陳紅梅 王秀蘭 翠 平 蘇都那布其 烏恩奇

(1.內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028001;2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028001;3. 內(nèi)蒙古民族大學(xué)研究生 內(nèi)蒙古 通遼 028000)

蘇格木勒是蒙醫(yī)臨床上最常用蒙藥之一，尤其作為“腎之好”在治療腎臟疾病的復(fù)方制劑中出現(xiàn)頻率最高。蒙藥蘇格木勒的種類很多，但臨床常用的有查干蘇格木勒、寶如蘇格木勒、烏蘭蘇格木勒［1］。這3 種蘇格木勒藥味、藥性、藥能及藥力有所不同，其臨床適應(yīng)癥也有一定的差異［2］。查干蘇格木勒、寶如蘇格木虎治腎寒腰痛。烏蘭蘇格木勒主要用于治療下寒，腰痛，尿頻，遺精，肌肉拘痛等［3］。蒙醫(yī)臨床上，根據(jù)不同病情選用不同蘇格木勒藥材。關(guān)于3 種蘇格木勒化學(xué)成分及藥理作用方面有不少研究記載，但其腎功能保護(hù)作用的比較研究報(bào)道較少。為了回答3 種蘇格木勒是否具有腎功能保護(hù)作用，三者之間是否存在差異等問(wèn)題，進(jìn)行了此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器：BS-200 邁瑞全自動(dòng)生化分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司);TG16-WS 臺(tái)式高速離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司);YP1201N 電子天平(上海恒平科學(xué)儀器有限公司);HH-W600 數(shù)顯三用恒溫水箱(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)。

1.1.2 藥品試劑：查干蘇格木勒(120410649)、寶如蘇格木勒(120410228)、烏蘭蘇格木勒(120419522)購(gòu)自安國(guó)市祁瑞中藥材有限責(zé)任公司，均已內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院生藥鑒定教研室鑒定;硫酸慶大霉素注射液(1210081)河南輔仁懷慶堂制藥有限公司;甘油(20101025)天津光復(fù)科技發(fā)展有限公司;羧甲基纖維素鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);多聚甲醛(20100329)天津光復(fù)精細(xì)化工研究所;水合氯醛(20120414)天津市天力化學(xué)試劑有限公司;尿素氮試劑盒(201102)中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品;肌酐試劑盒(201116)中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品;

1.1.3 藥品配制：取3 種蘇格木勒的粉末用0.5%CMC-Na 溶液配成混懸液，水提取物用0.5%CMC-Na 溶液配制成提取物溶液，揮發(fā)油用加入食用橄欖油稀釋備用。

1.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：180 ～220g wistar(SPF 級(jí))大鼠、20 ～22g 昆明種小鼠，由長(zhǎng)春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(吉)2011-0004。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 慶大霉素致腎損傷實(shí)驗(yàn)［4］：取wistar 大鼠60(體重180 ～220g)只，按體重隨機(jī)分為5 組，即空白組、模型組、查干蘇格木勒組、寶如蘇格木勒組、烏蘭蘇格木勒組等?？瞻捉M和模型組按體重(2mL/100g)灌胃給0.5%CMC-Na 溶液，3 種蘇格木勒的給藥組均按體重灌胃給藥(2.57g/kg)，共15d，模型組和給藥組第5d 腹腔注射硫酸慶大霉素100mg/(kg.d-1)，連續(xù)10d。末次給藥后，稱量每組大鼠體重、麻醉，從腹主動(dòng)脈取血、分取血清、按照試劑盒說(shuō)明測(cè)定血清尿素(BUN)、肌酐(Cre)等指標(biāo)。同時(shí)取腎臟稱重，計(jì)算腎臟指數(shù)。

1.2.2 甘油致腎損傷實(shí)驗(yàn)［4］：取wistar 大鼠60(180 ～220g)只，分組和給藥方法同上，共給15d。給藥第3d 和第13d 在24h 禁水之后除正常組外每只大鼠肌肉注射50%甘油10mL/kg 引起腎損傷。第二次注射甘油48h 后稱重、麻醉、腹主動(dòng)脈取血、分取血清、按照試劑盒說(shuō)明測(cè)定血清尿素(BUN)、肌酐(Cre)等指標(biāo)。同時(shí)取腎臟稱重，計(jì)算腎臟指數(shù)。

