干擾素輔助治療對(duì)慢性乙型肝炎患者血清TH1/TH2及IL-12水平影響研究

肖素芬，舒永水，張光榮

(1.南昌大學(xué)醫(yī)院 內(nèi)科，江西 南昌 330038，中國(guó)；2.南昌三三四醫(yī)院 傳染科，江西 南昌 330024，中國(guó))

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干擾素輔助治療對(duì)慢性乙型肝炎患者血清TH1/TH2及IL-12水平影響研究

肖素芬1Δ，舒永水1，張光榮2

(1.南昌大學(xué)醫(yī)院 內(nèi)科，江西 南昌 330038，中國(guó)；2.南昌三三四醫(yī)院 傳染科，江西 南昌 330024，中國(guó))

目的 探究干擾素輔助治療對(duì)慢性乙型肝炎患者血清TH1/TH2及IL-12水平影響。方法 收集慢性乙型肝炎患者105例，隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組53例，對(duì)照組52例，2組患者均實(shí)施非抗病毒治療，對(duì)照組在此基礎(chǔ)上，采取干擾素輔助治療，治療結(jié)束后對(duì)比分析2組患者臨床療效、血清TH1/TH2及IL-12水平。結(jié)果 與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組患者的臨床總有效率較高(P<0.05)；實(shí)驗(yàn)組患者治療后IL-2水平較低，IL-4、IL-12水平較高(P<0.05)。結(jié)論 干擾素輔助治療能夠提高慢性乙型肝炎患者的臨床有效率與生活質(zhì)量，推測(cè)其與降低血清IL-2水平，升高IL-4及IL-12水平有關(guān)。

干擾素；輔助治療；慢性乙型肝炎；TH1/TH2；IL-12

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)是全球范圍內(nèi)流行性較強(qiáng)的傳染性肝臟疾病，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全世界感染HBV約20億人口，其中慢性乙型肝炎感染者約為3.5億人次，每年超過100萬人死于慢性乙型肝炎病情加重導(dǎo)致的肝衰竭、肝硬化以及原發(fā)性肝細(xì)胞癌，危害患者生命健康，帶來嚴(yán)重精神以及經(jīng)濟(jì)壓力[1]。臨床治療慢性乙型肝炎以抑制HBV，減輕肝細(xì)胞炎癥壞死以及肝纖維化，抑制肝臟失代償、肝硬化等多種并發(fā)癥為總體指導(dǎo)原則，采用抗病毒、免疫療法、抗炎癥、抗纖維化以及對(duì)癥治療等多種形式，常規(guī)治療以抗病毒為主[2]。隨著醫(yī)療水平不斷提高，市面上乙型肝炎病毒藥物增多，主要分為以下六種，干擾素-α(interferon，INF-α)、聚乙二醇干擾素(peg interference，Peg-IFN)、拉米夫定、阿德福韋、替比夫定以及恩替卡韋，臨床使用獲得良好療效[3]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，干擾素輔助治療對(duì)慢性乙型肝炎臨床療效佳，通過免疫調(diào)節(jié)對(duì)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞具有激活作用，有效清理病毒易感肝細(xì)胞，其輔助治療增強(qiáng)免疫應(yīng)答率。本文基于大量數(shù)據(jù)研究，探究干擾素輔助治療對(duì)慢性乙型肝炎患者血清TH1TH2及IL-12水平影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2012年10月～2014年6月南昌大學(xué)醫(yī)院內(nèi)科的慢性乙型肝炎患者105例， 男性66例，女性39例，年齡24～50歲，平均年齡(34.86±5.59)歲，采用隨機(jī)數(shù)字分配法，隨機(jī)分配為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組，其中實(shí)驗(yàn)組53例，男性34例，女性19例，年齡25～50歲，平均年齡(35.74±5.94)歲；對(duì)照組52例，男性32例，女性20例，年齡24～48歲，平均年齡(33.68±5.05)歲，2組患者性別、年齡、病情等一般資料均相仿，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合以下條件：①診斷符合《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》[4]中慢性乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)具備以下臨床特點(diǎn)：乏力、惡心、畏食、腹脹以及肝區(qū)疼痛等癥狀；②HBeAg陽(yáng)性，HBV大于等于2000 IU/mL，ALT大于等于2倍正常值；③年齡大于18歲，患者均為自愿參與本實(shí)驗(yàn)，并簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①藥物過敏史，接受免疫抑制劑治療的患者，中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)小于1.0×109/L，血小板計(jì)數(shù)小于50×109/L；②甲亢、感染、高血壓、糖尿病以及嚴(yán)重心、肝、腎等多臟器功能障礙或衰竭；③失代償期肝硬化、惡性腫瘤、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)疾??；④合并有藥物性肝損害、 自身免疫性肝病、酒精性肝病、遺傳代謝性肝病以及肝移植等肝臟疾病。

