對(duì)苯醌與異煙肼的荷移反應(yīng)及其應(yīng)用研究*

尚永輝，孫家娟，古元梓

（咸陽師范學(xué)院化學(xué)與化工學(xué)院，陜西咸陽712000）

異煙肼（化學(xué)名稱：4-吡啶甲酰肼）是一種日常生活中常見的抗菌藥物，它的殺菌（例如分枝桿菌）作用較強(qiáng)，特別是對(duì)結(jié)核桿菌有明顯地抑制及殺滅作用，是抗結(jié)核藥物的首選。此外，異煙肼對(duì)痢疾、麥粒腫、百日咳、情緒抑郁等癥狀也具有很好的療效[1，2]。

圖1 異煙肼結(jié)構(gòu)式Fig.1 Molecular structures of Isoniazid

當(dāng)前，測(cè)定異煙肼的主要方法有：高效液相色譜法[3，4]，近紅外光譜法[5]，流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法[6，7]以及電化學(xué)測(cè)定法[2,8，9]等。

本文在研究異煙肼與對(duì)苯醌荷移反應(yīng)的基礎(chǔ)上建立了荷移分光光度法測(cè)定異煙肼的光化學(xué)新方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

石英比色皿（宜興市晶科光學(xué)儀器有限公司）；玻璃比色管，移液管，溫度計(jì)，容量瓶，分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）；紫外分光光度計(jì)Specord 50（德國耶拿）。

1×10-3mol·L-1異煙肼標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.0137g 異煙肼粉末（中國藥品生物制品檢定所）于干燥的燒杯中，用蒸餾水溶解后轉(zhuǎn)移到100mL 容量瓶中，用水定容至刻度線。

0.15mol·L-1對(duì)苯醌-乙醇溶液：準(zhǔn)確稱取0.8106g對(duì)苯醌粉末（上海山浦化工有限公司）于干燥的燒杯中，用無水乙醇溶解后轉(zhuǎn)移到50mL 容量瓶中，用無水乙醇定容至刻度線，避光保存。

1.2 試驗(yàn)方法

分別取一定量的異煙肼于10mL 比色管中，加入一定量的0.15mol·L-1對(duì)苯醌儲(chǔ)備溶液，采用單因素輪換發(fā)考察時(shí)間、溫度、緩沖、pH 值、表面活性劑對(duì)絡(luò)合物形成的影響，測(cè)定200～800nm 間的吸收光譜并記錄絡(luò)合物最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度值。

2 結(jié)果與討論

2.1 荷移絡(luò)合物吸收光譜

在實(shí)驗(yàn)中，配制不同組分的溶液，在200～800nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，它的吸收曲線見圖2。

圖2 吸收光譜Fig.2 Absorbance spectra

異煙肼在263nm 波長(zhǎng)處有最大吸收，對(duì)苯醌的最大吸收峰為280nm，曲線3 與曲線1,2 相比，最大吸收波長(zhǎng)紅移，摩爾吸光系數(shù)增大，說明有新的物質(zhì)生成，即荷移絡(luò)合物，最大吸收峰為440nm。

2.2 荷移反應(yīng)條件探索

2.2.1 溶劑對(duì)荷移反應(yīng)的影響 準(zhǔn)確移取1×10-3mol·L-1異煙肼標(biāo)準(zhǔn)液1.5mL，分別加入0.15mL 0.15 mol·L-1對(duì)苯醌，分別以無水乙醇，丙酮，甲醇，水，甲醇∶水（V甲醇∶V水=1∶2），乙醇∶水（V乙醇∶V水=1∶2）作溶劑，定容至刻度線，以試劑空白為參比，用1cm 石英比色皿在200～800nm 范圍測(cè)其吸光度值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：異煙肼與對(duì)苯醌荷移反應(yīng)的最佳溶劑為無水乙醇，此條件下譜圖最佳，絡(luò)合物吸光度最大。

2.2.2 對(duì)苯醌用量對(duì)荷移反應(yīng)的影響 準(zhǔn)確移取1×10-3mol·L-1異煙肼標(biāo)準(zhǔn)液1.5mL，分別加入0.15mol·L-1對(duì)苯醌溶液0.05，0.1，0.2，0.25，0.3mL，用無水乙醇定容至刻度線，以試劑空白為參比，用1cm 石英比色皿在200～800nm 范圍測(cè)其吸光度值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：對(duì)苯醌與異煙肼荷移反應(yīng)的最佳用量為0.25mL（3.75×10-3mol·L-1），此時(shí)譜圖峰形最佳，絡(luò)合物吸光度最大，實(shí)驗(yàn)選擇0.25mL對(duì)苯醌進(jìn)行試驗(yàn)。