1.2.3 小鼠游泳實(shí)驗(yàn)［5，6］：取昆明種小鼠40 只，體重18 ～22g，雌雄兼用，按體重隨機(jī)分成4 組，即查干蘇格木勒組、寶如蘇格木勒組、烏蘭蘇格木勒組。按4.28g/(kg. d-1)劑量灌胃給相應(yīng)蒙藥0.5%CMC-Na 混懸液0.2mL/10g，空白組灌胃同體積0.5%CMC-Na 混懸液，共給藥7d。末次給藥30min 后，稱小鼠體重并做好記錄。使其尾部負(fù)5%體積量的硬幣，在水深20cm、水溫20℃的游泳箱中游泳，記錄小鼠自開(kāi)始游泳至死亡的時(shí)間。

1.2.4 小鼠耐缺氧實(shí)驗(yàn)［7，8］：取昆明種小鼠40 只，體重18～22g，雌雄兼用，分組和給藥方法同上，共給藥7d。末次給藥30min 后，將小鼠放入預(yù)先加5g 鈉石灰的250mL 磨口瓶中，密封瓶口，以存活時(shí)間為指標(biāo)記錄。

2 結(jié)果

2.1 蘇格木勒粉末對(duì)腎損傷動(dòng)物傷模型的影響

2.1.1 慶大霉素致腎損傷實(shí)驗(yàn)：結(jié)果表明，與正常組比較，模型組大鼠血清Cre、BUN 及腎臟指數(shù)明顯升高;與模型組比較，查干蘇格木勒組BUN 及腎臟指數(shù)明顯降低，寶如蘇格木勒組腎臟指數(shù)顯著降低，烏蘭蘇格木勒組Cre、BUN 及腎臟指數(shù)均無(wú)顯著差異，但均有降低趨勢(shì)，見(jiàn)表1。

表1 蘇格木勒粉末對(duì)GM 致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

表1 蘇格木勒粉末對(duì)GM 致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

注：與正常組比較，※p ＜0.05，※※p ＜0.01;與模型組比較，△p ＜0.05。

組別 n 給藥量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 腎臟指數(shù)(%)96.1 ±16.7 8.97 ±1.96 31.7 ±1.84 0.79 ±0.06模型組 12 — 159 ±105※ 24.4 ±15.1※※ 29.0 ±7.10 1.27 ±0.16※※查干蘇格木勒組 12 2.571 111 ±31.7 14.1 ±6.52△ 29.1 ±3.86 1.01 ±0.09△△寶如蘇格木勒組 12 2.571 117 ±49.0 14.0 ±11.3 26.1 ± 2.29 1.07 ± 0.15△烏蘭蘇格木勒組 12 2.571 131 ±57.1 17.1 ±11.0 27.1 ±3.62 1.22 ±0正常組 12 —.23

2.1.2 甘油致腎損傷實(shí)驗(yàn)：結(jié)果表明，與正常組比較，模型組大鼠血清BUN 及腎臟指數(shù)明顯升高;與模型組比較，查干蘇格木勒和烏蘭蘇格木勒組BUN 明顯降低，寶如蘇格木勒組血清指標(biāo)及各給藥組腎臟指數(shù)均無(wú)顯著差異，見(jiàn)表2。

表2 蘇格木勒粉末對(duì)甘油致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

表2 蘇格木勒粉末對(duì)甘油致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

注：與正常組比較，※※p ＜0.01;與模型組比較，△p ＜0.05，△△p ＜0.01。

組別 n 給藥量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 腎臟指數(shù)(%)58.9 ±6.44 8.58 ±0.96 29.0 ±2.08 0.78 ±0.07模型組 12 — 65.4 ±8.91 14.0 ±1.49※※ 28.1 ±2.11 1.05 ±0.22※※查干蘇格木勒組 12 2.571 60.2 ±8.89 9.22 ±1.94△△ 27.7 ±2.40 1.14 ±0.20寶如蘇格木勒組 12 2.571 74.7 ±22.9 12.6 ±4.13 28.5 ±1.83 1.35 ±0.48烏蘭蘇格木勒組 12 2.571 62.3 ±10.0 11.2 ±2.10△正常組 12 —27.8 ±1.47 1.29 ±0.29