1.2 方法

1.2.1 治療方法:2組患者均實(shí)施非抗病毒治療，包括拉米夫定片(安徽貝克生物制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20103618)100 mg，阿德福韋酯(廣東肇慶星湖生物科技股份有限公司星湖生化制藥廠，國(guó)藥準(zhǔn)字H20100028)10 mg，替比夫600 mg以及恩替卡韋片(中美上海施貴寶制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20052237)0.5 mg，1次/天，并根據(jù)治療指南對(duì)阿德福韋酯耐藥性實(shí)施拉米夫定(100 mg/d)加量治療。對(duì)照組在此基礎(chǔ)上，采取注射用重組人干擾素γ(上海生物制品研究所，國(guó)藥準(zhǔn)字S19990060)100萬IU皮下注射，每周一次，連續(xù)治療48周，治療期間對(duì)患者肝功能進(jìn)行監(jiān)測(cè)觀察，并對(duì)患者出現(xiàn)的癥狀做出及時(shí)處理。

1.2.2 觀察指標(biāo)

療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):治療后觀察2組患者臨床療效，療效判定標(biāo)準(zhǔn)如下，采用AU640全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行肝功能監(jiān)測(cè)，病原學(xué)檢查HBeAg陽(yáng)性，肝功能各項(xiàng)指標(biāo)恢復(fù)正常，全身乏力、惡心、畏食、腹脹以及肝區(qū)疼痛等癥狀消失顯效；病原學(xué)檢查HBeAg陽(yáng)性，肝功能各項(xiàng)指標(biāo)基本恢復(fù)正常全身乏力、惡心、畏食、腹脹以及肝區(qū)疼痛等癥狀明顯緩解為有效；病原學(xué)檢查HBeAg陽(yáng)性，肝功能各項(xiàng)指標(biāo)紊亂，全身乏力、惡心、畏食、腹脹以及肝區(qū)疼痛等癥狀并未緩解或加重為無效。記錄并分析總有效率，總有效率=[(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/本組患者例數(shù)]×100%。

2組患者血清炎癥因子檢測(cè):于治療前后2組患者采集清晨空腹靜脈血3 mL，進(jìn)行血清分離，取上清液，收集其血清標(biāo)本于-70 ℃冰柜內(nèi)冷凍保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)方法檢測(cè)患者血清炎癥因子水平包括：白介素-2(Interleukin 2，IL-2)、白介素-4(Interleukin 4，IL-4)以及白介素-12(Interleukin 12，IL-12)水平。IL-2、IL-4以及IL-12 ELISA檢測(cè)試劑盒，購(gòu)買于武漢博士的生物技術(shù)有限公司，酶標(biāo)儀購(gòu)于北京泰澤瑞達(dá)科技有限公司。操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，IL-2、IL-4以及IL-12檢測(cè)波長(zhǎng)430 nm。

2 結(jié)果

2.1 2組患者療效比較 研究結(jié)果顯示，治療后與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組臨床總有效率較高(χ2=4.11，P<0.05)。見表1。

