王娟莉，王 壘，行海艦，蹇 強(qiáng)

(西安市兒童醫(yī)院心血管內(nèi)科，陜西 西安710003)

川崎病患兒血清25-(OH)D3及T細(xì)胞亞群變化意義

王娟莉，王 壘，行海艦，蹇 強(qiáng)

(西安市兒童醫(yī)院心血管內(nèi)科，陜西 西安710003)

目的 通過檢測(cè)川崎病(KD)急性期血清25-羥維生素D3[25-(OH)D3]水平及T細(xì)胞亞群，探討其與KD冠脈損害的關(guān)系及可能機(jī)制。方法 選取西安市兒童醫(yī)院的KD患兒35例為病例組，依據(jù)心臟超聲檢查結(jié)果分為冠脈損害組(CAL)9例和非冠脈損害組(NCAL)26例；選取正常查體兒童25例為對(duì)照組。分別檢測(cè)其急性期血清25-(OH)D3值；同期檢測(cè)CAL組及NCAL組T淋巴細(xì)胞亞群，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 CAL組血清25-(OH)D3水平明顯高于NCAL組，經(jīng)比較有顯著性差異(t=3.681，P=0.001)。CAL組CD4/CD8明顯高于NCAL組，經(jīng)比較亦有顯著性差異(t=2.032，P=0.050)。結(jié)論 25-(OH)D3參與KD冠脈損害的發(fā)生，可能與其影響T細(xì)胞亞群分布有關(guān)。

川崎??；25-羥維生素D3；T細(xì)胞亞群；冠狀動(dòng)脈損傷

川崎病(Kawasaki disease，KD)是一種發(fā)熱伴皮膚黏膜、淋巴結(jié)損害的血管炎綜合征，多發(fā)于嬰幼兒，主要病理改變是全身中小動(dòng)脈炎，可引起冠狀動(dòng)脈炎、冠狀動(dòng)脈瘤、冠狀動(dòng)脈狹窄、瘤內(nèi)血栓形成等，甚至導(dǎo)致心肌梗死和猝死，嚴(yán)重威脅患者的生命，近年來已成為我國引起兒童后天性心臟病的主要疾病。目前認(rèn)為KD發(fā)病機(jī)制與體內(nèi)異常免疫激活有密切關(guān)系，特別是T淋巴細(xì)胞異?；罨茄軆?nèi)皮損傷誘發(fā)血管炎的關(guān)鍵。維生素D除調(diào)節(jié)機(jī)體的鈣和骨代謝外，對(duì)免疫系統(tǒng)有多種調(diào)節(jié)作用，T淋巴細(xì)胞是它的靶細(xì)胞之一，參于許多疾病的發(fā)生。本研究通過檢測(cè)KD患兒外周血25-羥維生素D3[25-(OH)D3]含量及T細(xì)胞亞群的分布情況，探討維生素D與冠狀動(dòng)脈損害的關(guān)系及可能機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

病例組：選取2011年3月至2013年7月在西安市兒童醫(yī)院兒科住院KD患兒35例作為病例組，均符合KD診斷標(biāo)準(zhǔn)，均為初治病例，未使用靜脈丙種球蛋白治療，并排除其它發(fā)熱性疾??；其中男26例，女9例；年齡4個(gè)月～4歲。依據(jù)入院時(shí)心臟超聲檢查結(jié)果將其分為冠脈損害組(CAL)9例和非冠脈損害組(NCAL)26例。對(duì)照組：同時(shí)選取健康查體兒童25例作為對(duì)照組。

1.2 研究方法

入院次日早晨空腹抽取患兒靜脈血3mL送檢，雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清25-(OH)D3水平；同時(shí)采集靜脈血抗凝，流式細(xì)胞儀檢測(cè)T細(xì)胞亞群CD3、CD4、CD8含量。同期測(cè)定對(duì)照組兒童血清25-(OH)D3水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組血清25-羥維生素D3的檢測(cè)情況

CAL組血清25-(OH)D3水平明顯高于NCAL組和對(duì)照組，經(jīng)比較均有顯著性差異(均P<0.05)，見表1。

表1 各組血清25-(OH)D3水平比較

注：a為NCAL與對(duì)照組比較；b為CAL組與NCAL組比較。

2.2 各組T細(xì)胞亞群的檢測(cè)情況

CAL組CD4/CD8明顯高于NCAL組，經(jīng)比較有顯著性差異(P=0.05)；兩組的CD3、CD4、CD8水平比較均無顯著性差異(均P>0.05)，見表2。

表2 各組細(xì)胞亞群水平比較

2.3 血清25-羥維生素D3水平與各組T細(xì)胞亞群相關(guān)性分析

血清25-(OH)D3水平與T細(xì)胞亞群各組經(jīng)Pearson相關(guān)性分析顯示，00.05，未見明顯相關(guān)。

3 討論

KD的發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明，但有研究表明，該病急性期存在免疫系統(tǒng)的高度活化，特別是T細(xì)胞的異?；罨捅姸嗉?xì)胞因子的參與在其發(fā)病機(jī)制上起著重要作用[1]。Schulte等[2]用模擬KD患兒冠狀動(dòng)脈損害的小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)，T細(xì)胞活化是干酪乳桿菌(LCCWE)誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈炎發(fā)展的必要因素。

