不同脂肪源餌料對(duì)日本沼蝦抗氧化機(jī)能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影響

趙衛(wèi)紅　於葉兵　王資生　呂富　呂林蘭

摘要：為研究幾種植物油（大豆磷酯、豆油、花生油、菜籽油和魚(yú)油對(duì)日本沼蝦抗氧化機(jī)能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影響，在基礎(chǔ)配合飼料中分別添加6%魚(yú)油、大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油，飼養(yǎng)雌性日本沼蝦（063～075 g40 d。結(jié)果表明，肌肉中超氧化物歧化酶（SOD活力除魚(yú)油組顯著低于菜籽油組外，其余各組之間差異不顯著；大豆磷脂組肝胰腺SOD活力顯著低于其他各組。大豆磷脂組和菜籽油組肌肉過(guò)氧化氫酶（CAT活力顯著高于魚(yú)油組、豆油組和花生油組，大豆磷脂組、豆油組和菜油組肝胰腺CAT活力顯著高于魚(yú)油組和花生油組。肝胰腺和卵巢均檢測(cè)到了飼料中未檢測(cè)到的 C20 ∶[G-3]2n-6，魚(yú)油組顯著低于其他各組。魚(yú)油組肝胰腺和卵巢EPA（C20 ∶[G-3]5n-3含量和n-3/n-6的值均顯著高于其他各組，n-6高不飽和脂肪酸（PUFA含量顯著低于其他各組；大豆磷脂組卵巢亞油酸（C18 ∶[G-3]2n-6含量顯著高于魚(yú)油組、花生油組和菜籽油組；豆油組肝胰腺n-6 PUFA含量顯著高于魚(yú)油組、花生油組和菜籽油組；花生油組卵巢DHA（C22 ∶[G-3]6n-3含量和n-3/n-6的值僅次于魚(yú)油組，且均高于其他各組；菜籽油組肝胰腺單不飽和脂肪酸含量顯著高于其他各組。綜上所述，豆油和菜籽油可以一定程度上代替魚(yú)油應(yīng)用于日本沼蝦飼料中。

關(guān)鍵詞：日本沼蝦；植物油；超氧化物歧化酶；過(guò)氧化氫酶；脂肪酸

中圖分類(lèi)號(hào)： S96612+2文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（201412-0266-06[HS][HT9SS]

收稿日期：2014-09-25

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（編號(hào)：31101887；江蘇省自然科學(xué)基金（編號(hào)：B2011419、B2012675；江蘇省企業(yè)博士聚集項(xiàng)目。

作者簡(jiǎn)介：趙衛(wèi)紅（1973—，女，江蘇東臺(tái)人，博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，從事水產(chǎn)動(dòng)物繁殖、營(yíng)養(yǎng)與免疫方面的教學(xué)與科研工作。Tel：（051588298190；E-mail：misszwh@163com。

