周三女，吳先輝，田妍基

（寧德職業(yè)技術(shù)學(xué)院， 福建 福安 355000）

烏飯樹(shù)葉的研究新進(jìn)展*

周三女，吳先輝，田妍基

（寧德職業(yè)技術(shù)學(xué)院， 福建 福安 355000）

烏飯樹(shù)葉藥食同源的歷史已久，富含多種生理活性成分，具有改善血液微循環(huán)、抗?jié)?、抗炎癥、抗疲勞、抗衰老、抗腫瘤等多種藥理活性，開(kāi)發(fā)前景巨大。本文綜述了烏飯樹(shù)葉的色素提取工藝、藥理作用、開(kāi)發(fā)應(yīng)用等方面的研究新進(jìn)展，為深入研究烏飯樹(shù)提供了相關(guān)的依據(jù)。

烏飯樹(shù)葉；提取工藝；藥理作用；開(kāi)發(fā)應(yīng)用

烏飯樹(shù)（VacciniumbracteatumThunb），別名牛筋，南燭草木，杜鵑花科植物，屬常綠灌木，多分布于福建、江蘇、安微、江西、湖南、湖北、廣東、臺(tái)灣等地。其根、葉、果實(shí)均可入藥。畬家人常于每年3月初三采集其葉，榨汁浸糯米，蒸成烏飯食用，以助陽(yáng)補(bǔ)陰，明目壯腎，烏飯樹(shù)名也由此而得?！侗静菥V目》云：“利腸胃、補(bǔ)骨髓，久服，固精駐顏、輕身明目”。

1 色素提取工藝

目前，食品工業(yè)上所用的色素多為合成色素，具有對(duì)人體的累積性致畸和致癌作用，因此天然色素取代合成色素勢(shì)在必行。烏飯樹(shù)葉汁是天然黑色素，主要成分是懈皮素，還含有氨基酸、有機(jī)酸、酚類(lèi)、糕質(zhì)、還原糖、多糖、蛋白質(zhì)等。烏飯樹(shù)葉色素中含有鋇、硼、鐵、錳等 種微量元素，其中許多為人體所需。李增亮等[1]從烏飯樹(shù)樹(shù)葉乙醇提取物中分離得到了柯伊利素（1）、東莨菪亭（2）、對(duì)羥基肉桂酸（3）、對(duì)羥基肉桂酸乙酯（4）、咖啡酸乙酯（5）、β-谷甾醇（6）、木犀草素（7）、槲皮素（8）、七葉亭（9）、咖啡酸（10）、異落葉松脂素-9-O-β-D-木糖苷（11），10-O-對(duì)羥基肉桂酰-雞屎藤次苷（12），其中化合物4、5、11、12為首次從越橘屬植物中分離得到，化合物1、2、9、10為首次從烏飯樹(shù)中分離得到。

杜建明[2]等對(duì)烏飯樹(shù)葉色素的提取技術(shù)及其穩(wěn)定性做了研究，得出烏飯樹(shù)葉色素的最佳浸提方法是，烏飯樹(shù)嫩葉加200%，用組織搗碎機(jī)搗碎后，加入明礬1%，在50-60℃下浸提1h。該色素水溶液 的最大吸收波長(zhǎng)為200nm。烏飯樹(shù)葉色素在堿性條件下穩(wěn)定，呈藍(lán)黑色，在酸性條件下為暗紅色。該色素的熱穩(wěn)定性好(加熱有利于顯色)，耐還原性強(qiáng)，但耐氧化性較弱。

王立[3]等對(duì)烏飯樹(shù)樹(shù)葉中的黑色素定量方法進(jìn)行了研究，利用NaNO2-Al(NO3)3和AlCl3 2種方法對(duì)烏飯樹(shù)葉提取出的黑色素中黃酮類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行了定量測(cè)定，并且與HPLC法進(jìn)行了比較，得出AlCl3比色法（390nm）測(cè)定結(jié)果與實(shí)際值較為接近，可作為其檢測(cè)方法。