2.2 蘇格木勒水提取物對(duì)腎損傷動(dòng)物傷模型的影響

2.2.1 慶大霉素致腎損傷實(shí)驗(yàn)：結(jié)果表明，與正常組比較，模型組血清Cre 和BUN 明顯升高。與模型組比較，查干蘇格木勒組血清ALB 明顯降低，寶如蘇格木勒組、烏蘭蘇格木勒組血清Cre、BUN 及ALB 均無(wú)顯著性差異，見(jiàn)表3。

表3 蘇格木勒水提物對(duì)GM 致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

表3 蘇格木勒水提物對(duì)GM 致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

注：與正常組比較，※※p ＜0.01;與模型組比較，△△p ＜0.01。

組別 n 給藥量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 腎臟指數(shù)(%)69.9 ±12.3 8.06 ±1.65 25.0 ±2.70 0.73 ±0.04模型組 12 — 139 ±31.3※※ 19.3 ±9.49※※ 26.7 ±2.41 1.29 ±0.23※※查干蘇格木勒組 12 0.439 127 ±33.4 19.6 ±8.19 23.2 ±2.65△△ 1.58 ±0.24△寶如蘇格木勒組 12 0.653 150 ±43.6 19.0 ±11.2 27.2 ±2.27 1.19 ±0.19烏蘭蘇格木勒組 12 0.506 118 ±33.5 16.7 ±6.75 26.7 ±3.16 1.21 ±0正常組 12 —.13

2.2.2 甘油致腎損傷實(shí)驗(yàn)：與正常組比較，模型組血清Cre 和BUN 明顯升高。與模型組比較，查干蘇格木勒組血清BUN 明顯降低;烏蘭蘇格木勒組Cre 顯著升高;寶如蘇格木勒組血清Cre、BUN 均無(wú)顯著性差異，但均有降低趨勢(shì)，見(jiàn)表4。

表4 蘇格木勒水提物對(duì)甘油致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

表4 蘇格木勒水提物對(duì)甘油致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

注：與正常組比較，※p ＜0.05、※※p ＜0.01;與模型組比較，△p ＜0.05、△△p ＜0.01。

組別 n 給藥量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 腎臟指數(shù)(%)69.9 ±12.3 8.06 ±1.65 25.0 ±2.70 0.73 ±0.04模 型 組 12 — 100 ±24.1※※ 12.4 ±4.76※ 22.5 ±1.96 1.80 ±0.35※※查干蘇格木勒組 12 0.439 88.1 ±18.0 8.28 ±2.63△ 22.8 ±1.58 1.17 ±0.41△△寶如蘇格木勒組 12 0.653 96.4 ±34.0 9.97 ±3.55 22.4 ±0.96 1.03 ±0.26△△烏蘭蘇格木勒組 12 0.506 139 ±22.7△△ 12.2 ±2.96 23.8 ±1.68 1.20 ±0.46正常組 12 —△△

2.3 蘇格木勒揮發(fā)油對(duì)腎損傷動(dòng)物傷模型的影響

2.3.1 慶大霉素致腎損傷實(shí)驗(yàn)：與正常組比較，模型組血清BUN 明顯升高，ALB 明顯降低，Cre 無(wú)顯著性差異。與模型組比較，查干蘇格木勒組血清BUN 明顯降低，ALB 明顯升高;寶如蘇格木勒組和烏蘭蘇格木勒組血清ALB 均明顯升高，Cre 和BUN 無(wú)顯著性差異，見(jiàn)表5。

表5 蘇格木勒揮發(fā)油對(duì)GM 致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

表5 蘇格木勒揮發(fā)油對(duì)GM 致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

注：與正常組比較，※p ＜0.05、※※p ＜0.01;與模型組比較，△p ＜0.05、△△p ＜0.01。

組別 n 給藥量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 腎臟指數(shù)(%)94.3 ±13.4 7.06 ±1.63 27.8 ±3.00 0.65 ±0.08模 型 組 12 — 120 ±7.31 17.9 ±15.0※ 22.9 ±1.71※※ 1.04 ±0.14※※查干蘇格木勒組 12 0.3 102 ±18.4 6.88 ±1.99△ 25.1 ±1.71△△ 0.77 ±0.05△△寶如蘇格木勒組 12 0.1 135 ±69.2 21.8 ±14.0 25.3 ±1.16△△ 0.95 ±0.11△△烏蘭蘇格木勒組 12 0.2 125 ±42.7 10.1 ±2.80 29.6 ±3.67△△ 0.92 ±0.10正常組 12 —△△

