解慧梅　蘇志國　任寶波

摘要：對泰州地區(qū)36家羊場開展支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)查，發(fā)病嚴(yán)重的病例進(jìn)行剖檢，收集的207份臨床樣本（肺臟和鼻腔棉拭子）均進(jìn)行細(xì)菌和支原體培養(yǎng)。結(jié)果表明：207份臨床樣本中均分離到支原體菌株，湖羊的發(fā)病率明顯高于其他品種，3月齡以下的羔羊發(fā)病率明顯高于其他年齡段羊，此結(jié)果為泰州地區(qū)羊支原體肺炎的防控提供了科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：羊；支原體肺炎；流行病學(xué)調(diào)查；泰州

中圖分類號： S858.265 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）03-0194-02

羊支原體性肺炎又稱羊傳染性胸膜肺炎，是由絲狀支原體引起的一種高度接觸性傳染病。該病為引起綿羊和山羊咳嗽、氣喘、漸進(jìn)性消瘦以及肺間質(zhì)增生性炎癥的呼吸道傳染病[1]。胡景韶等首次分離到國內(nèi)1株綿羊支原體，證明我國存在該病原[2]。本病在我國云南、四川、甘肅、寧夏、新疆、河北等地均有報(bào)道[3-5]，尚未見有關(guān)江蘇羊支原體肺炎的研究報(bào)道。羊支原體性肺炎是威脅羊養(yǎng)殖的重要傳染病，一年四季均可發(fā)生，冬春季節(jié)發(fā)病率明顯上升[3]。隨著泰州市養(yǎng)羊業(yè)的快速發(fā)展，羊支原體性肺炎的感染給養(yǎng)羊業(yè)構(gòu)成了更大威脅。為給羊傳染性支原體肺炎的防治提供必要的流行病學(xué)資料，筆者于2013年冬至2014年春對泰州地區(qū)羊患支原體性肺炎進(jìn)行了調(diào)查。本研究采用回顧性調(diào)查與現(xiàn)場調(diào)查相結(jié)合的方法，針對發(fā)病原因、發(fā)病特點(diǎn)、臨床發(fā)病率、病死率等情況進(jìn)行調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對象和內(nèi)容

在泰州市高港區(qū)、海陵區(qū)、姜堰區(qū)、泰興市、靖江市和興化市6個(gè)地區(qū)的主要羊場進(jìn)行羊支原體性肺炎流行病學(xué)調(diào)查。調(diào)查內(nèi)容包括發(fā)病品種、發(fā)病年齡、發(fā)病率、病死率、臨床癥狀、免疫接種情況等。對發(fā)病嚴(yán)重的羊進(jìn)行病理剖檢、支原體培養(yǎng)。

1.2 方法

1.2.1 樣本 處死具有咳嗽、呼吸困難、鼻孔流漿液性或膿性鼻液等癥狀的病羊并進(jìn)行剖檢，觀察病理變化，采集鼻腔棉拭子和肺臟，低溫條件下送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行支原體分離鑒定。

1.2.2 培養(yǎng)基 FM-4 培養(yǎng)基[6]。

1.2.3 病原分離培養(yǎng)

將鼻腔棉拭子接種于FM-4培養(yǎng)基。肺臟樣本取健患交界處組織0.2 g，放入2 mL FM-4培養(yǎng)基中勻漿，3 000 r/min離心 6 min，用0.45 μm濾器過濾上清液，取0.2 mL濾液接種于裝有1.8 mL FM-4液體培養(yǎng)基的試管中進(jìn)行倍比稀釋，稀釋到10-7，全部放入37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)4～5 d，若有支原體生長培養(yǎng)基會變?yōu)槌赛S色，將其轉(zhuǎn)種于FM-4固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過純化得到純培養(yǎng)物。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種羊支原體肺炎發(fā)病情況