烏飯樹(shù)葉色素存在于植物組織細(xì)胞內(nèi)，一般的機(jī)械破碎法很難將細(xì)胞有效地破碎，而化學(xué)破碎法則易造成提取物結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的改變。常規(guī)色素提取法存在流程復(fù)雜、時(shí)間長(zhǎng)、能耗大等缺點(diǎn)，不利于提高生產(chǎn)效益。而超聲波是一種彈性機(jī)械波，利用超聲振動(dòng)能量，可以改變物質(zhì)組織結(jié)構(gòu)、狀態(tài)、功能和加速這些改變的過(guò)程。若將其運(yùn)用在固液萃取過(guò)程中，則可使細(xì)胞周?chē)图?xì)胞內(nèi)產(chǎn)生環(huán)流，從而提高細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的通透性，起到強(qiáng)化萃取過(guò)程、有利于細(xì)胞內(nèi)有效成分浸出的作用。

顧文秀[4]等用超聲波提取烏飯樹(shù)葉色素的工藝條件做了研究，發(fā)現(xiàn)在室溫下，超聲波頻率30KHz，浸提時(shí)間10min，溶劑為62%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇，液固比為3.5:1（mL：g），浸提1次，超聲波提取法比常規(guī)提取法有明顯的優(yōu)勢(shì)，且用溶劑少，提取時(shí)間短，所得色素品質(zhì)高。素品質(zhì)更高。此外他們還對(duì)色素的穩(wěn)定性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。烏飯樹(shù)葉色素在酸性條件及低于80℃時(shí)是穩(wěn)定的；蔗糖對(duì)色素的降解作用不明顯，而檸檬酸具有明顯的增色和護(hù)色作用；當(dāng)苯甲酸鈉和山梨酸鉀的質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于0.01% 時(shí)對(duì)色素有明顯的降解作用。

胡志杰[5]等利用微波輻射技術(shù)，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)，對(duì)烏飯樹(shù)葉黑色素進(jìn)行提取，得出固液比為1:15，提取液濃度為40%，微波功率300w和輻照時(shí)間60s，在波長(zhǎng)286nm下測(cè)定其吸光值為0.812.黑色素粗品得率為16.4%，明顯高于傳統(tǒng)水浸提和有機(jī)溶劑浸提，且操作時(shí)間短，提取效率高。

梁紅昌[6]等通過(guò)通過(guò)包埋法對(duì)烏飯樹(shù)提取液進(jìn)行處理，所得提取物的感官性質(zhì)得到了極大的改善。與對(duì)照樣品相比,在相同濕度相同時(shí)間內(nèi)其含水量差值僅為對(duì)照品的22.2%，吸潮性得到了明顯改善；所得提取物溶液色澤清澈、明亮，無(wú)異味；HPLC法檢測(cè)結(jié)果顯示，樣品總黃酮的含量為0.0172 mg. mg-1。

王曉仙[7]等采用單因素試驗(yàn)和正交設(shè)計(jì)，以總黃酮的含量為指標(biāo),以提取溶劑濃度、料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)為試驗(yàn)因素，優(yōu)化烏飯樹(shù)樹(shù)葉中總黃酮的超聲提取工藝。優(yōu)化試驗(yàn)方案所得烏飯樹(shù)樹(shù)葉中總黃酮最佳提取工藝為：70%乙醇,料液比為1:40，提取時(shí)間30 min,提取次數(shù)2次。該提取工藝穩(wěn)定、可行。

大孔吸附樹(shù)脂因其具有吸附容量大、 吸附速度快、 選擇性好、 再生處理簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，而且它在提取的同時(shí)也有一定的純化作用，所以在天然產(chǎn)物的提取中被廣泛使用[8-10]。利用大孔吸附樹(shù)脂提取黃酮類(lèi)化合物的一般方法是：將植物材料的提取溶液上吸附樹(shù)脂柱，首先用水洗脫去除其中的可溶性多糖和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，再用不同濃度的醇溶液洗出其中所吸附的黃酮類(lèi)物質(zhì)，最后用濃醇洗盡[11]。

