林莉

鐵皮石斛與玉竹抗疲勞作用的比較研究

林莉

目的 觀察鐵皮石斛與玉竹及其配方的抗疲勞作用。方法 將ICR小鼠25只隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、單味鐵皮石斛組、單味玉竹組、鐵皮石斛復(fù)方組、玉竹復(fù)方組，每組5只，連續(xù)給藥1周（7天）后進(jìn)行游泳實(shí)驗(yàn)，小鼠休息2天后，灌胃相應(yīng)藥物30min后進(jìn)行耐缺氧實(shí)驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)，對(duì)比并分析各組的差異。結(jié)果 小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)、游泳時(shí)間和耐缺氧時(shí)間，呈現(xiàn)復(fù)方鐵皮石斛組［（8.60±0.69）g、（9.86±0.35）min、（28.66±1.28）min］＞復(fù)方玉竹組［（7.46±0.55）g、（9.02±0.45）min、（26.78±1.27）min］＞單味鐵皮石斛組［（6.40±1.14）g、（8.78±1.00）min、（24.52±2.32）min］＞單味玉竹組［（5.60±1.20）g、（8.56±0.69）min、（23.38±2.21）min］＞對(duì)照組［（4.84±0.98）g、（7.44±0.91）min、（19.92± 2.12）min］，且復(fù)方組明顯高于其它三組（P＜0.05）。結(jié)論 鐵皮石斛和玉竹均有顯著的抗疲勞作用，單味玉竹的抗疲勞作用略亞于單味鐵皮石斛，鐵皮石斛復(fù)方的抗疲勞效果明顯優(yōu)于玉竹復(fù)方。

鐵皮石斛；玉竹；白術(shù)；抗疲勞

很多滋補(bǔ)類的中藥都具有抗疲勞的功效。鐵皮石斛滋陰清熱、益胃生津，潤(rùn)肺止咳，中醫(yī)臨床應(yīng)用已有2000多年歷史，以“千金草”之譽(yù)馳名中外。1992年《中國(guó)植物紅皮書》中被收載為瀕危植物[1]。玉竹同樣首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有養(yǎng)陰潤(rùn)燥，生津止渴的功效，且補(bǔ)五勞七傷之損，也是常用滋補(bǔ)之品。運(yùn)動(dòng)耐力的提高是抗疲勞能力增強(qiáng)最有力的宏觀表現(xiàn)，游泳時(shí)間的長(zhǎng)短可以反應(yīng)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)疲勞的程度[2]，綜合考慮實(shí)驗(yàn)條件、操作難易程度、結(jié)果的準(zhǔn)確性等各方面因素，本研究選用小鼠耐缺氧實(shí)驗(yàn)和游泳實(shí)驗(yàn)，觀察鐵皮石斛與玉竹及其配方的抗疲勞作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng) 物 ICR小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量（20.0±2.0），由浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK（浙）2003－001。

1.2 藥 品 取鐵皮石斛40g，玉竹40g，鐵皮石斛與白術(shù)各20g，玉竹與白術(shù)各20g，共4份。將以上中藥分別加水煎煮3次，過濾后，濃縮為1g/mL的鐵皮石斛水提液、玉竹水提液、鐵皮石斛與白術(shù)復(fù)方水提液、玉竹與白術(shù)復(fù)方水提液。均置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 主要儀器及試劑 燒杯若干、鐵架臺(tái)、石棉網(wǎng)、酒精燈、1mL的灌胃針、恒溫水浴箱、溫度計(jì)、50cm× 20cm×20cm的玻璃缸、負(fù)重物、秒表、200mL磨口廣口瓶、凡士林、鈉石灰、0.9%氯化鈉溶液。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 游泳實(shí)驗(yàn) 取ICR小鼠25只，雌雄各半，按體質(zhì)量隨機(jī)分成陰性對(duì)照組（生理鹽水）、單味鐵皮石斛組、單味玉竹組、鐵皮石斛與白術(shù)復(fù)方組、玉竹與白術(shù)復(fù)方組，每組5只，陰性對(duì)照組給予同等劑量的生理鹽水灌胃給藥；另四組每天灌藥分別為單味鐵皮石斛組0.4mL、單味玉竹組0.4mL、鐵皮石斛與白術(shù)復(fù)方組0.4mL和玉竹與白術(shù)復(fù)方組0.4mL。連續(xù)灌胃給藥1周。末次給藥30min后，在小鼠尾部束一2g的重物，將小鼠分別放入玻璃缸內(nèi)游泳，并計(jì)時(shí)。注意觀察，當(dāng)小鼠沉入水中又拼命掙扎露出鼻子3～4次，并且掙扎難以浮出水面者即為體力耗竭，即刻計(jì)時(shí)，為小鼠的游泳時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)存在的問題：水不夠深的時(shí)候小鼠的尾巴會(huì)觸及水槽底部，并且小鼠在水中可能會(huì)只是浮著而不游泳，因此，進(jìn)行游泳實(shí)驗(yàn)的水槽一定要夠大，水一定要放得夠深，不能讓小鼠的尾巴觸及玻璃缸的底部，小鼠若是不主動(dòng)游動(dòng)，就用玻璃棒撥弄，促使其游泳。

