肖樂宇 馬振芳 王新梅 李建偉

【摘 要】 目的 觀察ACP 215血細胞處理機制備的洗滌紅細胞和傳統(tǒng)手工法制備的洗滌紅細胞的質(zhì)量差異。方法 將40袋懸浮紅細胞隨機分為2組：機洗組和手工組，每組各20袋，2U/袋，分別對兩種方法制備的洗滌紅細胞的紅細胞回收率、白細胞清除率及血漿蛋白清除率進行比較。結(jié)果 使用ACP 215血細胞處理機制備的洗滌紅細胞，其紅細胞回收率及血漿蛋白清除率明顯優(yōu)于傳統(tǒng)手工法制備的洗滌紅細胞，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而白細胞清除率差別不明顯，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 ACP 215血細胞處理機洗滌制備的紅細胞質(zhì)量好，臨床使用安全可靠，值得推廣和應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 洗滌紅細胞；ACP215血細胞處理機；手工法；制備

【中圖分類號】 R446.11+3 【文獻標(biāo)識碼】 A

洗滌紅細胞是將保存期內(nèi)的濃縮紅細胞、懸浮紅細胞、少白細胞紅細胞或全血在無菌條件下用生理鹽水反復(fù)洗滌后制備而成的，其特點是去除了80%以上的白細胞、98%以上的血漿蛋白，保留了70%以上的紅細胞。使用該制品可以減少或避免血漿蛋白所致的過敏反應(yīng)，降低FNHTR的發(fā)生，也適用于IgA缺乏及肝腎功能不全的患者輸用。目前國內(nèi)制備洗滌紅細胞的方法有全自動血細胞處理機洗滌制備和傳統(tǒng)手工法洗滌制備，為進一步觀察兩種方法制備的洗滌紅細胞質(zhì)量的差異，我們于2014年3月將使用全自動血細胞處理機制備的洗滌紅細胞和手工法制備的洗滌紅細胞進行比較，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 ACP215血細胞處理機及一次性使用附件（美國血液技術(shù)公司），TSCD-Ⅱ無菌接管機（日本泰爾茂公司），CR-7型大容量冷凍離心機（日本工機株式會），全自動血細胞計數(shù)儀（日本希森美康公司），Nageotte細胞計數(shù)板（HORSHAM公司）；0.9%生理鹽水四聯(lián)袋（上海輸血技術(shù)公司），雙縮脲劑（自配）。

1.2 材料制備 抽取本站于2014年3月采集制備的保存期均在35天內(nèi)的懸浮紅細胞40袋，2U/袋（每200ml全血制備的紅細胞為1個U），隨機分為2組：機洗組和手工組，每組各20袋。機洗組使用ACP215血細胞處理機制備，首先用無菌接管機將懸浮紅細胞與血細胞處理機一次性使用附件相連接，安裝好管路，按照設(shè)定的程序進行洗滌，具體操作過程參照ACP215血細胞處理機CELL WASH操作手冊；手工組采用手工方法制備，首先將懸浮紅細胞與0.9%生理鹽水四聯(lián)袋用無菌接管機進行連接，將四聯(lián)袋中首袋生理鹽水加入懸浮紅細胞中，邊加邊混勻，加完后稱重配平，在溫度4℃、離心速度3400r/min、時間8min的條件下離心，離心后用分漿夾將上清液及白膜層擠入空袋中棄去。再將第二袋生理鹽水加入紅細胞中，同以上步驟，如此依次洗滌紅細胞3次，最后將剩下的一袋生理鹽水酌量加入紅細胞中，使最終洗滌紅細胞的體積在250ml±10%.具體操作過程參照《血站技術(shù)操作規(guī)程》[1]。紅細胞洗滌前后分別留樣備檢。