王立[12]等利用11種大孔吸附樹(shù)脂對(duì)烏飯樹(shù)樹(shù)葉黑色素進(jìn)行了純化分析，得出AB-8、NKA-9和S-8型大孔吸附樹(shù)脂的靜態(tài)吸附量和解吸率較高。選擇AB-8型大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行動(dòng)態(tài)分析，得出最佳的純化條件：pH值為5.05左右，溶液濃度為0.68～1.33mg/mL，吸附流速為3mL/min。使用7倍體積的95%乙醇解吸率可以超過(guò)95%。樹(shù)脂使用3次后必須進(jìn)行再生處理。

近年來(lái)為提高浸提步驟的效率和收率，逐漸引入酶解法，所謂酶解法就是用一定濃度的纖維素酶或者相關(guān)復(fù)合酶對(duì)烏飯樹(shù)葉進(jìn)行破壁提取，相較普通溶劑浸提法，效率可獲得較大的提升。王立[13]等利用果膠酶和纖維素酶在緩沖液條件下對(duì)烏飯樹(shù)葉黑色素的提取做了研究，發(fā)現(xiàn)果膠酶和纖維素酶合用有利于提高黑色素的得率，當(dāng)果膠酶用量為2.5mg/g樹(shù)葉，纖維素酶用量為3.0mg. g-1樹(shù)葉時(shí)提取得率超過(guò) 33 mg. g-1原料。色素穩(wěn)定性研究結(jié)果表明 ,長(zhǎng)時(shí)間光照色素顏色加深;酸性條件下色素較穩(wěn)定；提高溫度或延長(zhǎng)高溫時(shí)間可以增強(qiáng)色素顯色；Mg2+、Na+、K+、Ca2+、Zn2+對(duì)色素影響不大,但是Cu2+和Fe3+對(duì)烏飯樹(shù)樹(shù)葉黑色素的穩(wěn)定性影響很大,所以在黑色素保藏和應(yīng)用中避免接觸。而余清[14]等利用酶法提取烏飯樹(shù)葉色素，提出纖維素酶與果膠酶配比2:1，酶解時(shí)間3h，提取時(shí)間3h；復(fù)合酶法提取工藝與傳統(tǒng)有機(jī)溶劑提取工藝相比，色素的提取率提高13.2%。

2 藥理作用

現(xiàn)代分析技術(shù)顯示，烏飯樹(shù)葉中含有極為豐富的有效成分，如花青苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、酚類(lèi)、單寧類(lèi)等多種有效成分，具有改善血液微循環(huán)、抗?jié)?、抗炎癥、抗疲勞、抗衰老、抗腫瘤等多種藥理活性[15-17]。

劉清飛[18]等通過(guò)烏飯樹(shù)葉的醇提取物對(duì)小鼠的爬桿試驗(yàn)、血尿素氮含量測(cè)定、血中乳酸含量測(cè)定及低溫生存試驗(yàn)，證實(shí)其具有抗疲勞、耐寒作用，且無(wú)毒。

王立[19]等對(duì)烏飯樹(shù)葉中提取的色素進(jìn)行了分離純化，分離出了4種黃酮類(lèi)物質(zhì)，并且發(fā)現(xiàn)烏飯樹(shù)提取物都具有很強(qiáng)的清除自由基能力。王立[20]等還對(duì)分離得到的槲皮素、白楊黃素、芹黃素、山奈酚和木犀草素的抗氧化活性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)它們都具有很強(qiáng)的自由基清除能力，能力最強(qiáng)的是槲皮素。

王立[22]等研究了烏飯樹(shù)葉及其提取物對(duì)視網(wǎng)膜免受光損傷的保護(hù)功能，發(fā)現(xiàn)服用過(guò)烏飯樹(shù)葉提取物的新西蘭白兔的眼睛視網(wǎng)膜有明顯的保護(hù)作用。

