賈銀芝，楊中林

(中國藥科大學(xué) 天然藥物活性物質(zhì)與功能國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210009)

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竹節(jié)參總皂苷對Triton WR-1339誘發(fā)的高脂血癥小鼠降血脂作用研究

賈銀芝，楊中林*

(中國藥科大學(xué) 天然藥物活性物質(zhì)與功能國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210009)

目的：研究竹節(jié)參總皂苷的降血脂作用。方法：采用Triton WR-1339誘發(fā)急性高脂血癥小鼠模型，將66只雄性小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、非諾貝特組、竹節(jié)參總皂苷低劑量組、竹節(jié)參總皂苷中劑量組、竹節(jié)參總皂苷高劑量組，每組11只。觀察竹節(jié)參總皂苷對各組小鼠血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平的影響。結(jié)果：與模型組比較，非諾貝特組可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)；竹節(jié)參總皂苷低劑量組(100mg/kg)可降低小鼠血清TC水平(P<0.05)，顯著降低小鼠血清TG水平(P<0.01)；竹節(jié)參總皂苷中劑量組(200mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG水平(P<0.01)，降低小鼠血清LDL-C水平(P<0.05)；竹節(jié)參總皂苷高劑量組(400mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)。結(jié)論：竹節(jié)參總皂苷具有一定的降血脂作用，且呈劑量依賴性。

高脂血癥；小鼠；竹節(jié)參總皂苷；Triton WR-1339

近年來，心腦血管疾病已成為威脅人類健康的主要?dú)⑹郑咧Y是引起心腦血管疾病的主要因素[1]。開發(fā)安全、有效且多靶點(diǎn)作用的降血脂藥物已成為全球研究熱點(diǎn)，中草藥安全、價廉、來源廣，可以發(fā)揮多途徑、多靶點(diǎn)作用，在降血脂方面具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢[2]。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 試劑與試藥

竹節(jié)參總皂苷(實(shí)驗(yàn)室試樣品，批號：20131204)；非諾貝特膠囊(法國利博福尼制藥公司，批號：21264)；總膽固醇測定試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司)；甘油三酯測定試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司)；低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒(南京建成生物工程研究所)；Triton WR-1339(美國 Sigma-Aldrich 公司)。

1.2 儀器

電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)；80-2型低速離心機(jī)(江蘇金壇市金城國盛實(shí)驗(yàn)儀器廠)；HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司)；KQ-250E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；Epoch型酶標(biāo)儀(美國BioTek)。

1.3 動物

KM小鼠66只，SPF級，雄性，體重18～22g，購自上海杰思捷實(shí)驗(yàn)動物有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 實(shí)驗(yàn)樣品液配制

2.1.1 造模劑配制 將Triton WR-1339溶于生理鹽水配成濃度為40mg/mL的藥劑，給藥體積為10mL/kg，給藥劑量為400mg/kg。

2.1.2 非諾貝特混懸液配制 精密稱取非諾貝特膠囊內(nèi)容物150mg，置于100mL鹽水瓶中，加100mL0.5%CMC-Na溶液，超聲處理，即得濃度為1.5mg/mL的非諾貝特混懸液，于4℃保存。

2.1.3 竹節(jié)參總皂苷藥液配制 竹節(jié)參總皂苷低劑量組：精密稱取0.5g竹節(jié)參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中，加100mL0.5%CMC-Na溶液，超聲處理，即得濃度為5mg/mL的竹節(jié)參總皂苷藥液，于4℃保存。

竹節(jié)參總皂苷中劑量組：精密稱取1g竹節(jié)參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中，加100mL0.5%CMC-Na溶液，超聲處理，即得濃度為10mg/mL的竹節(jié)參總皂苷藥液，于4℃保存。

竹節(jié)參總皂苷高劑量組：精密稱取2g竹節(jié)參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中，加100mL0.5%CMC-Na溶液，超聲處理，即得濃度為20mg/mL的竹節(jié)參總皂苷藥液，于4℃保存。

2.2 給藥造模

昆明種雄性小鼠66只，適應(yīng)性飼養(yǎng)3天。將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、非諾貝特組、竹節(jié)參總皂苷低劑量組、竹節(jié)參總皂苷中劑量組、竹節(jié)參總皂苷高劑量組，每組11只?？瞻捉M和模型組小鼠每天灌胃給予0.5%CMC-Na溶液(給藥體積均為20mL/kg)；給藥組小鼠每天灌胃給予藥物，給藥劑量分別為：非諾貝特組30mg/kg，竹節(jié)參總皂苷低劑量組100mg/kg，竹節(jié)參總皂苷中劑量組200mg/kg，竹節(jié)參總皂苷高劑量組400mg/kg，給藥體積均為20mL/kg，連續(xù)給藥7天。

末次給藥前16h，空白組小鼠腹腔注射生理鹽水(給藥體積為10mL/kg)，其余各組小鼠腹腔注射Triton WR-1339，給藥劑量為400mg/kg，給藥體積為10mL/kg。末次給藥1h后，眼眶取血，靜置1h，離心分離血清，測定血清中TC、TG、LDL-C水平。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與空白組比較，模型組血清TC、TG、LDL-C水平明顯升高，且差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，顯示急性高脂血癥小鼠模型成功；與模型組比較，非諾貝特組可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)；竹節(jié)參總皂苷低劑量組(100mg/kg)可降低小鼠血清TC水平(P<0.05)，顯著降低小鼠血清TG水平(P<0.01)；竹節(jié)參總皂苷中劑量組(200mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG水平(P<0.01)，降低小鼠血清LDL-C水平(P<0.05)；竹節(jié)參總皂苷高劑量組(400mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)。各組小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平測定結(jié)果見表1。