日本沼蝦（Macrobrachium nipponense別稱(chēng)青蝦、河蝦，隸屬于節(jié)肢動(dòng)物門(mén)甲殼綱十足目游泳亞目長(zhǎng)臂蝦科沼蝦屬，廣泛分布于我國(guó)和東南亞地區(qū)，其肉味鮮嫩，營(yíng)養(yǎng)豐富，深受消費(fèi)者的青睞[1]，是我國(guó)重要的傳統(tǒng)淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)蝦類(lèi)之一。其養(yǎng)殖需要大量配合飼料，其中魚(yú)油作為優(yōu)質(zhì)脂肪源是必須添加的成分。魚(yú)油由于加工資源所限，全球魚(yú)油產(chǎn)量近10年來(lái)一直徘徊不前，而水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)對(duì)魚(yú)油的需求逐年提升，另一方面人們?cè)絹?lái)越關(guān)注魚(yú)油所帶來(lái)的益處，使得對(duì)于直接供人類(lèi)消費(fèi)的魚(yú)油需求增加，因此，魚(yú)油一直處于供不應(yīng)求的狀態(tài)，價(jià)格居高不下，成為制約水產(chǎn)養(yǎng)殖效益的瓶頸。尋找一種物美價(jià)廉、來(lái)源廣泛的脂肪源全部或部分代替魚(yú)油將是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的必然趨勢(shì)。植物油原料廣泛，產(chǎn)量逐年升高，菜籽油的年產(chǎn)量在近10年來(lái)增加了18倍[5]。而且植物油由于價(jià)格低廉，富含不飽和脂肪酸，成為水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要脂肪源[5]。植物油代替魚(yú)油已成功廣泛運(yùn)用于對(duì)脂類(lèi)利用能力較高的鮭鱒魚(yú)類(lèi)[6]。在蝦蟹類(lèi)養(yǎng)殖過(guò)程中也出現(xiàn)了采用亞麻籽油、豆油、菜籽油和花生油等植物油不同程度地取代魚(yú)油且在生長(zhǎng)和繁殖方面具有較好表現(xiàn)的報(bào)道。如亞麻籽油、加拿大菜籽油和豆油對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦（Penaeus monodon的促生長(zhǎng)作用顯著高于鱈魚(yú)肝油[7]。豆油對(duì)提高中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis產(chǎn)卵力的效果優(yōu)于魚(yú)油[8]。更多報(bào)道顯示魚(yú)油和植物油的混合作用更佳[9]。脂肪源的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值在很大程度上取決于脂肪酸的不飽和程度及各種脂肪酸的比例。一般認(rèn)為，富含n-6和n-3系列的高度不飽和脂肪酸（HUFA的海水魚(yú)油及其與植物油的混合油對(duì)蝦蟹類(lèi)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值要高于HUFA含量較低的動(dòng)物油和植物油[10]。有研究表明，植物油對(duì)蝦蟹類(lèi)促生長(zhǎng)作用與植物油中亞麻酸（LNA和亞油酸（C18 ∶[G-3]2n-6，LOA的含量有關(guān)，冷水性的日本對(duì)蝦（Marsupenaeus japonicus Bate[11]和中國(guó)對(duì)蝦（Penaeus chinensis[12]LNA的作用優(yōu)于LOA，而溫水性的斑節(jié)對(duì)蝦[13]和印度對(duì)蝦（Penaeus indicus[14]LOA的作用優(yōu)于LNA。

有關(guān)植物油在日本沼蝦中的作用還未見(jiàn)報(bào)道。肝胰腺是甲殼動(dòng)物脂肪吸收和儲(chǔ)存的重要器官，在甲殼動(dòng)物免疫、繁殖等生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[15-16]。本試驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)飼喂不同植物脂肪源一段時(shí)間后的日本沼蝦肝胰腺和卵巢中脂肪酸的含量，并結(jié)合其肌肉和肝胰腺中超氧化物歧化酶（SOD和過(guò)氧化氫酶（CAT活力，從免疫機(jī)能的角度篩選出適合日本沼蝦的替選脂肪源，為優(yōu)化飼料配方、降低飼料成本提供理論基礎(chǔ)。

1材料與方法

11試驗(yàn)蝦及其飼養(yǎng)

日本沼蝦購(gòu)江蘇省鹽城市海純路菜市場(chǎng)。試驗(yàn)前于水族箱中暫養(yǎng)7 d，暫養(yǎng)期間每天投喂2次（分別為08：00和14：00剪碎的蜆肉。選取附肢完整、活潑健康、大小一致（063～075 g的雌蝦540尾，隨機(jī)分成6組，每組分3個(gè)小組，每小組30尾，每個(gè)小組3個(gè)重復(fù)，分別放入15個(gè)玻璃水族箱（長(zhǎng)32 cm 、寬60 cm、高40 cm，水深20 cm內(nèi)，每天 08：00 和 14：00 投喂自制飼料，每次投飼率為蝦濕質(zhì)量的 2%～3%，根據(jù)攝食情況適當(dāng)調(diào)整投喂量。每天投餌2 h后吸取殘餌和糞便，養(yǎng)殖期間每天換水1/4。24 h充氧，溶氧量≥55 mg/L，加熱棒控溫，水溫（25±2 ℃。