王立等[23-24]研究了烏飯樹(shù)樹(shù)葉提取物（VBTL）對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的降血糖和血脂作用，并與二甲雙胍的效果進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)雖然效果沒(méi)有二甲雙胍明顯，但是用VBTL治療的小鼠較對(duì)照組相比，體重增加了61.0%，血糖降低了14.2%。血脂水平也得到了明顯的改善。所以，無(wú)論是水或是乙醇提取的烏飯樹(shù)功能性成分均能改善鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠血糖。

魏國(guó)華[25]等以發(fā)現(xiàn)烏飯樹(shù)葉精提物和粗提物的還原力和抑制脂質(zhì)過(guò)氧化能力與Vc相當(dāng)，清除DPPH·自由基能力是Vc的1.4倍。閆賦琴等[23]研究發(fā)現(xiàn)烏飯樹(shù)樹(shù)葉提取物可減輕大鼠的氧化應(yīng)激損傷。

章海燕等[26]等發(fā)現(xiàn)烏飯樹(shù)葉提取物對(duì)細(xì)菌的抑制作用明顯，但對(duì)霉菌和酵母的抑菌效果不明顯。除烏飯樹(shù)葉粗多糖對(duì)枯草桿菌的抑菌效果不明顯外，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等有害細(xì)菌抑制效果較好。此外，熱處理會(huì)降低烏飯樹(shù)樹(shù)葉水提物和醇提物的抑菌效果，而會(huì)改善烏飯樹(shù)樹(shù)葉粗多糖的抑菌效果。

余清[27]等發(fā)現(xiàn)烏飯樹(shù)葉乙醇提取物對(duì)小鼠宮頸癌細(xì)胞株的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，瘤重和腫瘤生長(zhǎng)抑制率與陰性對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，高劑量組（5g/kg）抑瘤率達(dá)28.76%。而烏飯樹(shù)葉乙醇提取物不能抑制小鼠腹水癌的生長(zhǎng)。

程素嬌[28]以II型糖尿病小鼠為研究對(duì)象，探討了烏飯樹(shù)葉多糖提取物對(duì)小白鼠血糖血脂含量的影響，結(jié)果表明烏飯樹(shù)葉多糖降血糖機(jī)理體現(xiàn)在促進(jìn)胰島素分泌、修復(fù)糖尿病小鼠受損胰島β細(xì)胞核提高糖尿病小鼠抗氧化能力3個(gè)方面。

Dore C M P G等[29]烏飯樹(shù)果實(shí)中多糖含量較高，每100g果實(shí)中含有8.4g。多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗癌抗病毒、降血糖、美容等生物功能。

3 開(kāi)發(fā)應(yīng)用

烏飯樹(shù)葉及果實(shí)食用及藥用歷史悠久。據(jù)《本草綱目》記載：“（枝葉）苦、平、無(wú)毒。（主治）止瀉除睡，強(qiáng)筋益氣力。久服，輕身長(zhǎng)年，令人不饑，變白卻老。添味補(bǔ)髓，消滅三蟲(chóng)。”烏飯樹(shù)葉及果實(shí)中的天然成分不但具有強(qiáng)身健體、減肥養(yǎng)顏、延年益壽的功效，而且用烏飯樹(shù)葉漬米做成的烏飯具有特殊的色澤，獨(dú)特的口味，并且暴露在空氣中數(shù)日不變色，不變味，不變質(zhì)，可見(jiàn)其具有極好的抑菌防腐作用，可作為一種新型的天然食品防腐劑，可以填補(bǔ)我國(guó)天然食品添加劑的空白，新昌制藥廠已在抓緊研制中[30]。

