魏建方，向智龍，楊立強(qiáng)，蘇芹松，彭良富，蒲魯琴，張 歡

(1.貴州省大方縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 大方 551600;2.貴州省大方縣東關(guān)鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，貴州 大方 551600)

近年來(lái)，生豬強(qiáng)制免疫病種豬O型口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病3種疫苗均為單價(jià)苗，需分時(shí)段多次注射，耗時(shí)費(fèi)力，生豬應(yīng)激反應(yīng)較大，防疫阻力增大。為進(jìn)一步提高動(dòng)物疫病免疫工作效率，降低動(dòng)物免疫成本和村級(jí)動(dòng)物防疫人員勞動(dòng)強(qiáng)度，2013年我們應(yīng)用“三苗兩點(diǎn)”注射方法對(duì)豬O型口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病3種疫病免疫進(jìn)行了探索試驗(yàn)，現(xiàn)將試驗(yàn)情況報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)范圍 春季集中免疫期間在沙廠鄉(xiāng)、達(dá)溪鎮(zhèn)、竹元鄉(xiāng)、東關(guān)鄉(xiāng)、瓢井鎮(zhèn)、理化鄉(xiāng)、貓場(chǎng)鎮(zhèn)7個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，秋季集中免疫期間擴(kuò)大到11個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)。選擇轄區(qū)內(nèi)村級(jí)動(dòng)物防疫員業(yè)務(wù)能力強(qiáng)、養(yǎng)豬農(nóng)戶相對(duì)集中、防疫積極性高的養(yǎng)殖戶，開展“三苗兩點(diǎn)”注射試點(diǎn)工作，2次試驗(yàn)共免疫生豬8 403頭，其中分2次注射的1 194頭(春防879頭、秋防315頭)，同步注射的7 209頭(秋防)。

1.2 疫苗準(zhǔn)備 豬口蹄疫疫苗(中牧實(shí)業(yè)股份有限公司保山生物藥廠生產(chǎn))、豬瘟疫苗(細(xì)胞源)(廣西麗原生物股份有限公司生產(chǎn))、高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗(吉林正業(yè)生物制品股份有限公司生產(chǎn))、疫苗稀釋液。

1.3 診斷試劑 豬瘟抗體ELISA診斷試劑盒(批號(hào)為140506)、豬繁殖與呼吸綜合征抗體ELISA診斷試劑盒(批號(hào)為140506)、豬 O型口蹄疫抗體ELISA診斷試劑盒(批號(hào)分別為140506、140809)，均由武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 “三苗兩點(diǎn)”注射法:對(duì)生豬進(jìn)行免疫時(shí)，將國(guó)家要求強(qiáng)制免疫的豬O型口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病3種疫苗分2點(diǎn)進(jìn)行免疫注射。

1.4.1.1 “三苗兩點(diǎn)、兩次注射”:注射豬O型口蹄疫疫苗7天后，再用豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病2種疫苗混合后1次性注射到豬另一側(cè)耳根后頸部肌肉內(nèi)，3種疫苗2點(diǎn)注射，2次完成。

1.4.1.2 “三苗兩點(diǎn)、同步注射”:在豬耳根后頸部的一側(cè)注射豬O型口蹄疫疫苗，同時(shí)在另一側(cè)混合注射豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病2種疫苗，3種疫苗2點(diǎn)注射，1次完成。

1.4.2 操作要點(diǎn)

1.4.2.1 疫苗稀釋:疫苗使用前應(yīng)脫離冷源恢復(fù)到常溫(15～25℃)，用疫苗稀釋液稀釋。稀釋比例為1 mL稀釋液稀釋1頭份豬瘟疫苗和1頭份高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗，即1 mL稀釋好的疫苗中必須含1頭份豬瘟疫苗和1頭份高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗。稀釋好的疫苗常溫保存，并在2小時(shí)內(nèi)用完。1.4.2.2 注射劑量:根據(jù)使用說(shuō)明書的劑量增加注射 0.2 ～0.5 mL/頭，實(shí)際注射 1.2 ～1.5 mL/頭，以保證達(dá)到所需要的注射劑量。

1.4.2.3 監(jiān)測(cè)采樣:對(duì)采用“三苗兩點(diǎn)”注射法的生豬進(jìn)行采樣，每頭生豬采1份血清，每份采血量均不低于2 mL，并按照采樣單上的要求逐項(xiàng)據(jù)實(shí)填寫(注明是2次或同步注射)，每份血清樣品必須具有唯一性，樣品編號(hào)必須連續(xù)。