12試驗(yàn)飼料

參照 SC/T 1066—2003《羅氏沼蝦配合飼料》水產(chǎn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及日本沼蝦營(yíng)養(yǎng)需求相關(guān)文獻(xiàn)[17-21]設(shè)計(jì)基礎(chǔ)飼料配方，以?xún)?yōu)質(zhì)進(jìn)口魚(yú)粉、豆粕和菜粕為主要蛋白源，分別以魚(yú)油、大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油為脂肪源，油脂添加水平為質(zhì)量的6%，配制5組試驗(yàn)飼料。飼料原料經(jīng)粉碎過(guò) 60目篩，混合均勻后加工成顆粒飼料，晾干并保存于冰箱中備用?；A(chǔ)飼料配方為30%魚(yú)粉、20%豆粕、10%菜粕、143%啤酒酵母、10%淀粉、02%膽固醇、1%明膠、13%磷酸二氫鈣料、2%食鹽、1%甜菜堿、4%復(fù)合維生素和礦物質(zhì)預(yù)混（預(yù)混料為1 kg飼糧提供維生素E 60 mg、維生素B1 15 mg、維生素B2 30 mg、維生素B6 15 mg、維生素B12 05 mg、維生素D3 3 000 IU、維生素 5 mg、維生素A 15 000 IU、生物素 25 mg、葉酸50 mg、泛酸鈣50 mg、煙酸75 mg、Cu 3 mg、Fe 25 mg、肌醇1 000 mg、Mn 15 mg、n 700 mg、I 06 mg。各試驗(yàn)組飼料脂肪酸組成見(jiàn)表1。endprint

[F（W26][HT6H][J]表1日本沼蝦飼料脂肪酸組成[HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W72，W212W]脂肪酸種類(lèi)[B（][BHDWG12，W212W]脂肪酸含量（%

[BHDWG12，W42。3，W4。2W]魚(yú)油大豆磷脂豆油花生油菜籽油[BW]

[BHDG4mm，W72，W42DW，W42YQ1，W42DW，W4。2DWW]C12 ∶[G-3]0099035019031026

[BHDW]C14 ∶[G-3]0417543472534585

C15 ∶[G-3]0014054033054047

C16 ∶[G-3]0 14222784229426982241

C17 ∶[G-3]0痕量034028029023

C18 ∶[G-3]0249734795827748

C20 ∶[G-3]01089075059271156

C22 ∶[G-3]0痕量062051353105

C24 ∶[G-3]0痕量031017159041

總飽和脂肪酸3294352376849563972

C14 ∶[G-3]n-3030008009005003

C16 ∶[G-3]n-9621861576859683

C18 ∶[G-3]n-914071668191012961155

C20 ∶[G-3]n-9367368389402778

C22 ∶[G-3]n-92677723863831282

C24 ∶[G-3]n-90200030041075

總單不飽和脂肪酸27123677330029863976

C16 ∶[G-3]3n-3071040064063063

C20 ∶[G-3]5n-31155740653548722

C22 ∶[G-3]6n-3518363251283322

∑n-3174411439688941107

C18 ∶[G-3]2n-63083701229356409

C20 ∶[G-3]4n-6167141142149138

∑n-64755111371505547

總多不飽和脂肪酸22191654233913991654

未知脂肪酸1779319593659398[HJ][BG）F][F）]

13取樣

飼養(yǎng)40 d，取樣前停食24 h，每組隨機(jī)挑選10尾蝦解剖，取其肌肉、肝胰腺和卵巢，置于-70 ℃超低溫冰箱中保存待測(cè)。

14SOD、CAT活力和總蛋白含量的測(cè)定

SOD、CAT的活力和總蛋白含量均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定。SOD活力單位定義：1 mg組織蛋白在1 mL反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的SOD量為1個(gè)SOD活力單位；CAT活力單位定義：1 mg組織蛋白1 s分解 1 mmol 的H2O2的量為1個(gè)活力單位。

按質(zhì)量體積比加生理鹽水制成10%的組織勻漿，3 000 r/min 離心10 min，然后取上清用生理鹽水稀釋?zhuān)∪饨M織按照1 ∶[G-3]9稀釋成1%組織勻漿液，肝胰腺組織按照 1 ∶[G-3]19 稀釋成05%組織勻漿液，用于測(cè)定SOD、CAT活力和總蛋白含量。

