董曉坤程 龍王皓婷范 暢張彥昌王 芳趙瑞霞

（1邯鄲市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河北邯鄲 056005；2邯鄲市飼料工業(yè)辦公室，河北邯鄲 056005；邯鄲曲周動(dòng)物預(yù)控中心，河北曲周 056001）

豬病防控

邯鄲市規(guī)模豬場(chǎng)偽狂犬病現(xiàn)狀調(diào)查

董曉坤1程 龍1王皓婷1范 暢1張彥昌2*王 芳1趙瑞霞3

（1邯鄲市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河北邯鄲 056005；2邯鄲市飼料工業(yè)辦公室，河北邯鄲 056005；邯鄲曲周動(dòng)物預(yù)控中心，河北曲周 056001）

摘要：針對(duì)邯鄲市規(guī)模豬場(chǎng)偽狂犬病的現(xiàn)狀進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)偽狂犬病毒在邯鄲市規(guī)模豬場(chǎng)普遍存在，gB抗體陽(yáng)性率達(dá)到91.9%，gpI抗體陽(yáng)性率達(dá)到47.9%。非免疫抗體陽(yáng)性率較高提示豬場(chǎng)應(yīng)對(duì)偽狂犬病予以凈化。

關(guān)鍵詞：邯鄲；豬場(chǎng)；偽狂犬?。徽{(diào)查

偽狂犬?。≒R）是由皰疹病毒科的甲型皰疹病毒引起的家畜和多種野生動(dòng)物的急性傳染病。豬是該病毒的儲(chǔ)存宿主和傳染源。該病毒感染的一個(gè)重要特點(diǎn)是急性感染后病毒可在宿主體內(nèi)長(zhǎng)期潛伏，且維持終生?？諝鈧鞑ナ窃摬《咀钪饕臄U(kuò)散途徑。豬場(chǎng)一旦感染該病難以凈化，該病也被農(nóng)業(yè)部規(guī)定為種豬場(chǎng)凈化病種之一。近幾年隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，該病也在邯鄲地區(qū)廣泛流行，臨床病例逐年增加，疫情不容樂觀。最近邯鄲市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心在全市范圍內(nèi)做了一次豬偽狂犬病抗體水平情況的專項(xiàng)調(diào)查，現(xiàn)報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本

采集邯鄲市區(qū)14個(gè)大型規(guī)模豬場(chǎng)不同生長(zhǎng)期豬的全血705份，靜置過(guò)夜，離心取血清，冷藏備用。所有采樣豬只均按照正常免疫程序免疫過(guò)PRV gpI缺失疫苗，且未使用過(guò)普通PRV疫苗。

1.1.2 試劑和儀器

⑴試劑

豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測(cè)試劑盒、豬偽狂犬病病毒gpI 抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京愛德士元亨生物科技有限公司。

⑵儀器

酶標(biāo)儀Anthos 2010 購(gòu)自英國(guó)Biochrom公司；不同規(guī)格的移液器購(gòu)自eppendorf、Tomos公司。

1.2 方法和判斷

1.2.1 方法

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：使用兩倍稀釋的血清在PRV抗原包被的微孔中進(jìn)行。在第一次的孵育階段，樣本中的包括gpI抗體在內(nèi)的PRV抗體與包被板上的抗原反應(yīng)。洗滌后，將酶標(biāo)抗PRV單克隆抗體加到微孔板中，并在第二次孵育中競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合病毒抗原。如果被檢血清中沒有PRV抗體，酶標(biāo)單克隆抗體與抗原的反應(yīng)被阻斷。反應(yīng)后，未反應(yīng)的酶標(biāo)抗體被洗去，加入底物/顯色劑溶液，在酶的存在下，底物轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N能與顯色劑反應(yīng)并產(chǎn)生藍(lán)色的物質(zhì)。使用酶標(biāo)儀測(cè)量在650 nm波長(zhǎng)下的吸收值A(chǔ)(650)。被檢樣本的A(650)值除以陰性對(duì)照的平均A(650)值，計(jì)算出樣本/陰性值（S/N）。樣本中PRV抗體的含量與其A(650)和S/N值成反比。