維生素D除調(diào)節(jié)鈣、磷代謝外，是T/B細(xì)胞增殖的抑制劑。有研究發(fā)現(xiàn)，維生素D明顯下調(diào)CD4+細(xì)胞數(shù)量，同時(shí)上調(diào)CD8+細(xì)胞數(shù)量，與各種免疫疾病相關(guān)。其已經(jīng)被證實(shí)能改善多種自身免疫病及過敏性疾病[3-4]。1,25(OH)2D3是維生素D的活性形式，通過與細(xì)胞內(nèi)的維生素D受體(VDR)結(jié)合形成激素受體復(fù)合物，介導(dǎo)調(diào)節(jié)靶基因轉(zhuǎn)錄實(shí)現(xiàn)其生物學(xué)效用。CD4 T細(xì)胞是1,25(OH)2D3作用的直接靶點(diǎn)，能抑制Th細(xì)胞的增殖，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的產(chǎn)生[5]。彭華[6]發(fā)現(xiàn)VDR在KD患兒T細(xì)胞的表達(dá)明顯高于正常兒童，在體外將1,25(OH)2D3與KD患兒T細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，維生素D有抑制T細(xì)胞過度活化的作用。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)血清25-(OH)D3水平在KD合并CAL患兒中明顯升高，與NCAL組比較有顯著性差異，提示25-(OH)D3參與了冠狀動(dòng)脈炎的免疫反應(yīng)，但具體機(jī)理未明，可能是由于KD患兒過度活化的T細(xì)胞上高表達(dá)的VDR刺激維生素D的吸收、釋放，以抑制過度活化的CD4 T細(xì)胞，減輕機(jī)體的炎癥反應(yīng)。

成熟T淋巴細(xì)胞按CD抗原的不同可分為CD4淋巴細(xì)胞和CD8淋巴細(xì)胞兩個(gè)功能亞群，這兩種細(xì)胞的相互作用決定著機(jī)體的免疫狀態(tài)。一般情況下，CD4/CD8比值維持一定的動(dòng)態(tài)平衡，保持機(jī)體免疫功能穩(wěn)定，如果CD4/CD8比值發(fā)生改變，則引起免疫功能的紊亂[7]。本研究結(jié)果顯示KD患兒急性期CAL組較NCAL組CD4/CD8比值明顯增高，提示KD冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張患兒存在更為顯著的免疫系統(tǒng)的激活，T細(xì)胞亞群比例改變，即CD4 T細(xì)胞的數(shù)量和功能相對(duì)提高，促進(jìn)B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生自身抗體，引起了廣泛的血管炎性反應(yīng)。本研究中血清25-(OH)D3水平與CD4/CD8比值存在明顯的一致傾向，可能由于CD4 T細(xì)胞相對(duì)活化刺激維生素D釋放,在一定程度上起到增強(qiáng)免疫抑制的作用。

本研究中，血清25-(OH)D3水平與T細(xì)胞亞群各組未見明顯相關(guān)，考慮與樣本量小有關(guān)，也可能由于25-(OH)D3不僅參與調(diào)節(jié)CD4細(xì)胞活化，還可以影響Th細(xì)胞的分化，進(jìn)一步研究維生素D與KD患兒的T細(xì)胞亞群變化，對(duì)探討KD冠脈損害機(jī)制可能具有重要意義。

[1]黃瀅,吳柱國.川崎病發(fā)病機(jī)制的研究現(xiàn)狀[J].廣東醫(yī)學(xué)院院報(bào),2010,28(1):57-61.

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[專業(yè)責(zé)任編輯：孫曉勉]

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《中國婦幼健康研究》編輯部

Changes and significance of serum 25-hydroxy vitamin D3and T cell subsets in Kawasaki disease

WANG Juan-li, WANG Lei, XING Hai-jian, JIAN Qiang

(DepartmentofCardiology,Xi’anChildren’sHospital,ShaanxiXi’an710003,China)

Objective To detect serum 25-hydroxy vitamin D3[25-(OH)D3] levels and T cell subsets in acute phase of Kawasaki disease (KD) and to analyze the relationship between them and KD coronary artery damage as well as possible mechanisms. Methods According to echocardiography, 35 cases of KD in Xi’an Children’s Hospital were divided into coronary artery lesion (CAL) group (n=9) and non-coronary artery lesion (NCAL) group (n=26). Another 25 cases of healthy children were selected as controls. Serum 25-(OH)D3levels at acute phase and T lymphocyte subsets were detected for data analysis. Results Serum 25-(OH)D3level of CAL group was significantly higher than that of NCAL group (t=3.681,P=0.001). At the same time, CD4/CD8 was significantly higher in CAL group than in NCAL group (t=2.032,P=0.050). Conclusion The study shows that 25-(OH)D3participates in KD coronary artery damage, which may due to its influence on the distribution of T cell subsets.

Kawasaki disease(KD)；25-hydroxy vitamin D3[25-(OH)D3]；T cell subsets；coronary artery lesion

2014-08-25

王娟莉(1971-)，女，副主任醫(yī)師，碩士，主要從事小兒心血管專業(yè)的研究。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.02.065

R725.4

A

1673-5293(2015)02-0355-02