表1 2組患者療效比較[n(%)]Tab.1 Comparison of clinical effect between two groups[n(%)]

#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group

2.2 2組患者血清IL-2、IL-4以及IL-12比較 研究結(jié)果顯示，2組IL-2水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；IL-4、IL-12水平明顯升高(P<0.05)；與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組IL-2水平較低(P<0.05)；IL-4、IL-12水平較高(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者血清IL-2、IL-4及IL-12濃度比較Tab.2 Comparison of IL-2,IL-4 and IFN-12 in serum between

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group post-treatment

3 討論

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染導(dǎo)致的慢性傳染性疾病[5]。慢性乙型肝炎患者機(jī)體出現(xiàn)樹突狀細(xì)胞 (dendritic cell，DC)缺失，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能降低，DC是一種抗原提呈細(xì)胞，具有細(xì)胞以及體液免疫應(yīng)答的功能?，F(xiàn)代研究統(tǒng)計(jì)顯示，我國(guó)乙型肝炎病毒攜帶人群超過1.3億人，是全世界范圍內(nèi)攜帶人數(shù)最多的國(guó)家，乙型肝炎抗原(HBsAg)攜帶率高達(dá)38.18%，約有2000萬慢性乙型肝炎患者，并呈逐年增高趨勢(shì)[6]。HBV病毒通過血液、母嬰以及性傳染等途徑傳播，由于使用醫(yī)療器械、侵入性診療等皮膚粘膜也會(huì)導(dǎo)致疾病的傳播，HBeAg陰性的慢性乙型肝炎攜帶者易發(fā)展轉(zhuǎn)移為肝硬化以及原發(fā)性肝細(xì)胞癌等疾病[7]。乙型肝炎感染，80%患者自愈，其中10～15%轉(zhuǎn)變?yōu)槁砸倚透窝祝∏檫w延幾年后，少數(shù)出現(xiàn)慢性活動(dòng)性肝炎，甚至隱匿轉(zhuǎn)化為肝硬化，極個(gè)別轉(zhuǎn)化為肝癌[8]。因此，乙型肝炎的防治以及診療形勢(shì)尤為嚴(yán)峻，有效規(guī)范化治療慢性乙型肝炎是目前臨床醫(yī)療研究重點(diǎn)。臨床治療采取抗病毒為主，對(duì)于治療時(shí)機(jī)以及藥物選擇尤為重要。干擾素類藥物具有抗病毒以及免疫調(diào)節(jié)的雙重功效，即使停藥后仍具有持續(xù)的免疫應(yīng)答功能，臨床將干擾素作為乙型肝炎治療的一線藥物。為了提高臨床治療效果，非病毒藥物配合干擾素輔助治療，共同刺激病毒抗原，促使特異性T淋巴細(xì)胞的增殖分化，并通過樹突狀細(xì)胞發(fā)揮有效的呈遞功能，具有穩(wěn)定的臨床療效[9]。本研究顯示，治療后與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組臨床總有效率較高(P<0.05)，證實(shí)干擾素輔助治療對(duì)慢性乙型肝炎患者臨床療效佳，并且對(duì)于患者采取更為個(gè)性化以及優(yōu)化的治療手段，對(duì)評(píng)估病情以及醫(yī)師選擇治療方案，以及初診、復(fù)診具有良好的應(yīng)用價(jià)值。