1.2.2 判斷

PRV gB抗體陽(yáng)性，表明以前曾感染PRV野毒株或應(yīng)用過(guò)普通弱毒疫苗、滅活疫苗或gE缺失疫苗；PRV gpI抗體陽(yáng)性，表明以前曾感染PRV野毒株或應(yīng)用過(guò)傳統(tǒng)弱毒疫苗或滅活疫苗gB抗體陽(yáng)性，而gpI抗體陰性，表明豬免疫過(guò)gpI缺失疫苗；如果gB抗體和gpI抗體均陽(yáng)性，而樣本豬只免疫過(guò)gpI缺失疫苗，未免疫過(guò)普通弱毒疫苗、滅活疫苗，表明樣本豬曾感染過(guò)PRV野毒株。

2　結(jié)果

本次試驗(yàn)共檢測(cè)705份豬血清，gB抗體陽(yáng)性數(shù)648份，陽(yáng)性率為91.9%；gpI抗體陽(yáng)性數(shù)338份，陽(yáng)性率47.9%；gpI抗體陽(yáng)性豬場(chǎng)11個(gè)，占被檢豬場(chǎng)的78.6%，其中8個(gè)豬場(chǎng)感染率高于60%，3個(gè)豬場(chǎng)感染率在50%左右，3個(gè)豬場(chǎng)沒有檢測(cè)到gpI抗體。47.9%的樣本檢出有g(shù)pI抗體，提示這些豬曾感染過(guò)PRV野毒株，詳見表1。

表1　豬偽狂犬gB抗體和gpI抗體監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)表

3　討論

⑴調(diào)查結(jié)果顯示豬偽狂犬病已在邯鄲市大多數(shù)豬場(chǎng)普遍存在，非免疫抗體陽(yáng)性率高達(dá)47.9%。

⑵通過(guò)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，凡免疫過(guò)基因缺失苗的豬場(chǎng)，即使gpI抗體陽(yáng)性，豬群并無(wú)普遍的偽狂犬病的臨床表現(xiàn)，說(shuō)明基因缺失苗免疫效果較好，對(duì)豬場(chǎng)起到了保護(hù)作用。

⑶由于偽狂犬病毒感染的“長(zhǎng)期潛伏”的重要特點(diǎn)，gpI抗體陽(yáng)性的豬場(chǎng)將長(zhǎng)期攜帶偽狂犬病毒，不凈化此病，豬場(chǎng)生產(chǎn)將始終存在安全隱患。

⑷凈化偽狂犬病的主要手段

首先是主動(dòng)免疫。接種基因缺失苗是目前較好的保護(hù)措施。其次是加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。在寒冷季節(jié)該病易流行時(shí)，注意豬舍的防寒保暖；不同生產(chǎn)期豬群更換飼料時(shí)，要循序漸進(jìn)，注意飼料量的變化，及時(shí)添加微量元素和礦物質(zhì)，增強(qiáng)機(jī)體抵抗力；還要做好環(huán)境衛(wèi)生、消毒滅源工作，減少和切斷傳染源，嚴(yán)格人員、車輛進(jìn)出，謝絕閑人參觀生產(chǎn)重地，無(wú)害化處理糞便及病死豬。最后，應(yīng)用豬偽狂犬病病毒gpI抗體檢測(cè)試劑，連續(xù)監(jiān)測(cè)，剔除gpI抗體陽(yáng)性豬，一到兩年可達(dá)到凈化目的。

中圖分類號(hào)：S858.28

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4645（2015）09-0077-02

收稿日期：2015-02-05

*通訊作者：張彥昌，E-mail：ybemama@126.com