2.2 觀察小鼠一般癥狀和體征 在做小鼠游泳實(shí)驗(yàn)過程中，每天不定時(shí)觀察小鼠精神、飲食、活動(dòng)、二便等狀況。

2.3 耐缺氧實(shí)驗(yàn) 取游泳實(shí)驗(yàn)后小鼠，令其休息2天以恢復(fù)體力。陰性對(duì)照組給予同等劑量的生理鹽水灌胃給藥；另四組各灌胃相應(yīng)藥物0.4mL。灌后30min將小鼠放入盛有15g鈉石灰的200mL廣口瓶?jī)?nèi)（每瓶只放1只小鼠），用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán)，使之不漏氣，立即計(jì)時(shí)。以呼吸停止為指標(biāo)，觀察小鼠因缺氧而死亡的時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)中，鈉石灰不可直接投入廣口瓶中，應(yīng)用紗布包裹，不能讓實(shí)驗(yàn)小鼠直接接觸，否則小鼠誤食鈉石灰，將直接影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，抑或小鼠眼睛被鈉石灰灼傷導(dǎo)致劇痛、狂躁不安，也影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 實(shí)驗(yàn)前后小鼠體質(zhì)量變化 給藥前，各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，體質(zhì)量無顯著性差異（P＞0.05）。給藥1周后，鐵皮石斛復(fù)方組和玉竹復(fù)方組小鼠體質(zhì)量與對(duì)照組相比顯著提高（P＜0.01），單味鐵皮石斛組與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而單味玉竹組與對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 各組實(shí)驗(yàn)前后小鼠體質(zhì)量變化（g，±s）

表1 各組實(shí)驗(yàn)前后小鼠體質(zhì)量變化（g，±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與鐵皮石斛復(fù)方組比較，△P＜0.05

組別對(duì)照組單味鐵皮石斛組單味玉竹組鐵皮石斛復(fù)方組玉竹復(fù)方組只數(shù)55555給藥前21.18±0.70 21.58±0.54 20.58±0.87 20.22±0.76 20.78±0.63給藥后26.02±0.61 27.98±0.68*△26.18±0.68△28.82±0.55** 28.24±0.65**△增長(zhǎng)量4.84±0.98 6.40±1.14* 5.60±1.20 8.60±0.69** 7.46±0.55**

3.2 各組小鼠游泳時(shí)間比較 鐵皮石斛復(fù)方組和玉竹復(fù)方組整體較單味鐵皮石斛組和單味玉竹組延長(zhǎng)，且鐵皮石斛復(fù)方組和玉竹復(fù)方組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），單味玉竹組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。鐵皮石斛復(fù)方組的游泳時(shí)間優(yōu)于玉竹復(fù)方組和二個(gè)單味組（P＜0.05）。見表2。

表2 各組小鼠游泳時(shí)間比較（±s）

表2 各組小鼠游泳時(shí)間比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與鐵皮石斛復(fù)方組比較，△P＜0.05

組別對(duì)照組單味鐵皮石斛組單味玉竹組鐵皮石斛復(fù)方組玉竹復(fù)方組只數(shù)55555給藥劑量（mL/d）0.4 0.4 0.4 0.4 0.4游泳時(shí)間（min）7.44±0.91 8.78±1.00△8.56±0.69*△9.86±0.35** 9.02±0.45**△