干擾素-α是一種具有良好抗病毒治療效果的臨床常用藥物，總體應(yīng)答率偏低，但經(jīng)過反復(fù)研究探討，得出其輔助治療有效提高抗病毒效果，提高抗病毒個(gè)體化治療的療效。HBV相關(guān)抗原具有激活T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為效應(yīng)性T細(xì)胞的功能，從而分泌相應(yīng)的TH1/TH2細(xì)胞因子，可以根據(jù)對(duì)TH1/TH2的研究對(duì)乙型肝炎病毒的發(fā)展以及轉(zhuǎn)歸進(jìn)行研究分析，并根據(jù)免疫分子水平進(jìn)行探討乙型肝炎的發(fā)展。TH1使機(jī)體內(nèi)輔助對(duì)抗細(xì)胞，主要由IL-12誘發(fā)，其執(zhí)行的細(xì)胞因子是IFN-γ，因此對(duì)于其水平的檢測(cè)反應(yīng)TH1水平；TH2主要由IL-4驅(qū)動(dòng)誘發(fā)，其中最大的執(zhí)行細(xì)胞是肥大細(xì)胞，對(duì)IL-4水平檢測(cè)反應(yīng)TH2水平。曾有研究顯示，乙型肝炎患者較正常人相比，IL-2水平升高，IL-4水平降低[10]。本研究顯示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組IL-2水平較低，IL-4水平較高(P<0.05)，證實(shí)干擾素輔助治療對(duì)慢性乙型肝炎患者改善患者免疫分子水平，病情恢復(fù)增快。

乙型肝炎患者體內(nèi)的細(xì)胞因子如IL-12等，分泌量較大，促使免疫應(yīng)答反應(yīng)的發(fā)生，并刺激TH1細(xì)胞分化，影響患者體內(nèi)TH1以及TH2的平衡。IL-12是一種具有細(xì)胞活性的因子，對(duì)機(jī)體抗病毒以及抗腫瘤中占據(jù)重要地位。曾有研究顯示，慢性乙型肝炎患者體內(nèi)IL-12水平較低，免疫應(yīng)答受到抑制，病情反復(fù)遷延[11]。本研究顯示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組血清IL-12水平較高(P<0.05)，證實(shí)干擾素輔助治療對(duì)慢性乙型肝炎患者具有促進(jìn)機(jī)體免疫應(yīng)答，緩解病情的功效。

本研究通過對(duì)慢性乙型肝炎患者的臨床療效、血清TH1/TH2及IL-12水平進(jìn)行研究，證實(shí)了干擾素輔助治療能夠提高慢性乙型肝炎患者的臨床有效率與生活質(zhì)量，推測(cè)其與降低血清IL-2水平，升高IL-4及IL-12水平有關(guān)。在下一步研究中，將進(jìn)行藥理學(xué)方面研究，對(duì)本實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)現(xiàn)象做進(jìn)一步研究。

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(編校：譚玲)

Effect of interferon adjunctive therapy on TH1/TH2 and IL-12 of patients with chronic hepatitis B

XIAO Su-fen1Δ, SHU Yong-shui1, ZHANG Guang-rong2

(1. Department of Internal Medicine, Nanchang University Hospital, Nanchang 330038, China; 2. Department of Infectious Diseases, 334 Hospital of Nanchang, Nanchang 330024, China)

ObjectiveTo explore effect of interferon adjunctive therapy on TH1/TH2 and IL-12 of patients with chronic hepatitis B.Methods105 cases of chronic hepatitis B patients were collected. 105 cases were divided into the control group and the experiment group. 52 cases in the control group were treated with non antiviral therapy, 53 cases in the experiment group were treated on the base of the control group with interferon adjunctive therapy .Clinical curative effect, serum TH1/TH2 and IL-12 were compared after the treatment.ResultsCompared with the control group, the clinical total effective rate was higher (P< 0.05); the IL-2 level in the experiment group was lower (P< 0.05); the IL-4, IL-12 level in the experiment group were higher (P< 0.05).ConclusionInterferon assisted therapy can improve the clinical efficiency and quality of life in patients with chronic hepatitis B, and it can be related to the decrease the level of erum IL-2, and rise the level of IL-4 and IL-12.

interferon; adjuvant therapy; chronic hepatitis B; TH1/TH2; IL-12

肖素芬，通信作者，女，本科，副主任醫(yī)師，研究方向:消化及傳染內(nèi)科臨床治療，E-mail：shufxiao70@163.com。

R512.6

A

1005-1678(2015)11-0083-03