[JP+1]采用走訪方式對泰州地區(qū)36家羊場進(jìn)行羊支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)查，主要品種包括波爾山羊、白山羊、湖羊，其中波爾山羊場3家、白山羊場5家、湖羊場20家、[JP+1]混養(yǎng)8家，發(fā)現(xiàn)各羊場的羊均有不同程度發(fā)病。不同品種的羊均可發(fā)生支原體性肺炎，湖羊的發(fā)病率明顯高于波爾山羊和白山羊（表1）。

2.4 臨床癥狀

羔羊通常全群發(fā)病。發(fā)病初期羊明顯食欲不振，精神沉郁，體溫升高，鼻孔流出清亮的漿液性鼻液，咳嗽。發(fā)病中后期病羊表現(xiàn)為明顯呼吸困難，清晨劇烈咳嗽，可見連續(xù)性痙攣性咳嗽，鼻液多轉(zhuǎn)為黏液性或膿性，體溫升高至40 ℃ 以上，食欲銳減，迅速消瘦，部分病羊可見流淚、眼瞼腫脹，并有膿性分泌物。這時(shí)病羊開始出現(xiàn)胸膜肺炎變化，叩診有實(shí)音區(qū)，聽診呈支氣管呼吸音和摩擦音，按壓胸壁表現(xiàn)敏感，疼痛。最后病羊倒臥，極度衰弱委頓，常發(fā)生臌脹和腹瀉，調(diào)查中有些被誤診為腹瀉病。發(fā)病羊喜擠臥圈舍角落不愛走動，加劇羊支原體肺炎傳播。一旦出現(xiàn)本病，傳播迅速，個(gè)別羊場羔羊最高發(fā)病率達(dá)70%左右，一般病程8～15 d，個(gè)別羊病程可長達(dá)1個(gè)月以上。發(fā)病的前8～12 d每天死亡率在5%以上，隨后病死率逐漸降低，最終病死率在50%以上。

2.5 病理剖檢變化

取發(fā)病羊進(jìn)行病理剖檢，病變多發(fā)生在胸部，胸腔常有淡黃色液體，其中有纖維蛋白凝塊。病變主要在肺臟，其他器官不明顯。肺呈暗紅色，間質(zhì)增寬，肺門淋巴腫大出血，肺臟形成不同區(qū)域局灶性病變，主要發(fā)生在尖葉、心葉、中間葉，病灶大小不等，形狀不規(guī)則，呈紫紅色，質(zhì)地堅(jiān)硬，與周邊肺組織界限明顯。切開氣管和肺組織時(shí)流出帶泡沫的黏液。個(gè)別嚴(yán)重病例胸膜粗糙變厚，肺部表面呈灰白色，并有黃白色纖維蛋白片膜附著。急性病例還可見肝、脾、腎腫大，膽囊腫脹，以及腎臟膜下小點(diǎn)溢血。病程延長者肺肝變區(qū)機(jī)化，結(jié)締組織增生，甚至有包囊化的壞死灶。

2.6 細(xì)菌培養(yǎng)

無菌操作取肺臟實(shí)質(zhì)接種于血清營養(yǎng)瓊脂和伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基、肉湯培養(yǎng)基，經(jīng)37 ℃培養(yǎng)24 h，無任何細(xì)菌生長。

2.7 支原體培養(yǎng)

無菌操作取較嚴(yán)重的207份樣本進(jìn)行支原體分離培養(yǎng)，用改良FM-4液體培養(yǎng)基，經(jīng)37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)4～5 d，207份樣品培養(yǎng)基均由紅色逐漸變?yōu)槌赛S色，菌液澄清透明、無菌膜、無渾濁現(xiàn)象。把支原體轉(zhuǎn)種到改良FM-4固體培養(yǎng)基，經(jīng)37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)5～7 d，即可看到針尖大小乳白色菌落，放大鏡下可看到中間隆起、邊緣整齊、不透明、分散或聚集的圓形菌落，隨著培養(yǎng)的繼續(xù)，菌落逐漸變大，由此可判斷207份樣本均為羊支原體感染。