1.5 抗體檢測(cè) 用ELISA檢測(cè)高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體:樣品 D630nm＞0.42 判為陽(yáng)性，0.38 ＜ 樣品D630nm＜0.42判為可疑，樣品 D630nm＜0.38判為陰性。豬瘟免疫抗體:樣品D630nm＞0.35判為陽(yáng)性，樣品D630nm＜0.35判為陰性。豬O型口蹄疫免疫抗體:樣品 D630nm≥0.4判為陽(yáng)性，樣品 D630nm＜0.4 判為陰性。

2 結(jié)果

2.1 免疫反應(yīng)情況 2次試驗(yàn)共免疫生豬8 403頭(春防879頭，秋防7 524頭)。其中“三苗兩點(diǎn)、兩次注射”1 194頭，“三苗兩點(diǎn)、同步注射”7 209頭。免疫生豬有52頭出現(xiàn)不同程度的精神不振、食欲下降、體溫升高等免疫副反應(yīng)，無(wú)死亡。

2.2 抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2.1 “三苗兩點(diǎn)、兩次注射”:監(jiān)測(cè) 111 頭，豬口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體合格率分別為 87.39%、92.79%、88.29%，見表 1。

表1 豬口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病“三苗兩點(diǎn)、兩次注射”免疫抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果

2.2.2 “三苗兩點(diǎn)、同步注射”監(jiān)測(cè)數(shù)116頭，豬口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體合格率分別為 80.17% 、80.17% 、92.24% ，見表2。

表2 豬口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病“三苗兩點(diǎn)、同步注射”免疫抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果

3 小結(jié)

3.1 豬口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病3種疫苗采用“三苗兩點(diǎn)”注射法免疫，無(wú)明顯的臨床不良反應(yīng)。

3.2 同步注射和2次注射免疫抗體合格率均達(dá)到和超過(guò)農(nóng)業(yè)部要求。2次注射與同步注射免疫抗體合格率比較:豬口蹄疫高7.22個(gè)百分點(diǎn)，豬瘟高12.62個(gè)百分點(diǎn)，高致病性豬藍(lán)耳病低3.95個(gè)百分點(diǎn)。通過(guò)對(duì)比，3種疫苗采用“三苗兩點(diǎn)”同步注射和2次注射的免疫抗體合格率差異不顯著，同步注射豬瘟、豬口蹄疫免疫抗體合格率較低，在實(shí)際工作中建議采用“三苗兩點(diǎn)”2次注射，減少疫苗間的相互干擾。

3.3 該免疫技術(shù)經(jīng)云南省多個(gè)市州開展2年多的試驗(yàn)，3種疫苗的免疫質(zhì)量不受影響，減少了免疫反應(yīng)數(shù)與反應(yīng)死亡數(shù)［1］;云南省永勝縣免疫結(jié)果，豬瘟、豬口蹄疫和高致病性豬藍(lán)耳病的抗體合格率分別為 97.1%、79.3% 和 75.7%［2］;云南省祿勸縣在全縣開展“三苗同步、兩點(diǎn)注射”免疫技術(shù)，免疫密度和免疫質(zhì)量得到提高，免疫反應(yīng)和反應(yīng)死亡率明顯下降，高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟、豬口蹄疫免疫抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)率達(dá)90%以上［3］。上述報(bào)道與本次試驗(yàn)結(jié)果基本一致。

3.4 “三苗兩點(diǎn)”注射法是一種新的免疫方法，能有效整合行政資源、人力資源，工作效率顯著提高;防疫免疫密度和免疫質(zhì)量均有所提高;防疫免疫注射時(shí)間縮短，注射速度整體加快，勞動(dòng)強(qiáng)度明顯減少;減少重復(fù)免疫、漏免現(xiàn)象和對(duì)豬的多次免疫驚嚇，免疫反應(yīng)和反應(yīng)死亡率降低，養(yǎng)殖戶更容易接受，可在生豬免疫工作中推廣。

［1］ 汪金福.生豬“三苗兩針同步注射”免疫技術(shù)［J］.農(nóng)家科技，2013，(4):36.

［2］ 楊政學(xué)等.生豬“三苗兩點(diǎn)”免疫效果觀察［J］.養(yǎng)殖與飼料，2014，(1):21 ～23.

［3］ 張?jiān)骆?“三苗同步、兩點(diǎn)注射”技術(shù)在祿勸縣生豬防疫工作中的應(yīng)用［J］.貴州畜牧獸醫(yī)，2013，(6):44.