3.3 各組小鼠耐缺氧時(shí)間比較 鐵皮石斛復(fù)方組和玉竹復(fù)方組耐缺氧時(shí)間較單味鐵皮石斛組和單味玉竹組延長(zhǎng)（P＜0.01）；鐵皮石斛復(fù)方組又優(yōu)于玉竹復(fù)方組（P＜0.01）。鐵皮石斛復(fù)方組和玉竹復(fù)方組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），單味鐵皮石斛組和玉竹組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

3.4 小鼠一般癥狀和體征 給藥1周，給藥組小鼠明顯比陰性對(duì)照組小鼠活躍，對(duì)飲用水的需求較高，毛色更亮更健康。動(dòng)作更加敏捷，每次灌胃給藥時(shí)抓住的難度更大。

4 討論

鐵皮石斛是一種常用珍貴中藥，具有益胃生津,滋陰清熱的功效，主要成分有多糖、生物堿、多種人體必需的微量元素和氨基酸,另外還有酮類、酯類、酚、醇等。研究表明，多糖類物質(zhì)具有增強(qiáng)T細(xì)胞及巨噬細(xì)胞免疫活性、直接促進(jìn)淋巴細(xì)胞有絲分裂的作用，臨床上廣泛用于慢性萎縮性胃炎及降血糖、抗腫瘤、抗衰老和增強(qiáng)機(jī)體免疫力等多種疾病，而這些疾病的產(chǎn)生一定程度上都與體內(nèi)活性氧的代謝失調(diào)有關(guān)[3]。鐵皮石斛能改善甲亢型小鼠的虛弱癥狀，能對(duì)抗阿托品對(duì)兔唾液分泌的抑制作用，從而驗(yàn)證了鐵皮石斛的養(yǎng)陰生津功效，其所含酚類化合物均具有抗氧化活性，它們對(duì)三價(jià)鐵硫氰酸鹽的抗氧化活性強(qiáng)[4]。玉竹具有養(yǎng)陰潤(rùn)燥，生津止渴的功效，主要含多糖、甾體皂苷（鈴蘭苦苷、鈴蘭苷等）、黃酮及其糖苷（槲皮素苷等）、微量元素、氨基酸及其他含氮化合物，其中玉竹多糖是玉竹的主要有效成分，含量一般為6.51%～10.27%[5]，玉竹總氨基酸含量約為11.22%～12.20%，其中含有賴氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸7種人體必需氨基酸，以及精氨酸和組氨酸兩種人體半必需氨基酸。從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，單味鐵皮石斛抗疲勞作用要優(yōu)于單味玉竹?？赡茉?yàn)殍F皮石斛富含多糖、氨基酸以及多種人體必需的微量元素，多糖能顯著提高超氧化物歧化酶（SOD）水平，而氨基酸和微量元素能迅速給機(jī)體補(bǔ)充能量，使抗疲勞的效果更快更明顯。雖然玉竹也含有豐富的玉竹多糖及氨基酸，但是含量有所差異，導(dǎo)致在抗疲勞的作用上效果略亞于鐵皮石斛，其中原因還有待更進(jìn)一步的研究。已有研究表明，鐵皮石斛中的多糖是增強(qiáng)免疫的主要有效成分，能促進(jìn)機(jī)體體液免疫、細(xì)胞免疫功能和誘生多種細(xì)胞因子。鐵皮石斛多糖不僅能影響小鼠白細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞移動(dòng)抑制因子，而且能提高環(huán)磷酰胺模型小鼠非特異性免疫、細(xì)胞免疫和體液免疫功能[6]，其作用機(jī)制與增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能和NK細(xì)胞活性，調(diào)節(jié)外周CD4+、CD8+細(xì)胞和脾淋巴細(xì)胞CD4+/ CD8+，保護(hù)T淋巴細(xì)胞、刺激T淋巴細(xì)胞的增殖與分化，增加模型鼠胸腺或脾臟指數(shù)有關(guān)[7]。

表3 各組小鼠耐缺氧時(shí)間比較（±s）

表3 各組小鼠耐缺氧時(shí)間比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.01，**P＜0.05；與鐵皮石斛復(fù)方組比較，△P＜0.05