15脂肪酸含量的測(cè)定

脂肪酸含量的測(cè)定方法：參照文獻(xiàn)[22]提取各組樣品中的脂肪，[JP2]參照文獻(xiàn)[23]對(duì)其油脂進(jìn)行皂化及甲酯化；分別吸取1 μL脂肪酸甲酯樣品進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜分析，氣相色譜-質(zhì)譜儀為T(mén)hermo Quest Trace GC/MS，色譜柱采用30 m×025 mm×025 μm SUPELCO GC/MS毛細(xì)管柱，氣化室溫度與傳輸線(xiàn)溫度分別為250、280 ℃；程序升溫步驟為初溫 50 ℃，10 ℃/min升高至280 ℃，保持10 min。分流比為 10 ∶[G-3]1，進(jìn)樣量為1 μL；質(zhì)譜條件為EI電離源，信增器電壓為1 200 V，離子源溫度為230 ℃，四極桿溫度為150 ℃。全掃描（SCAN質(zhì)量為45～500 mau；將樣品質(zhì)譜圖與NIST標(biāo)準(zhǔn)圖庫(kù)質(zhì)譜圖進(jìn)行匹配，確認(rèn)樣品中的脂肪酸類(lèi)別，采用歸一化法計(jì)算組分的相對(duì)含量。

16數(shù)據(jù)處理和分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用SPSS 180對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，用Duncans法進(jìn)行多重比較。

2結(jié)果與分析

21不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響

不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響結(jié)果見(jiàn)表2。菜籽油組肌肉和肝胰腺SOD活力均顯著強(qiáng)于魚(yú)油組，花生油組肝胰腺SOD活力顯著強(qiáng)于魚(yú)油組和豆油組，大豆磷脂組肝胰腺SOD活力顯著低于其他各組。

[F（W9][HT6H][J][WTH]表2不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響[WTB][HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W9，W20W]脂肪源[B（][BHDWG12，W20W]SOD活力（U/mg

[BHDWG12，W10。2W][XXSX2-SX192]肌肉肝胰腺[BW]

[BHDG12，W9Q2，W10。2DWW]魚(yú)油7369±385b7845±274b

[BHDW]大豆磷脂7727±220ab5778±038c

豆油7889±716ab7974±305bendprint

花生油8097±1048ab9728±791a

菜籽油9154±524a10060±075a[HJ][BGF]

[JP2]注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著（P<005。表3同。[F]

22不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響

不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響結(jié)果見(jiàn)表3。除魚(yú)油組外，日本沼蝦肝胰腺CAT活力均高于肌肉。大豆磷脂組和菜籽油組肌肉中CAT活力顯著高于魚(yú)油組、豆油組和花生油組，大豆磷脂組、豆油組和菜籽油組肝胰腺CAT活力顯著高于魚(yú)油組和花生油組。

[F（W8][HT6H][J][WTH]表3不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響[WTB][HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W9，W20W]脂肪源[B（][BHDWG12，W20W]CAT活力（U/mg

[BHDWG12，W10。2W][XXSX2-SX192]肌肉肝胰腺[BW]

[BHDG12，W9Q2，W10。2DWW]魚(yú)油253±010de183±098b

[BHDW]大豆磷脂869±036a1578±080a

豆油239±024e2032±273a

花生油330±056cd665±065b

菜籽油451±022b1416±224a[HJ][BG）F][F）]

23不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肝胰腺脂肪酸含量的影響

不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肝胰腺脂肪酸含量的影響結(jié)果見(jiàn)表4。飼喂不同脂肪源的日本沼蝦肝胰腺脂肪酸種類(lèi)的組成較一致，飽和脂肪酸如C12 ∶[G-3]0、C13 ∶[G-3]0、C19 ∶[G-3]0和C20 ∶[G-3]0的含量差異不顯著，但不飽和脂肪酸的含量差異較大。魚(yú)油組EPA（C20 ∶[G-3]5n-3和n-3多不飽和脂肪酸含量均顯著高于其他各組；魚(yú)油組n-6 PUFA含量顯著低于其他各組；n-3/n-6 的值顯著高于于其他各組。豆油組和大豆磷脂組 C18 ∶[G-3]2n-6、C20 ∶[G-3]2n-6和多不飽和脂肪酸含量較高。菜籽油組飽和脂肪酸（SFA含量最低，而C18 ∶[G-3]n-9、C22 ∶[G-3]n-9和單不飽和脂肪酸總量顯著高于其他各組。[FL]

