張寶棟　劉秀香

[摘要]目的：對(duì)奧利司他原料藥制備過程中的雜質(zhì)進(jìn)行分析。方法：采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定奧利司他在發(fā)酵、制備以及包裝的過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)，本次檢測(cè)色譜柱Agilent C18柱；流動(dòng)相；乙腈-水；紫外（UV）檢測(cè)波長195nm，流速：1.2mL/min。結(jié)果：奧利司他在發(fā)酵、制備以及包裝過程中均會(huì)由于微生物代謝、氧化、水解及降解等反應(yīng)引入或產(chǎn)生雜質(zhì)，不同包裝材料同樣會(huì)引起雜質(zhì)。結(jié)論：只有分析奧利司他原料藥制備過程中雜質(zhì)引入情況，才能進(jìn)一步采取解決措施，有效控制雜質(zhì)含量，提高藥品質(zhì)量。

[關(guān)鍵詞]奧利司他；原料藥制備過程；雜質(zhì)分析

奧利司他是全球唯一在售非處方減肥藥，超過四千萬人次使用并成功達(dá)到減重目的，廣泛受到消費(fèi)者的歡迎。奧利司他是強(qiáng)效特異性胃腸道脂肪酶抑制劑，其減重機(jī)制在于直接阻斷人體從食物中吸收脂肪，減小能量攝入，達(dá)到減重目的。該藥物作用于機(jī)體所產(chǎn)生的不良反應(yīng)較少，由于不作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，不會(huì)產(chǎn)生頭暈、心慌、失眠等情況；同時(shí)有效成分不會(huì)進(jìn)入血液循環(huán)，作用安全。但其原料藥在制備過程中產(chǎn)生雜質(zhì)的情況較多，本文圍繞奧利司他原料藥制備過程中的雜質(zhì)進(jìn)行分析，對(duì)控制雜質(zhì)含量，提高藥品質(zhì)量進(jìn)行探討。資料整理如下。

1.儀器與試劑

1.1儀器

高效液相色譜儀系統(tǒng)（AgilentC18）。

1.2試劑

色譜純（乙腈）；分析純（氫氧化鈉、甲醇、過氧乙酸、庚烷、鹽酸）。

1.3色譜條件

流動(dòng)相（乙腈：水=80：20）；色譜柱：Agilent C18；UV檢測(cè)波長：195nm；流速：1.2mL/min；進(jìn)樣量：20uL。

2.方法與結(jié)果

2.1雜質(zhì)分析

原料藥制備過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)主要包含發(fā)生反應(yīng)的副產(chǎn)物、未反應(yīng)完全的中間體以及未發(fā)生反應(yīng)的原料藥、溶劑等。特別對(duì)于有發(fā)酵工藝藥物來說，引入的雜質(zhì)種類與數(shù)量更多。以下對(duì)奧利司他制備中所可能引入的相關(guān)雜質(zhì)進(jìn)行簡單分析。

（1）發(fā)酵過程引入的雜質(zhì)。奧利司他是由前提藥物利普斯他汀通過發(fā)酵得來，在發(fā)酵過程中不可避免的引入了雜質(zhì)。通過分析發(fā)現(xiàn)，此過程中的雜質(zhì)主要是毒三素鏈霉菌次級(jí)代謝產(chǎn)物，其性質(zhì)與利普斯他汀差異不明顯，保留時(shí)間較接近，利用單純的層析或者萃取的方式很難去除，根據(jù)國際藥品注冊(cè)技術(shù)規(guī)范的要求，可改進(jìn)發(fā)酵工藝，有效控制及降低雜質(zhì)含量。除此之外，雜質(zhì)中還可能含有微生物的代謝產(chǎn)物，例如一些色素等，對(duì)于其可通過重結(jié)晶的方去除雜質(zhì)。

（2）氧化反應(yīng)產(chǎn)生的雜質(zhì)。奧利司他含有酯式結(jié)構(gòu)，容易發(fā)生氧化反應(yīng)。本研究中通過模擬加速氧化過程，發(fā)現(xiàn)圖譜中比標(biāo)準(zhǔn)品多出了5個(gè)雜質(zhì)峰，且主峰面積減少，說明奧利司他發(fā)生分解。通過分析雜質(zhì)峰出現(xiàn)的先后時(shí)間，總結(jié)得出，可以通過縮短制備時(shí)間、防止與氧化物質(zhì)過分接觸以及填充惰性氣體防止氧化的方式，有效對(duì)雜質(zhì)生成進(jìn)行控制。對(duì)于在奧利司他之前產(chǎn)生的雜質(zhì)可以通過結(jié)晶法去除，對(duì)于其后產(chǎn)生的雜質(zhì)可以通過層析聯(lián)合結(jié)晶的方式去除。

（3）自然降解過程引入的雜質(zhì)。實(shí)驗(yàn)表明，在含水的醇溶液里，本品會(huì)出現(xiàn)水解，在不含水的醇溶液里不會(huì)發(fā)生水解。因此在對(duì)奧利司他純化的過程中避免使用含水醇溶液，利用硅膠層析或極性有機(jī)溶劑層析結(jié)晶可去除雜質(zhì)。

（4）受熱分解產(chǎn)生的雜質(zhì)。制備奧利司他會(huì)經(jīng)過減壓濃縮的工序，受熱會(huì)使奧利司他分解，為除去這一過程所帶來的雜質(zhì)，可控制壓力及濃度，縮短時(shí)間，減少雜質(zhì)生成。另外可通過非極性溶劑結(jié)晶法去除由受熱分解產(chǎn)生的雜質(zhì)。

（5）遇酸、堿性物質(zhì)產(chǎn)生的雜質(zhì)。通過實(shí)驗(yàn)，營造酸性與堿性環(huán)境，都可觀察到奧利司他發(fā)生分解，通過比較，在堿性環(huán)境中的破壞作用最強(qiáng)，因此，在制備及保存過程中要嚴(yán)禁與酸性或堿性的物質(zhì)接觸。

（6）不同包裝材料引入的雜質(zhì)。制備奧利司他過程中，相關(guān)有機(jī)溶劑的使用較多，而大部分的有機(jī)溶劑對(duì)于聚乙烯材料都有溶解作用，若使用該種材料包裝藥品，會(huì)引入較多雜質(zhì)，因此在藥品的儲(chǔ)存過程中要盡量選擇耐有機(jī)溶劑腐蝕的材料。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，乳橡膠、聚乙烯等材料會(huì)引起較多雜質(zhì)，而采用聚丙烯或聚酰胺類材料，一般不會(huì)引入雜質(zhì)，因此在藥品包裝材料的選擇上要尤為注意。

3.討論

奧利司他是一種不進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)的脂肪酶抑制劑，主要采用微生物發(fā)酵工藝生產(chǎn)，由前體原料藥利普斯他汀經(jīng)過分離純化、氫化及結(jié)晶得到，制備工藝中通常涉及到有機(jī)溶劑萃取、打孔吸附、硅膠層析以及結(jié)晶等分離技術(shù)，引入雜質(zhì)的可能性比較大。通過本文研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵、氧化、受熱、強(qiáng)酸強(qiáng)堿以及不同的包裝材料都會(huì)引起不同的雜質(zhì)，因此制備時(shí)要尤為注意，避免新雜質(zhì)的引入，優(yōu)化制備工藝，提高藥品質(zhì)量。