1.3 檢測方法 紅細胞的數(shù)量采用全自動血細胞計數(shù)儀檢測；殘余白細胞的數(shù)量采用Nageotte計數(shù)板檢測；血漿蛋白含量采用雙縮脲法檢測。試劑配制及檢測過程均嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》的要求操作[2]。紅細胞回收率（%）=（洗滌后紅細胞計數(shù)/洗滌前紅細胞計數(shù)）×100%，白細胞清除率（%）=（1-洗滌后白細胞計數(shù)/洗滌前白細胞計數(shù)）×100%，血漿蛋白清除率（%）=（1-洗滌后上清蛋白含量/洗滌前上清蛋白含量）×100%。

1.4 統(tǒng)計方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，應(yīng)用配對樣本的t檢驗進行統(tǒng)計，以P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

機洗組和手工組制備的洗滌紅細胞經(jīng)過檢測，其結(jié)果見表1。

3 討論

臨床輸血并不是絕對安全的，它有可能引發(fā)多種輸血不良反應(yīng)以及輸血傳播病毒的危險，不同的血液成分引發(fā)的輸血不良反應(yīng)發(fā)生率是不一樣的[3]，其中白細胞和血漿帶來的危險度最高，紅細胞和血小板則相對比較安全，而洗滌紅細胞由于去除了血液中絕大部分血漿和白細胞以及一些電解質(zhì)、枸櫞酸鹽和微聚物等物質(zhì)，從而明顯降低了輸血不良反應(yīng)的發(fā)生及傳播輸血相關(guān)疾病的風(fēng)險，臨床使用更安全可靠。目前國內(nèi)制備洗滌紅細胞的方法有全自動血細胞處理機洗滌法和傳統(tǒng)手工洗滌法，傳統(tǒng)手工洗滌法制備的時間較長，操作繁瑣，易受工作人員技術(shù)水平及離心機轉(zhuǎn)速、溫度等影響，造成制品質(zhì)量的不穩(wěn)定性，但由于比較經(jīng)濟，因而國內(nèi)多數(shù)血站仍采用手工法。而全自動血細胞處理機的應(yīng)用使得洗滌紅細胞的制備過程程序化、標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化，操作方便，節(jié)約人力，節(jié)省時間，保證了制品的質(zhì)量，但成本較高，國內(nèi)應(yīng)用較少。

血漿蛋白清除率是洗滌紅細胞質(zhì)量監(jiān)控的一項重要指標(biāo)。在原料血中蛋白的含量越高，則血漿蛋白清除率就越高[4]。在手工法洗滌制備中，我們發(fā)現(xiàn)隨著血漿蛋白清除率的增加，紅細胞回收率卻會出現(xiàn)下降的情況，二者具有無法調(diào)和的矛盾，而全自動血細胞處理機解決了這一難題，它不僅提高了血漿蛋白清除率，同時也增加了紅細胞的回收率。從本次試驗中可以看出，兩種方法制備的洗滌紅細胞均可以達到國家規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，全自動血細胞處理機制備的洗滌紅細胞的紅細胞回收率及血漿蛋白清除率明顯優(yōu)于手工法制備的，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），這與國內(nèi)相關(guān)的文獻報道基本相符[5，6]。另有學(xué)者認(rèn)為，最好不要使用保存期末的懸浮紅細胞做原料血[7]，如果制備洗滌紅細胞采用去白細胞懸浮紅細胞做原料血則效果會更好，紅細胞回收率可以提高5%-6%，而白細胞殘留量可以降低1000倍[8]。

總之，使用全自動血細胞處理機洗滌制備紅細胞更科學(xué)合理，制備的產(chǎn)品更安全可靠，完全可以替代手工法為臨床提供高質(zhì)量的血液制品，值得在血站大力推廣應(yīng)用。

參考文獻

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部.血站技術(shù)操作規(guī)程[S].2012版.

[2] 中華人民共和國衛(wèi)生部. 全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：337-338.

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[8] 劉穎，康煒，周世航.兩種原料血制備洗滌紅細胞的效果分析[J].臨床輸血與檢驗，2011，7（3）：267-268.