吳丹，張辰辰，楊繼章，劉紅淼

(河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院藥劑科，石家莊 050031)

氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定香桂化濁膠囊中桂皮醛的含量*

吳丹，張辰辰，楊繼章，劉紅淼

(河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院藥劑科，石家莊 050031)

目的 建立氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定香桂化濁膠囊中桂皮醛含量。方法 采用HP-5彈性石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，載氣：氦氣，流速：1.0 mL·min-1，分流比：50：1，程序升溫，進(jìn)樣量1.0 μL。結(jié)果 香桂化濁膠囊中桂皮醛和其他成分的分離度良好，在0.02～4.00 mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 4。桂皮醛的平均加樣回收率為96.2%，RSD<2.11%。結(jié)論 該方法操作簡(jiǎn)便，定量準(zhǔn)確，適用于香桂化濁膠囊中桂皮醛的含量測(cè)定。

香桂化濁膠囊；桂皮醛；氣相色譜-質(zhì)譜法；含量測(cè)定

香桂化濁膠囊處方為河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院臨床應(yīng)用多年的經(jīng)驗(yàn)方，由肉桂、土大黃、廣藿香等組成。具有芳香醒脾、清化濕濁之功。主治因各種疾病后邪留未盡、脾胃內(nèi)傷所致長(zhǎng)期大便溏泄或有黏液、腹脹腸鳴、納呆或有低熱、舌苔白膩或白滑或見微黃、脈濡緩；主要用于慢性腸炎、真菌感染致腸炎證屬脾虛濕困的治療。關(guān)于本方制劑工藝、HPLC-PDA指紋圖譜、毒理學(xué)研究及該膠囊中百秋里醇、大黃素的含量測(cè)定已有報(bào)道[1-8]。鑒于香桂化濁膠囊在化學(xué)組成上是一個(gè)復(fù)雜體系，其主要的揮發(fā)油成分為桂皮醛和廣藿香醇，關(guān)于廣藿香醇的氣相色譜研究已有報(bào)道[3]，為更好控制香桂化濁膠囊的質(zhì)量，完善其檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，筆者在本實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜-質(zhì)譜(gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS)法[9-11]，建立香桂化濁膠囊中桂皮醛的含量測(cè)定方法。

1 儀器與材料

1.1 儀器 7890-5975N型氣相色譜-質(zhì)譜儀(美國Agilent公司 )；7890-5975N型彈性石英毛細(xì)管色譜柱(美國Agilent Technologies公司)；BS210S型電子分析天平(北京賽多利斯天平有限公司，量程：210 g，分度值：0.1 mg)；套式恒溫器(浙江新華醫(yī)療器械廠)；KQ2200E型超聲波清洗儀(頻率：40 kHz，功率：100 W，昆山市超聲儀器有限公司)，EYELA 旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀(上海愛郎儀器有限公司)。

1.2 試藥 乙酸乙酯(天津市凱通化學(xué)試劑有限公司，色譜純)，其他試劑均為分析純。香桂化濁膠囊(河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院制劑室，批號(hào)：120607，120611，120625)。桂皮醛對(duì)照品(四川省維克奇生物科技有限公司，批號(hào)：101114，純度：≥98%)。

2 方法與結(jié)果

2.1 GC-MS條件 HP-5彈性石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm) ；載氣：氦氣，流速：1.0 mL·min-1，分流比：50：1；采用程序升溫：起始溫度100 ℃，保持2 min，以3 ℃·min-1升到 130 ℃，保持5 min，再以10 ℃·min-1升到210 ℃ ，保持 5 min；進(jìn)樣口溫度230 ℃ ，進(jìn)樣量1.0 μL；電子轟擊(EI)離子源，離子源溫度230 ℃，電子能量70 eV；柱前壓65.072 kPa；四級(jí)桿質(zhì)量分析器；掃描方式：全掃描；質(zhì)核比范圍：10～400 amu。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對(duì)照品溶液的配制 取桂皮醛對(duì)照品20.031 8 mg精密稱定，置25 mL 量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，得對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的配制 取1粒膠囊內(nèi)容物，精密稱定0.391 7 g，加乙酸乙酯20 mL，超聲30 min，過濾，旋蒸至殘留液3 mL，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶，用乙酸乙酯稀釋至刻度。過篩孔內(nèi)徑0.45 μm微孔濾膜，取續(xù)濾液，搖勻作供試品溶液。

2.3 方法學(xué)驗(yàn)證

2.3.1 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)與專屬性實(shí)驗(yàn) 在上述色譜條件下，分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液各1.0 μL，注入氣質(zhì)聯(lián)用儀，色譜圖見圖 1。桂皮醛與其他成分分離良好，分離度> 1.5，理論板數(shù)>50 000。

2.3.2 線性關(guān)系考察 精密量取對(duì)照品溶液 0.25，0.5，1.0，2.0，2.5，5.0 mL置 10 mL量瓶中，分別用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻得 1～6號(hào)工作液。在上述色譜條件下，吸取1.0 μL，注入氣質(zhì)聯(lián)用儀，記錄色譜峰面積。以桂皮醛成分峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，濃度(C)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得線性回歸方程Y=281 786C+2×106，r=0.999 4，桂皮醛在0.02～4.00 mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3.3 檢測(cè)限和定量限 取線性最低點(diǎn)對(duì)照品溶液對(duì)倍稀釋，以S/N=3計(jì)，桂皮醛最低檢測(cè)限為0.75 μg·mL-1，以S/N=10計(jì)，桂皮醛定量限為2.51 μg·mL-1。

