 測定了11 批試劑空白值, 其標(biāo)準(zhǔn)差的3倍除以工作曲線的斜率, 所對應(yīng)的樣品濃度為檢出限。Pb、Cd2種元素的檢出限分別為3.163ng/ml、0.036 ng/ml。

2.2 精密度 精密度試驗取Pb、Cd, 標(biāo)準(zhǔn)溶液在已設(shè)定的儀器條件下測定含量, 重復(fù)7次, RSD分別為2.0％、2.5％,結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.3 加樣回收率 結(jié)果表明樣品的Pb和Cd回收率回收效果較好, 見表1。

2.4 樣品含量11批樣品中Pb和Cd的含量測定結(jié)果, 見表2。

表1 Pb、Cd回收率(n, ％)

表2 樣品的含量(n, ng/g)

3 討論

3.1 本試驗采用微波消解儀法和原子吸收分光光度計法測定護(hù)肝片中Pb和Cd的含量, 結(jié)果方法簡便, 準(zhǔn)確性高, 回收率在規(guī)定范圍內(nèi)。

3.2 以據(jù)藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)［7］, 重金屬及砷鹽限量指標(biāo)：Pb≤5.0mg/kg、Cd≤0.3 mg/kg, 對照測得結(jié)果,11批樣品中, Pb、Cd含量均未超標(biāo)。

3.3 重金屬對人體的新陳代謝及正常的生理作用具有明顯的傷害作用, 并抑制人正常生理作用的發(fā)揮, 同時人體內(nèi)重金屬含量過量會導(dǎo)致各種疾病的發(fā)生。中醫(yī)對一些慢性病和疑難雜癥習(xí)慣用中成藥治療, 服藥時間較長, 易造成慢性Pb中毒［8］。2010版藥典對護(hù)肝片中的重金屬含量未有規(guī)定, 對11批樣品的考察發(fā)現(xiàn), Cd含量7批樣品中的低于檢出限, 另外4批差距較大, Pb含量為72.77～931.8 ng/g。護(hù)肝片由于生產(chǎn)廠家在原材料選擇、制劑生產(chǎn)中的污染, 生產(chǎn)管理, 工藝處理不同, 重金屬含量差距較大, 為防止藥源性重金屬中毒,進(jìn)一步提高中成藥質(zhì)量。中成藥重金屬的含量測定更為重要。

3.4 通過調(diào)查研究不同廠家的護(hù)肝片, 為今后制定護(hù)肝片中重金屬的標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù), 同是提供一種重金屬檢測的可靠方法。

［1］國家藥典委員會. 中國藥典(一部). 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:760.

［2］劉毅, 邱昌貴. 中藥中重金屬研究綜述. 微量元素與健康研究,2008,25(4):56-58.

［3］劉偉成, 李明云. Cd毒性毒理學(xué)研究進(jìn)展. 廣東微量元素科學(xué),2005,12(12):1-5.

［4］Anderson N R, Gama R, Kapadia S. Herbal remedy poisoning presenting with acute abdomen and raised urine porphyrins. Ann Clin-Biochem,2001,38(Pt4):408-410.

［5］康明, 高天超, 聶穎.服用中藥制劑引發(fā)Pb中毒2 例報告. 中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2010,23(1):32-33.

［6］陳建忠, 梁順華, 吳奇峰. 中藥偏方致Pb中毒9 例臨床分析.中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2005,18(4):213-214.

［7］楊鑫延, 楊世林, ?；萆? 等. 實施《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》推動綠色植物中藥的國際貿(mào)易. 中藥研究與信息,2001,3(8):11-12.

［8］張靜, 陳金素, 周瓊. 中成藥含Pb量控制方法探討. 時珍國醫(yī)國藥,2000,11(9):792.

Content determination of lead and cadmium in Hugan tablets

YANG Shu-dong, WANG Hui, WANG Yueqi, et al. Changchun City Food and Drug Inspection, Changchun130012, China

ObjectiveTo inspect the content of lead (Pb) and cadmium (Cd) in Hugan tablets.MethodsThe content determination was performed by joint method of microwave digestion-graphite oven atomic absorption spectrum.ResultsThe sample recovery rate was94.81％～100.47％. The standard curve R were respectively 0.9978 and 0.9971, and degrees of precision were2.0％ and2.5％. Pb content was72.77～931.8 ng/g. Cd content was non-detected～20.77ng/g.ConclusionThere are large differences between the content of Pb and Cd in different Hugan tablets from various manufacturers. This detection method is easy, fast, and sensitive. It can be applied as the reliable method for determination of heavy metal element in Hugan tablets.

Hugan tablets; Atomic absorption spectrum; Lead; Cadmium

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.05.196

2014-12-03］

130012 長春市食品藥品檢驗所(楊樹東 王輝張默涵)；長春師范大學(xué)中心實驗室 (王樂奇)