[F（W30][HT6H][J]表4不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肝胰腺脂肪酸組成的影響[HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W72，W522W]脂肪酸種類(lèi) [B（][BHDWG12，W522W]肝胰腺脂肪酸含量（%

[BHDWG12，W102。5W]魚(yú)油組大豆磷脂組豆油組花生油組菜籽油組[BW]

[BHDG12，W72，W102。5W]C12 ∶[G-3]0019±010a014±002a015±005a015±008a013±012a

[BHDW]C13 ∶[G-3]0003±003a003±001a004±001a003±003a痕量

C14 ∶[G-3]0869±064a418±074b424±013b420±092b321±084b

C15 ∶[G-3]0074±008a054±020ab035±033b043±017ab032±006b

C16 ∶[G-3]01769±134ab1844±197a1572±072bc1628±022abc1455±086c

C17 ∶[G-3]0039±009a027±010a027±006a010±015b006±002b

C18 ∶[G-3]0495±012b612±079a520±014ab473±069b338±025c

C19 ∶[G-3]0002±002a002±002a001±001a002±002a003±001a

C20 ∶[G-3]0027±005a050±031a051±035a044±039a055±047a

C22 ∶[G-3]0009±006b014±011b015±001b057±033a009±004b

C24 ∶[G-3]0003±003ab003±004ab002±003ab016±014a001±001b

總飽和脂肪酸3310±022a3043±269ab2665±101b2711±293b2230±182c

C16 ∶[G-3]n-9920±084a508±091b438±019b514±054b450±090b

C18 ∶[G-3]n-92698±194c3059±478c2927±212c3697±308b4630±155a

C20 ∶[G-3]n-9333±028a198±018b222±014ab231±092ab320±050a

C22 ∶[G-3]n-9178±019ab124±007b109±015b125±095b256±041a

C24 ∶[G-3]n-9015±006a005±004a005±006a009±010a005±003a

總單不飽和脂肪酸4146±106bcd3894±577cd3700±185d4576±198b5662±081a

C20 ∶[G-3]5n-31092±017a636±165b620±000b493±114bc349±032c

C22 ∶[G-3]6n-3360±039a271±070a283±045a270±052a109±025b

∑n-31452±052a906±233b903±045b762±165b459±047cendprint

C18 ∶[G-3]2n-6477±077c1641±113ab2068±204a1399±164b1276±063b

C20 ∶[G-3]2n-6055±007c232±081ab292±057a215±048ab149±028bc

C20 ∶[G-3]4n-6104±055a056±023ab045±006b038±012b024±003b

∑n-6637±046c1929±198ab2403±141a1653±128b1449±082b

總多不飽和脂肪酸2089±082bc2835±805ab3305±096a2415±327bc1908±129c

n-3/n-6228±015a075±017b038±004b050±025b032±002b

未知脂肪酸455±032228±021330±017298±015200±006[HJ][BG）F]

注：同行數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著（P<005。表5同。[F）]

[FL（22]24不同脂肪源對(duì)日本沼蝦卵巢脂肪酸的影響

不同脂肪源對(duì)日本沼蝦卵巢脂肪酸含量的影響結(jié)果見(jiàn)表5。不同脂肪源對(duì)日本沼蝦卵巢C12 ∶[G-3]0、C13 ∶[G-3]0、C19 ∶[G-3]0和C22 ∶[G-3]n-9脂肪酸的含量影響不顯著（P>005）。魚(yú)油組的亞油酸、C20 ∶[G-3]2n-6含量及n-6/n-3比值均顯著低于其他各組（P<005），EPA含量顯著高于其他各組（P<005）。大豆磷脂組亞油酸含量最高，顯著高于魚(yú)油組、花生油組和菜籽油組（P<005）?；ㄉ徒MC16 ∶[G-3]0和C22 ∶[G-3]0均顯著高于其他各組（P<005）。魚(yú)油組和花生油DHA（C22 ∶[G-3]6n-3）含量組差異不顯著（P>005），且顯著高于豆油組和菜籽油組（P<005）。