2.2.3 反應(yīng)溫度對(duì)荷移反應(yīng)的影響 準(zhǔn)確移取1×10-3mol·L-1異煙肼標(biāo)準(zhǔn)液1.5mL，加入0.15mL 0.15mol·L-1對(duì)苯醌儲(chǔ)備溶液，用無水乙醇定容至刻度線，分別在20、30、40、50、60℃下反應(yīng)30min，以試劑空白為參比,用1cm 石英比色皿在200～800nm范圍測(cè)其吸光度值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：溫度升高有利于絡(luò)合物的生成，對(duì)苯醌與異煙肼反應(yīng)的最佳溫度是60℃。

2.2.4 反應(yīng)時(shí)間對(duì)荷移反應(yīng)的影響 準(zhǔn)確移取1×10-3mol·L-1異煙肼標(biāo)準(zhǔn)液1.5mL，加入0.15mL 0.15 mol·L-1對(duì)苯醌儲(chǔ)備溶液，用無水乙醇定容至刻度線，每隔10min 測(cè)一次吸光度值，以試劑空白為參比，用1cm 石英比色皿在200～800nm 范圍測(cè)其吸光度值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：時(shí)間對(duì)反應(yīng)程度的影響不大，對(duì)苯醌與異煙肼反映的最佳時(shí)間是30min。

2.2.5 酸度對(duì)荷移反應(yīng)的影響 在選擇的最佳實(shí)驗(yàn)條件下分別加入0.1，0.5，0.8，1.0，1.5mL 的6mol·L-1HCl 和相同量的0.2mol·L-1NaOH，測(cè)定其對(duì)荷移絡(luò)合物最大吸收波長(zhǎng)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)：6mol·L-1HCl 1.5mL（pH 值為3.04），0.2mol·L-1（pH 值為9.48）NaOH 1.5mL 均對(duì)對(duì)苯醌與異煙肼的荷移絡(luò)合物最大吸收波長(zhǎng)產(chǎn)生增強(qiáng)的作用，實(shí)驗(yàn)選擇6mol·L-1（pH 值為3.04）HCl 1.5mL 作為最佳pH 條件。

2.3 異煙肼的測(cè)定研究

2.3.1 荷移絡(luò)合物吸光度與異煙肼的濃度關(guān)系 按照試驗(yàn)方法在實(shí)驗(yàn)探索的最佳實(shí)驗(yàn)條件下分別測(cè)定一系列異煙肼標(biāo)準(zhǔn)溶液與一定量對(duì)苯醌（4.5×10-3mol·L-1）混合溶液在440nm 處的吸光度值，建立工作曲線。

結(jié)果表明，在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，異煙肼濃度在4.115～109.72mg·L-1范圍內(nèi)與絡(luò)合物最大吸收波長(zhǎng)440nm 處的吸光度線性關(guān)系良好，線性方程為A=0.01368C（mg·L-1）+0.41084，回歸系數(shù)r=0.9979，檢出限為2.038mg·L-1。

2.3.2 樣品測(cè)定及加標(biāo)回收試驗(yàn) 取異煙肼片（山西云鵬制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H14020769，標(biāo)示量100mg/片）10 片，稱重，在研缽中充分研磨，準(zhǔn)確稱取取相當(dāng)于1 片異煙肼質(zhì)量用蒸餾水溶解后轉(zhuǎn)移到250mL 容量瓶中，定容，備用；取樣品溶液上層清液0.5mL 清液，依次加入0.15mol·L-1對(duì)苯醌溶液0.25mL，6mol·L-1HCl 溶液1.5mL，用無水乙醇稀釋至10mL 刻線，在水浴加熱至60℃反應(yīng)30min，測(cè)定體系440nm 處的吸光度值，代入工作曲線計(jì)算異煙肼片中異煙肼含量，4 次平行測(cè)定結(jié)果的平均值為96.75mg/片，測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.52%，樣品回收率在97.6%～105.7%。

3 結(jié)論

通過探索溶劑、溫度、反應(yīng)時(shí)間、酸度等條件對(duì)異煙肼與對(duì)苯醌荷移反應(yīng)的影響，建立了荷移光度法測(cè)定異煙肼的光化學(xué)新方法，方法應(yīng)用于異煙肼片中異煙肼的測(cè)定，結(jié)果滿意。

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