2.3.4 精密度實(shí)驗(yàn) 取 “2.2.2”項(xiàng)供試品溶液，重復(fù)進(jìn)樣 6次，計(jì)算桂皮醛的色譜峰峰面積RSD為1.64%，表明該方法精密度良好。

2.3.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取 “2.2.2”項(xiàng)供試品溶液，在制備后 0，2，4，8，12，24 h進(jìn)樣，桂皮醛色譜峰峰面積的RSD為1.76%，表明桂皮醛供試品溶液在 24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.6 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批號(hào)的香桂化濁膠囊，按“2.2.2”項(xiàng)制備供試品溶液6份，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，桂皮醛含量的RSD為1.81%，表明該方法的重復(fù)性良好。

2.3.7 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 取已知桂皮醛含量的同一批號(hào)樣品6份，每份約0.08 mg，加入對(duì)照品溶液(每毫升含桂皮醛0.1 mg) 1 mL，按 “2.2.2”項(xiàng)方法配制溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算加樣回收率。桂皮醛的回收率為96.2%，RSD為2.11%。

2.4 樣品含量測(cè)定 按 “2.2.2”項(xiàng)下方法制備 3批供試品溶液，進(jìn)樣1.0 μL，每份樣品進(jìn)樣 3次，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算香桂化濁膠囊中桂皮醛的含量。樣品含量測(cè)定結(jié)果見表1。根椐此結(jié)果，同時(shí)考慮藥材的來源以及制劑生產(chǎn)、貯藏等因素，以每粒膠囊0.39 g裝量計(jì)，暫定本品每粒含桂皮醛不得少于 0.48 mg。

表1 香桂化濁膠囊中桂皮醛成分的含量測(cè)定結(jié)果

Tab.1 Content determination of cinnamic aldehyde inXiangguiHuazhuocapsulesn=3

3 討論

本研究采用GC-MS法對(duì)香桂化濁膠囊中的桂皮醛含量進(jìn)行測(cè)定，通過對(duì)色譜和質(zhì)譜條件的優(yōu)化，比較不同流速、柱溫等，確定了測(cè)定香桂化濁膠囊中桂皮醛含量的方法，大大提高定量結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

香桂化濁膠囊中含有桂皮醛、百秋李醇、長(zhǎng)葉醛、甘菊藍(lán)、鄰甲氧基桂皮醛等多種揮發(fā)性成分，其極性和沸點(diǎn)相差較大，本實(shí)驗(yàn)采用程序升溫法，在較短的時(shí)間內(nèi)保證溶劑乙酸乙酯和其他低極性、低沸點(diǎn)成分達(dá)到良好分離。

A.陰性對(duì)照品；B.桂皮醛對(duì)照品；C.桂皮醛供試品；1.桂皮醛；2.百秋李醇；3.長(zhǎng)葉醛

A.negative control；B.cinnamic aldehyde control；C.sample of cinnamic aldehyde；1.cinnamic aldehyde；2.patchouli alcohol；3.Long leaf aldehyde

Fig.1 The gas chromatogram of cinnamic aldehyde of negative reference substance, reference substance and sample

本研究所建立的GC-MS分析色譜條件，精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性良好，采用HP-5毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定香桂化濁膠囊中桂皮醛的含量，該方法操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確可靠，可作為香桂化濁膠囊中桂皮醛的質(zhì)量控制。

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DOI 10.3870/yydb.2015.03.025

Determination of Cinnamic Aldehyde Content inXiangguiHuazhuoCapsules by Gas Chromatography-Mass Spectrometry

WU Dan, ZHANG Chenchen, YANG Jizhang, Liu Hongmiao

(DepartmentofPharmacy,theFirstHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050031,China)

Objective To establish a method for determining cinnamic aldehyde content inXiangguiHuazhuocapsules by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Methods The content of cinnamic aldehyde was determined by GC-MS.Separation was performed on a capillary column (30 m×0.25 mm, 0.25 μm) with HP-5 as the stationary phase.A programmed temperature was employed.The flow rate was 1 mL·min-1with He as carrier gas, and split ratio was 50：1.The injection volume was 1.0 μL. Results The cinnamic aldehyde was well isolated from the other ingredients.A good linear relationships of cinnamic aldehyde in range of 0.02-4.00 mg·mL-1was observed.The correlation coefficient was 0.999 4.The average recovery of cinnamic aldehyde was 96.2%, and RSD was less than 2.11%. Conclusion The method is simple, accurate and suitable for determination of cinnamic aldehyde content.

XiangguiHuazhuocapsules; Cinnamic aldehyde; Gas chromatography-mass spectrometry; Content determination

2014-02-23

2014-06-11

*河北省中醫(yī)藥管理局科研計(jì)劃課題資助項(xiàng)目(2013007)

吳丹(1989-)，女，河北保定人，碩士，研究方向：藥劑學(xué)。E-mail：1066912424@qq.com。

楊繼章(1957-)，男，河北邢臺(tái)人，主任藥師，教授，碩士研究生導(dǎo)師，研究方向：藥物新劑型、藥物穩(wěn)定性。電話：0311-85917352，E-mail：yjzh1957@163.com。

R286；R927.2

B

1004-0781(2015)03-0376-03