3結(jié)論與討論

31不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD和CAT活力的影響

SOD是清除氧自由基的重要酶類(lèi)，也是機(jī)體內(nèi)唯一以O(shè)2-[G-3]·[JP2]為底物的酶，它的作用是催化O2-[G-3]·歧化為過(guò)氧化氫和O2，維持細(xì)胞內(nèi)的氧自由基處于低量無(wú)害狀態(tài)[24]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)菜籽油肌肉和肝胰腺中SOD活力均顯著高于魚(yú)油組，與斑馬魚(yú)（Danio rerio的研究結(jié)果[25]一致。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道菜粕和花生粕代替魚(yú)粉也能提高血清、肌肉或肝胰腺SOD活力，且這種增加效益與添加量有關(guān)，添加量越高，SOD活力越強(qiáng)[26-28]。[FL]

[F（W29][HT6H][J]表5不同脂肪源對(duì)日本沼蝦卵巢脂肪酸組成的影響[HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W72，W522W]脂肪酸種類(lèi)[B（][BHDWG12，W522W]卵巢脂肪酸含量（%

[BHDWG12，W102。5W]魚(yú)油組大豆磷脂組豆油組花生油組菜籽油組[BW]

[BHDG12，W72，W102。5W]C12 ∶[G-3]0016±001a017±004a016±008a023±007a024±006a

[BHDW]C13 ∶[G-3]0003±001a003±001a002±002a003±002a002±001a

C14 ∶[G-3]0548±004a295±066b277±091b367±073b366±082b

C15 ∶[G-3]0072±004ab074±017a044±014bc058±019ab024±008c

C16 ∶[G-3]02130±028b1960±082b2030±278b2449±073a2077±142b

C17 ∶[G-3]0080±001a076±021a056±011ab078±019a035±016b

C18 ∶[G-3]0698±001c698±084c738±018bc797±045ab734±022bc

C19 ∶[G-3]0005±001a006±004a003±001a005±002a003±002a

C20 ∶[G-3]0023±002c029±004bc023±007c042±013ab043±006a

C22 ∶[G-3]0002±001c006±001b002±001c012±003a004±002bc

C24 ∶[G-3]0痕量002±001a痕量002±001a痕量

總飽和脂肪酸3575±035a3164±284b3189±432b3836±352a3312±127b

C16 ∶[G-3]n-9831±004a633±195ab488±087bc573±275abc335±139c

C18 ∶[G-3]n-92389±081bc2234±287c2597±090abc2437±096bc2742±142ab

C20 ∶[G-3]n-9252±004a157±049b170±029b208±475ab250±031a

C22 ∶[G-3]n-9183±152a056±023a054±001a067±013a040±009a

C24 ∶[G-3]n-9005±003a003±001a痕量004±000a痕量

總單不飽和脂肪酸3659±064ab3081±016c3309±025bc3289±032c3367±046bc

C20 ∶[G-3]5n-31475±029a859±156bc882±177b938±183b638±159c

C22 ∶[G-3]6n-3557±039a348±008b232±072c488±079ab206±064cendprint

∑n-32032±009a1207±148bc1114±249cd1426±107b844±179d

C18 ∶[G-3]2n-6212±059c1848±013a1455±080ab932±068b1036±053b

C20 ∶[G-3]2n-6062±011d178±027bc241±031a228±033ac210±063abc

C20 ∶[G-3]4n-6010±006a054±072a050±012a039±017a痕量

∑n-6283±076c2081±058a1747±035ab1199±087b1246±103b

總多不飽和脂肪酸2315±086bc3288±207a2860±286ab2625±179bc2090±193c

n-3/n-6745±197a059±005b076±051b117±018b068±033b

未知脂肪酸451±011467±029642±019250±0201231±073[HJ][BG）F][F）]

[FL（22]也有文獻(xiàn)報(bào)道，菜籽油與魚(yú)油相比雖然可以提高異育銀鯽（Carassius auratus gibelio血清SOD活力，但是與魚(yú)油組差異不顯著[29]。上述報(bào)道的差異可能與菜籽油的添加量不同有關(guān)。