組別對(duì)照組單味鐵皮石斛組單味玉竹組鐵皮石斛復(fù)方組玉竹復(fù)方組只數(shù)55555給藥劑量（mL/d）0.4 0.4 0.4 0.4 0.4存活時(shí)間（min）19.92±2.12 24.52±2.32*△23.38±2.21*△28.66±1.28** 26.78±1.27**△

白術(shù)具有健脾益氣、燥濕利水、止汗、安胎的功效，還有延緩衰老、強(qiáng)壯作用，促進(jìn)細(xì)胞免疫功能，有保肝、利膽、抗腫瘤和鎮(zhèn)靜作用[8]。白術(shù)主要含揮發(fā)油，油中主要有蒼術(shù)酮、蒼術(shù)醇、蒼術(shù)醚、杜松腦,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，雙白術(shù)內(nèi)酯、蒼術(shù)內(nèi)酯等，并含有果糖、菊糖、白術(shù)多糖，多種氨基酸及維生素A類成分等[8]，單味白術(shù)能使TH細(xì)胞明顯增加，提高TH/TS比值，糾正T細(xì)胞亞群分布紊亂狀態(tài)，并能增加T淋巴細(xì)胞表面IL－2R的表達(dá)，白術(shù)可提高免疫抑制動(dòng)物脾細(xì)胞體外培養(yǎng)存活率，能延長(zhǎng)淋巴細(xì)胞壽命，促進(jìn)細(xì)胞免疫[9]。玉竹與鐵皮石斛搭配補(bǔ)氣藥白術(shù)后，可產(chǎn)生協(xié)同作用，相對(duì)于單味藥抗疲勞效果有顯著的提升。補(bǔ)氣藥與滋陰藥配伍，相輔相成，相得益彰，達(dá)到良好的抗疲勞作用。通過小鼠游泳實(shí)驗(yàn)和耐缺氧實(shí)驗(yàn)，顯示鐵皮石斛復(fù)方的抗疲勞效果明顯要優(yōu)于玉竹復(fù)方，說明鐵皮石斛與補(bǔ)氣藥配伍后可以發(fā)揮更大的藥效。

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（收稿：2014－03－28 修回：2014－09－18）

Comparative Study on the Anti-fatigue Effects Between Dendrobium Candidum and Polygonatum

LIN Li.Chinese Medical Hospital of Yunhe County,Yunhe(323600)Zhejiang,China

Objective To compare the anti－fatigue effects of Dendrobium candidum with that of Polygonatum.Methods Twenty－five ICR mice were randomly divided into negative control group,single herb Dendrobium candidum group,single herb Polygonatum group,Dendrobium candidum compound group,and Polygonatum compound group,with 5 mice in each group.All group were given the corresponding drugs for consecutive 7 days,then underwent the swimming test.After that,all mice rested for 2 days,then were intragastrically given the corresponding drug for 30 min and underwent hypoxia experiment.The differences between 2 groups were analyzed.Results The increase in weight was the biggest and swimming time and hypoxia－tolerant time were the longest in Dendrobium candidum compound group（8.60±0.69g,9.86±0.35min,28.66±1.28min）,followed by those in Polygonatum compound group（7.46±0.55g,9.02±0.45min,26.78±1.7min）,then those in single herb Dendrobium candidum group（6.40±1.14g, 8.87±1.00min,24.52±2.32min）,single herb Polygonatum group（5.60±1.20g,8.56±0.69min,2.38±2.21min）,with the least in Negative control group（4.84±0.98g,7.44±0.91min,19.92±2.12min）.There were significant differences between Dendrobium candidum compound group and single herb group and negative control group and between Dendrobium candidum compound group and Polygonatum compound group（P＜0.05）.Conclusion Both of Polygonatum and Dendrobium candidum have obvious anti－fatigue effect.The effect of single herb Polygonatum is slightly minor than that of single herb Dendrobium candidum.The Anti－fatigue effect of Dendrobium candidum compound evidently surpasses that of Polygonatum Compound.

Dendrobium candidum；Polygonatum；Atractylodesv；Anti－fatigue effects

浙江省云和縣中醫(yī)醫(yī)院中藥房（云和 323600）