表1 各組小鼠血清TC、TG、LDL-C測定結(jié)果

組別TCTGLDL-C空白組(n=11)3.94±0.554.02±1.071.04±0.37模型組(n=11)10.08±1.41△△57.91±7.75△△4.44±1.18△△非諾貝特組(n=11)4.32±0.56**32.12±7.50**1.99±0.56**竹節(jié)參總皂苷低劑量組(n=11)8.50±1.97*40.53±10.79**4.37±0.75竹節(jié)參總皂苷中劑量組(n=11)5.88±2.55**38.71±7.67**3.22±1.35*竹節(jié)參總皂苷高劑量組(n=11)5.06±1.85**33.65±9.02**2.07±0.67**

注：與空白組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

4 討論

本實(shí)驗(yàn)采用腹腔注射Triton WR-1339誘發(fā)高脂血癥小鼠模型，該模型屬于內(nèi)源性升高血脂，原理為Triton WR-1339可抑制極低密度脂蛋白(VLDL)與其他脂蛋白交換而富集在血漿中，同時抑制脂蛋白脂肪酶(LPL)活性，造成血清TC、TG值升高[6]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與空白組比較，模型組可顯著提高小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)，表明急性高脂血癥模型成功。

本實(shí)驗(yàn)采用陽性藥為非諾貝特(貝特類降脂藥)，該類藥物是目前降TG最有效藥物之一，是一類人工合成的過氧化物酶體增生激活受體α(PPARα)配體，通過激活PPAR-α，誘導(dǎo)LPL表達(dá)，增強(qiáng)LPL活性，促進(jìn)血漿中富含TG脂蛋白的TG水解，從而降低TG；同時也具有降低TC、LDL-C作用[7]。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出結(jié)論，竹節(jié)參總皂苷可顯著降低急性高脂血癥小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平，表明其具有一定的降血脂作用，且呈劑量依賴性，高劑量組降脂作用與陽性藥非諾貝特相當(dāng)。長期服用貝特類藥物會引起消化不良、肌毒性等不良反應(yīng)[8]，關(guān)于竹節(jié)參總皂苷的不良反應(yīng)未見報(bào)道。因此，將竹節(jié)參總皂苷開發(fā)成安全有效的降脂藥物具有極大潛力和發(fā)展空間。

[1] JAIN KS,KATHIRAVAN MK,SOMANI RS,et al. The biology and chemistry of hyperlipidemia[J]. Bioorg Med Chem,2007,15(14): 4674-4699.

[2] 王海勇,王林. 降血脂藥物的研究進(jìn)展[J]. 國外醫(yī)學(xué)·藥學(xué)分冊,2004,31(3): 160-166.

[3] 歐陽麗娜,向大位,吳雪,等. 竹節(jié)參化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J]. 中草藥,2010,41(6): 1023-1027.

[4] 左銳,袁丁. 竹節(jié)參化學(xué)成分和藥理活性研究進(jìn)展[J]. 時珍國醫(yī)國藥,2005,16(9): 838-839.

[5] 翟羽佳,陳邦添,李善兵,等. Triton WR-1339誘發(fā)小鼠高脂血癥模型的研究[J]. 中國藥理學(xué)通報(bào),2011,27(8): 1178-1179.

[6] LEVINE S,SALTZMAN A.A procedure for inducing sustained hyperlipemia in rats by administration of a surfactant[J].J Pharmacol Toxicol Methods,2007,55(2): 224-226.

[7] 劉玲,趙水平.貝特類調(diào)脂藥物的研究及應(yīng)用進(jìn)展[J].中國新藥與臨床雜志,2000,19(5): 349-352.

[8] 郭丹杰,徐成斌.貝特類調(diào)脂藥物在降脂領(lǐng)域的地位及認(rèn)識[J].臨床藥物治療雜志,2008,6(2): 1-3.

(責(zé)任編輯：李嵐春)

Hypolipidemic Action of Total Saponins of Panax Japonicus on Triton WR-1339 induced Hyperlipidemic Mice

Jia Yinzhi,Yang Zhonglin*

(State Key laboratory of Natural Products and Functions,China Pharmaceutical University,Nanjing 210009,China)

Objective:To observe the hypolipidemic effect of total saponins of Panax japonicus (TSPJ). Methods:Animal models of hyperlipidemia induced by Triton WR-1339 (400mg/kg) were established. The serum levels were respectively measured,including total cholesterol (TC),triglyceride (TG) and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C). Results:Contrast to the model group,fenofibrate significantly lowered the serum TC,TG,LDL-C levels (P<0.01),and TSPJ (100mg/kg) significantly lowered the serum TC levels (P<0.05) and TG levels (P<0.01),and TSPJ (200mg/kg) significantly lowered the serum TC,TG levels (P<0.01) and LDL-C levels (P<0.05),and TSPJ (400mg/kg) significantly lowered the serum TC,TG,LDL-C levels (P<0.01). Conclusion:TSPJ show notable antihyperlipidemia effect in serum in mice,which are in dose-dependent manner.

Total Saponins of Panax Japonicus; Triton WR-1339; Hyperlipidemia；Mice

2014-02-06

江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目

賈銀芝(1990-)，女，中國藥科大學(xué)碩士研究生，研究方向?yàn)橹兴幮滤幯芯?。E-mail:yinzhizhi.hi@163.com

楊中林(1950-)，女，中國藥科大學(xué)中藥學(xué)院教授，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幮滤幯芯俊?E-mail:yzl1950@126.com

R285.5；R589.2

A

1673-2197(2015)12-0009-03

10.11954/ytctyy.201512004