2.3.2 甘油致腎損傷實(shí)驗(yàn)：與正常組比較，模型組血清BUN 明顯升高，ALB 明顯降低。與模型組比較，查干蘇格木勒組血清BUN 均明顯降低，ALB 明顯升高;寶如蘇格木勒組和烏蘭蘇格木勒組血清BUN 明顯升高，Cre 無(wú)顯著性差異，見(jiàn)表6。

表6 蘇格木勒揮發(fā)油對(duì)甘油致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

表6 蘇格木勒揮發(fā)油對(duì)甘油致腎損傷大鼠血清指標(biāo)及腎臟指數(shù)的影響(±s)

注：與正常組比較，※p ＜0.05、※※p ＜0.01;與模型組比較，△p ＜0.05、△△p ＜0.01。

組別 n 給藥量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 腎臟指數(shù)(%)94.3 ±13.4 7.06 ±1.63 27.75 ±3.00 0.65 ±0.08模 型 組 12 — 83.0 ±13.9 12.5 ±3.91※※ 24.8 ±2.84※ 1.11 ±0.22※※查干蘇格木勒組 12 0.3 94.3 ±12.1 6.42 ±1.29△△ 28.1 ±2.68△ 0.77 ±0.09△△寶如蘇格木勒組 12 0.1 256. ±139 52.3 ±23.0△△ 27.2 ±3.52 1.24 ±0.17烏蘭蘇格木勒組 12 0.2 300 ±212 49.4 ±28.9△△ 25.8 ±6.85 1.32 ±0.26正常組 12 —△

2.4 游泳實(shí)驗(yàn)：與正常組比較，除了烏蘭蘇格木勒低劑量組，各給藥組均明顯延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間;查干蘇格木勒及寶如蘇格木勒低劑量組比相應(yīng)的高劑量組更明顯延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間。其中寶如蘇格木勒低劑量組延長(zhǎng)效果較突出。耐缺氧實(shí)驗(yàn)中，各給藥組與空白對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表7。

表7 蒙藥蘇格木勒對(duì)小鼠游泳時(shí)間及耐缺氧時(shí)間的影響(±s)

表7 蒙藥蘇格木勒對(duì)小鼠游泳時(shí)間及耐缺氧時(shí)間的影響(±s)

注;與正常組比較※p ＜0.05，※※p ＜0.01。

組 別 n 給藥量(g/kg.d-1)游泳時(shí)間(min)耐缺氧時(shí)間(min 12.06 ±4.77 30.29 ±7.72查干蘇格木勒組10 4.28 18.20 ±7.35※※ 29.92 ±4.84寶如蘇格木勒組10 4.28 17.88 ±6.57※ 27.91 ±3.65烏蘭蘇格木勒組正常組 10 —10 4.28 12.62 ±5.35 28.28 ±5.74)

3 討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蒙藥3 種蘇格木勒及其不同提取物對(duì)慶大霉素致腎損傷大鼠模型及甘油致腎損傷大鼠模型均有不同程度的腎功能保護(hù)作用。其中查干蘇格木勒及其不同提取物的腎功能保護(hù)作用較突出。甘油致腎損傷實(shí)驗(yàn)中寶如蘇格木勒揮發(fā)油和烏蘭蘇格木勒揮發(fā)油均明顯提高血清BUN 水平，并烏蘭蘇格木勒水提取物明顯提高Cre 水平，其原因有待進(jìn)一步研究。小鼠游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，查干蘇格木勒、寶如蘇格木勒可明顯延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間。3 種蘇格木勒腎功能保護(hù)作用機(jī)制需要進(jìn)一步研究，尤其是查干蘇格木勒的作用機(jī)制值得深入研究。

蘇格木勒是蒙藥中“腎之好”，其功能主治的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)內(nèi)涵包括了治療以腎臟為主的泌尿系疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病及消化系統(tǒng)疾病等更廣泛的內(nèi)容。因此，應(yīng)結(jié)合蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論，開(kāi)展更深入廣泛的實(shí)驗(yàn)研究，以逐步闡明其現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵。

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