國(guó)外對(duì)烏飯樹(shù)產(chǎn)品研究開(kāi)發(fā)得較早，目前已形成一系列的產(chǎn)品，例如日本已研制出烏飯樹(shù)類(lèi)飲料、果實(shí)罐頭、香酒、果汁、果醋等；歐洲一些國(guó)家也用烏飯樹(shù)提取物治療眼疾。國(guó)內(nèi)對(duì)烏飯樹(shù)的研究開(kāi)發(fā)較晚，產(chǎn)品相對(duì)較少，但近幾年也有一系列的產(chǎn)品問(wèn)世，如江蘇省中國(guó)科學(xué)院植物研究所利用烏飯樹(shù)開(kāi)發(fā)了黑色食品——青精糯；有企業(yè)開(kāi)發(fā)了“烏飯葉米飯伴侶”，用此米飯伴侶粉末18g可浸泡500g糯米，加開(kāi)水后放置半小時(shí)后直接蒸煮，達(dá)到烏米效果，用熱水浸泡后蒸煮效果更佳。

肖珊美[31]提出從烏飯樹(shù)葉中提取復(fù)合天然有效成分，利用現(xiàn)代制劑技術(shù)將其制成顆粒劑，并可根據(jù)不同消費(fèi)者口味習(xí)慣，添加不同的調(diào)味劑，食用時(shí)沖泡成溶液即可。

馬奕春[32]以烏飯樹(shù)葉為原料，以蜂蜜等為輔料，調(diào)入適量檸檬酸和白砂糖調(diào)節(jié)飲料的酸甜度，灌裝，封口，馬氏殺菌，冷卻后即成為成品，研究開(kāi)發(fā)出了一款新的烏飯樹(shù)保健飲料。

陳明婕[33]也做了烏飯樹(shù)飲料的研制，原料采用30%的烏飯樹(shù)汁、10%芹菜汁、0.15%檸檬酸、9%白砂糖、以（0.15% CMC-Na+0.2%瓊脂）為復(fù)合穩(wěn)定劑，再用（0.1%NaCl +0.02%ZnCl2）溶液對(duì)芹菜進(jìn)行護(hù)綠，基于此工藝生產(chǎn)出來(lái)的飲料既有烏飯樹(shù)的清香，又有芹菜的特殊香氣，口感清爽，穩(wěn)定性較佳。

陳明婕[33]也開(kāi)發(fā)了烏飯樹(shù)軟糖：選取物果膠含量1.1%，糖酸比90:1，最佳制備條件為pH4.5，凝膠溫度63℃，干燥溫度55℃，干燥時(shí)間18h，在此條件下制的軟糖外觀晶瑩、色澤均勻且富有光澤，質(zhì)地柔軟軟滑，口感宜人。

鄧梅忠[34]對(duì)水提取-超聲波萃取烏飯樹(shù)葉多糖的工藝進(jìn)行考察，并對(duì)所得烏飯樹(shù)樹(shù)葉多糖進(jìn)行了卷煙加香試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)烏飯樹(shù)樹(shù)葉多糖能改善煙氣質(zhì)，改善余味。

4 小結(jié)與展望

烏飯樹(shù)具有多種有效成分，且該植物在我國(guó)南方各地均有廣泛的分布，蘊(yùn)藏量非常大，無(wú)論從藥用的角度，還是從保健食療的角度均具有較廣闊的開(kāi)發(fā)前景。但目前相關(guān)研究還不夠深入，市場(chǎng)很小，高附加值的更少。今后可采用現(xiàn)代的提純分離方法，對(duì)其中的有效成分或有效部位進(jìn)行提取、分離，針對(duì)不同的需求制成相應(yīng)產(chǎn)品，方便人們的應(yīng)用；或制成一定的劑型，使其從民間食用品上升到保健食品乃至藥品，不僅可以擴(kuò)大藥用資源，而且會(huì)產(chǎn)生更大的社會(huì)及經(jīng)濟(jì)效益。

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S567.2

A

1007-550X（2015）08-0037-04

10.3969/j.issn.1007-550X.2015.08.004

寧德市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2009066）。

2015-07-15

周三女（1981- ），女，江西樟樹(shù)人，講師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)工作。