3 結(jié)論與討論

羊支原體性肺炎是由絲狀支原體亞種引起的一種高度接觸性傳染病，在臨床癥狀和病理變化上，與羊巴氏桿菌病很相似，但病料染色鏡檢，觀察到細(xì)小的多形狀性菌體，而非兩極著色的卵圓狀巴氏桿菌。有些病例會出現(xiàn)腹瀉癥狀，要注意與羊巴氏桿菌病和大腸桿菌病的鑒別診斷，以免發(fā)生誤診。近年來的研究結(jié)果表明，引起羊支原體性肺炎的病原是綿羊肺炎支原體和絲狀支原體亞種。綿羊肺炎支原體既可感染山羊也可感染綿羊，絲狀支原體亞種只感染山羊。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，泰州地區(qū)山羊與綿羊均有感染發(fā)病，而綿羊的發(fā)病率明顯高于山羊，說明泰州地區(qū)主要流行的為綿羊肺炎支原體。

本次調(diào)查的部分養(yǎng)殖戶表示曾采用山羊傳染性胸膜肺炎滅活疫苗進(jìn)行預(yù)防接種，但支原體性肺炎仍有發(fā)生，預(yù)防效果不明顯。究其原因可能是，泰州地區(qū)主要流行綿羊肺炎支原體，而采用的疫苗多為山羊支原體山羊肺炎亞種，對綿羊肺炎支原體沒有免疫保護(hù)性。這亦可解釋調(diào)查中綿羊（湖羊）患病率和病死率均高于山羊的現(xiàn)象。

羊支原體肺炎主要通過呼吸道排出病原進(jìn)行傳播，接觸性、傳染性很強(qiáng)。一旦發(fā)現(xiàn)該病，應(yīng)及時(shí)對患病羊進(jìn)行隔離，對廄舍、用具等進(jìn)行消毒，對尚無明顯癥狀的羊逐頭檢查，有疑似感染者及時(shí)隔離觀察?？蛇x用對支原體和絲狀支原體亞種均有敏感性的藥物進(jìn)行治療，同時(shí)對健康羊進(jìn)行緊急預(yù)防免疫接種，有效控制羊支原體肺炎疫情的蔓延。

羊支原體性肺炎是威脅羊養(yǎng)殖的重要傳染病，病羊和帶菌羊是主要的傳染源，隨著養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展，科學(xué)的飼養(yǎng)管理和疫病防治越來越凸顯出重要性，在加強(qiáng)科學(xué)飼養(yǎng)管理，冬季做好衛(wèi)生及保溫工作之外，為杜絕外疫，提倡自繁自養(yǎng)，對新引入的羊要執(zhí)行嚴(yán)格的檢疫制度，進(jìn)行隔離檢疫，觀察半個(gè)月以上確定無病并進(jìn)行必要的免疫預(yù)防后，才能引種混群飼養(yǎng)。

參考文獻(xiàn)：

[1]Carmichael L E，George T D，Sullivan N D，et al. Isolation，propagationand characterization studies of an ovine Mycoplasma responsible for proliferative interstitial pneumonia[J]. Cornell Vet，1972，62（4）：654-679.

[2]胡景韶，胡誠隆，蔣學(xué)良，等. 一種由支原體感染的綿羊增生性間質(zhì)性肺炎的研究[J]. 中國獸醫(yī)雜志，1982（5）：2-6.

[3]李 劼，楊增岐，剡根強(qiáng)，等. 新疆石河子地區(qū)綿羊支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)查[J]. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2005，26（12）：109-110.

[4]Guo H. Serological investigation on Mycoplasma oviovipneumoniae in Qinghai Province[J]. Animal Husbandry and Feed Science，2009，1（4/5）：34-35.

[5]逯忠新，鄧光明，梁桂香，等. 羊肺炎支原體病調(diào)查[J]. 中國獸醫(yī)科技，1993，23（9）：15-16.

[6]張 莉，王作艷，孫繼國，等. 綿羊肺炎支原體的微生物學(xué)特性的研究[J]. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，26（3）：221-224.

[7]畢丁仁，王桂枝. 動物霉形體及其研究方法[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998：83-92.