CAT是一種含鐵的氧化酶，與產(chǎn)生H2O2的酶類(lèi)相偶聯(lián)，使H2O2分解為水和分子氧。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與魚(yú)油組比較，大豆磷脂、豆油花生油和菜籽油均可以提高日本沼蝦肝胰腺CAT活力，且大豆磷脂、豆油、和菜籽油的作用顯著，與斑點(diǎn)叉尾鮰（Lctalurus punctatus Rafinesque中的研究結(jié)果[30]一致。不同脂肪源的差異實(shí)質(zhì)上就是脂肪酸組成及比例的差異，本試驗(yàn)中幾種植物油飼料中亞油酸含量均高于魚(yú)油組，而魚(yú)油組飼料中（EPA+DHA含量最高。楊鳶劼等發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加亞油酸組的黃鱔（Monopterus albus血清中CAT活力顯著高于在飼料中添加（EPA+DHA組的活力[31]。這可能是本試驗(yàn)中植物油能提高肝胰腺CAT活力的原因。

32肝胰腺中SOD、CAT活力與脂肪酸含量的關(guān)系

SOD酶活力的增強(qiáng)，會(huì)減少體內(nèi)氧自由基的積累，減少不飽和脂肪酸的氧化，提高不飽和脂肪酸的含量。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)菜籽油組肝胰腺中SOD力最高，其次為花生油組，肝胰腺中不飽和脂肪酸也是在菜籽油組含量最高，其次為花生油組。本試驗(yàn)肝胰腺中SOD和CAT活力出現(xiàn)了不對(duì)稱(chēng)性，也就是說(shuō)各脂肪源組肝胰腺中SOD和CAT活力沒(méi)有出現(xiàn)同時(shí)增強(qiáng)或減弱的現(xiàn)象。有學(xué)者認(rèn)為，這種不對(duì)稱(chēng)性會(huì)引起體內(nèi)氧自由基的積累，從而使不飽和脂肪酸的氧化，降低不飽和脂肪酸的含量[32-33]。本試驗(yàn)中除了發(fā)現(xiàn)肝胰腺中SOD活力和肝胰腺中單不飽和脂肪酸含量之間的正相關(guān)性，并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)SOD和CAT的不平衡性和單不飽和脂肪酸含量之間具有相關(guān)性。此假說(shuō)是基于CAT作用于SOD產(chǎn)物H2O2理論基礎(chǔ)上產(chǎn)生的，即SOD活力越高，分解的O2-[G-3]·越多，產(chǎn)生的H2O2也越多，因此機(jī)體會(huì)產(chǎn)生越多的CAT來(lái)清除H2O2，但是體內(nèi)參與清除H2O2的酶不僅僅只有CAT，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px也具有清除H2O2的功能[34]，所以本試驗(yàn)現(xiàn)象可能是由于不同試驗(yàn)組產(chǎn)生不同活力的GSH - Px所致。

33不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肝胰腺和卵巢脂肪酸組成的影響

本試驗(yàn)中豆油組的飼料與肝胰腺PUFA含量均最高，魚(yú)油組飼料與肝胰腺的EPA含量最高，上述結(jié)果表明，日本沼蝦肝胰腺中PUFA的組成與其飼料密切相關(guān)。與Deering等研究結(jié)果[7，35]一致。飼料中所含脂肪酸是蝦類(lèi)體組織脂肪酸特別是必需脂肪酸的重要來(lái)源，飼料脂肪含量及質(zhì)量將影響體組織脂肪酸組成[36]。

飼料中未檢測(cè)到C20 ∶[G-3]2n-6，但是在每組試驗(yàn)蝦肝胰腺和卵中均檢測(cè)到數(shù)量不等的C20 ∶[G-3]2n-6。郭志峰等在對(duì)日本沼蝦不同發(fā)育階段卵巢中脂肪酸進(jìn)行了測(cè)定和比較的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)日本沼蝦卵巢進(jìn)入生長(zhǎng)期開(kāi)始出現(xiàn)C20 ∶[G-3]2n-6[37]，本試驗(yàn)蝦卵巢發(fā)育處于Ⅲ期，即為郭志峰等所指生長(zhǎng)期。另外有研究表明，日本沼蝦肝胰腺是卵巢發(fā)育的重要營(yíng)養(yǎng)源[15-16]，本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)卵巢（y和肝胰腺（x中C20 ∶[G-3]2n-6含量有著較強(qiáng)的相關(guān)性：y=-0257x2+1562x-0083（r2=078，這種相關(guān)性為上述結(jié)論提供了新的證據(jù)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)魚(yú)油組C20 ∶[G-3]2n-6含量最低，卵巢和肝胰腺中含量分別為（055%±007%和（062%±011%，其他各組卵巢和肝胰腺中含量均較高（149%～292%，造成這種差異及該脂肪酸在卵巢發(fā)育過(guò)程中的作用有待進(jìn)一步研究。

試驗(yàn)蝦肝胰腺和卵巢中的含量最高的脂肪酸均為 C18 ∶[G-3]n-9，肝胰腺中為2698%～4630%，卵巢中為2234%～2988%。與郭志峰等對(duì)日本沼蝦卵巢中脂肪酸的測(cè)定結(jié)果[37]一致。斑節(jié)對(duì)蝦中也有類(lèi)似的報(bào)道，且斑節(jié)對(duì)蝦卵巢發(fā)育過(guò)程中C18 ∶[G-3]1n在肝胰腺中不斷積累[38]。表明 C18 ∶[G-3]n-9 是日本沼蝦卵巢發(fā)育的重要能源物質(zhì)。

EPA和DHA是水產(chǎn)動(dòng)物性腺發(fā)育所需的重要營(yíng)養(yǎng)因子，影響著生物體的卵巢發(fā)育、卵子孵化和幼體成活力[39-41]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，魚(yú)油組肝胰腺EPA含量和卵巢DHA含量顯著高于其他各組。結(jié)果表明，蝦體肝胰腺和卵巢中的EPA和DHA與飼料中的含量差異不完全一致，比如豆油飼料組DHA含量最少，肝胰腺和卵巢中DHA含量均分別為菜籽油組含量最低。表明EPA與DHA的吸收不僅和其在飼料中的含量有關(guān)，而且與飼料中各脂肪酸的配比有關(guān)，蝦體具有合成少量DHA和EPA的能力[42-43]，可能也是造成這種差異的原因之一。endprint

本試驗(yàn)中植物油組（大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油肝胰腺和卵巢亞油酸顯著高于魚(yú)油組，與虹鱒的研究結(jié)果[44]一致。有學(xué)者認(rèn)為，植物油可以將魚(yú)體內(nèi)亞油酸延長(zhǎng)并去飽和為n-3 PUFA（EPA和DHA[45-46]。本研究發(fā)現(xiàn)植物油組（大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油肝胰腺和卵巢中EPA顯著低于魚(yú)油，DHA與魚(yú)油組差異不顯著，本研究結(jié)果與虹鱒（Oncorhynchus mykiss和大西洋鮭魚(yú)（Salmo salar中的研究結(jié)果[47-48]一致。表明蝦體內(nèi)可能不具有將亞油酸延長(zhǎng)并去飽和為EPA和DHA的作用，也有可能因?yàn)槿毡菊游r卵巢發(fā)育需要較多的亞油酸。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，在卵巢發(fā)育過(guò)程中，日本沼蝦卵巢和肝胰腺中EPA的含量逐漸下降，而亞油酸含量逐漸上升[38]。

綜上所述，大豆磷脂可以提高卵巢亞油酸的含量，豆油可以提高肝胰腺n-6 PUFA和卵巢亞油酸的含量，花生油可以提高卵巢DHA和n-3/n-6的值，菜籽油可以提高肝胰腺M(fèi)UFA和卵巢n-3 MUFA含量。其中亞油酸、n-6 PUFA、DHA和n-3 PUFA對(duì)甲殼動(dòng)物免疫機(jī)能和繁殖性能均具有一定的促進(jìn)作用[49-50]。因此，大豆磷脂、豆油、花生油與菜籽油作為日本沼蝦備選脂肪源均具有一定的積極作用，其中大豆磷脂和豆油的作用相似，但大豆磷脂會(huì)降低肝胰腺SOD活力，花生油會(huì)降低肝胰腺CAT活力，與此相反，豆油可以提高肝胰腺CAT活力，菜籽油可以提高肌肉和肝胰腺中SOD和CAT活力。因此，豆油和菜籽油在日本沼蝦飼料中可以一定程度上代替魚(yú)油，具體替代方案還需要結(jié)合日本沼蝦生長(zhǎng)等指標(biāo)進(jìn)一步研究闡明。

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