補(bǔ)中益氣湯對(duì)運(yùn)動(dòng)疲勞后大鼠腸道影響的實(shí)驗(yàn)研究

王蓓蓓 王雪梅

關(guān)鍵詞：補(bǔ)中益氣湯；胃動(dòng)素；離體腸管中圖分類號(hào)：R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1007 - 2349（ 2015） 02 - 0066 - 02補(bǔ)中益氣湯出自金代李東垣的《脾胃論》，目前被公認(rèn)為是治療脾胃病及甘溫除大熱的代表方。主要藥物組成為黃芪、人參、陳皮、柴胡、白術(shù)、升麻、當(dāng)歸、甘草（炙）。運(yùn)動(dòng)性疲勞是指在競(jìng)技運(yùn)動(dòng)過程中發(fā)生的一種疲勞癥狀，具有特殊的運(yùn)動(dòng)特色。中醫(yī)把苦力、勞役、強(qiáng)力舉重、持重運(yùn)行、疾走等勞動(dòng)或運(yùn)動(dòng)都稱為“勞”，而競(jìng)技運(yùn)動(dòng)可視為一種比勞動(dòng)強(qiáng)度更大的劇烈活動(dòng)，由于活動(dòng)強(qiáng)度大，對(duì)筋骨肌肉和臟腑功能的影響很大，精氣和能量的耗損更大，更易引起疲勞。由于大負(fù)荷量運(yùn)動(dòng)能損耗機(jī)體精氣血津液和能量物質(zhì)，累及心肝脾腎等臟腑，導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)能力下降，此與中醫(yī)的“虛證”十分相似，故應(yīng)將運(yùn)動(dòng)性疲勞歸屬于中醫(yī)“勞倦”范疇。中醫(yī)認(rèn)為脾為后天之本，氣血生化之源，脾主四肢肌肉，與運(yùn)動(dòng)關(guān)系密切。故補(bǔ)脾益氣法是防治運(yùn)動(dòng)性疲勞的主要治法之一。而補(bǔ)中益氣湯為代表方劑。本實(shí)驗(yàn)旨在說明不同劑量的補(bǔ)中益氣湯對(duì)運(yùn)動(dòng)疲勞后大鼠腸道影響情況。1 實(shí)驗(yàn)材料1.1試驗(yàn)藥物補(bǔ)中益氣湯劑量參考：《方劑學(xué)》[1]。將8味藥材洗凈，第一次加8倍量水浸泡30 min，提取30 min，濾過；第2次加6倍水提取，濾過；合并兩次濾液，靜置沉淀，取上清液；繼續(xù)煎熬濃縮，得浸膏，4℃冰儲(chǔ)備用。使用時(shí)取補(bǔ)中益氣湯浸膏，按照出膏率折算出生藥量并稱取相應(yīng)重量。高、中、低劑量分別為每10 g體重0.102，0.034，0.011 g生藥。1.2試劑 胃動(dòng)素由北京華英生物技術(shù)研究所提供并進(jìn)行放免檢測(cè)。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成熟清潔級(jí)SD大鼠，體重200 - 250g，雌性，50只，標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，飼料及墊料由購(gòu)自昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（滇）2011 - 004。1.4實(shí)驗(yàn)主要設(shè)備 Powerlab八通道生理信號(hào)記錄系統(tǒng)，生產(chǎn)廠家：澳大利亞，ADlnstrument；型號(hào)：ML 118；名稱：QuadBridge，Chart5分析軟件；臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，生產(chǎn)廠家：長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司，型號(hào)：TGL - 20M。2實(shí)驗(yàn)方法2.1實(shí)驗(yàn)分組取大鼠50只，雌性，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只。具體如下：第1組為空白對(duì)照組（以下簡(jiǎn)稱空白組），第2組為運(yùn)動(dòng)組（以下簡(jiǎn)稱運(yùn)動(dòng)組），第3組為先服用補(bǔ)中益氣湯低劑量后運(yùn)動(dòng)組（以下簡(jiǎn)稱低劑量組），第4組為先服用補(bǔ)中益氣湯中劑量后運(yùn)動(dòng)組（以下簡(jiǎn)稱中劑量組），第5組為先服用補(bǔ)中益氣湯高劑量后運(yùn)動(dòng)組（以下簡(jiǎn)稱高劑量組）。2.2實(shí)驗(yàn)方法5組大鼠實(shí)驗(yàn)前禁食12h，自由飲水。將第3、4、5組大鼠分別灌入補(bǔ)中益氣湯低、中、高劑量。灌胃后將第2、3、4、5組大鼠分別在胸前掛一個(gè)約大鼠體重12%的重物后，置于長(zhǎng)100 cm，寬50 cm，高50 cm的泳槽中游泳，當(dāng)大鼠游至水從耳下淹到耳上，其身體下沉?xí)r，處于疲勞階段后，將五組大鼠摘眼球取血，后處死，迅速剖腹，分離腸系膜。由十二指腸處輕輕剪取腸段，將腸段處理后放入臺(tái)氏液中，并連接Powerlab八通道生物信號(hào)記錄系統(tǒng)，待腸管收縮平穩(wěn)后，觀察腸管平滑肌活動(dòng)曲線情況。對(duì)照觀察結(jié)果的差異，使用sPss軟件作出統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。并將所取血液放置肝素抗凝試管中搖勻，4℃低溫高速離心15min（ 2000r/min），取上層血漿，于一20℃冰箱凍存，按放免規(guī)定進(jìn)行操作。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1血漿胃動(dòng)素（MTL）情況見表1。與空白組相比，運(yùn)動(dòng)組大鼠血漿MTL顯著提高（P<0.05）；與運(yùn)動(dòng)組比較，低、中劑量組大鼠血漿MTL均有不同程度的降低，其中中劑量組血漿MTL降低最明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與運(yùn)動(dòng)組比較，高劑量組大鼠的血漿MTL有所增加，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。3.2大鼠離體腸道平滑肌活動(dòng)情況實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平滑肌肌條標(biāo)本收縮的振幅（g）、頻率（Hz）表示。3.2.1 大鼠離體腸道平滑肌平均頻率見表2。與空白組相比，運(yùn)動(dòng)組大鼠離體腸道平滑肌的平均頻率明顯提高（P<0.05）；與運(yùn)動(dòng)組比較，低、中劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率均有不同程度的降低，其中中劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率顯著降低（P<0.01）；與運(yùn)動(dòng)組比較，高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率有增加趨勢(shì)，但統(tǒng)計(jì)無顯著意義（P>0.05）。但與中劑量組比較，高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率顯著增加（P<0.01）。3. 2.2大鼠離體腸道平滑肌平均振幅見表3。與空門組相比，運(yùn)動(dòng)組大鼠離體腸道平滑肌的平均振幅顯著提高（P<0.05）；與運(yùn)動(dòng)組比較，低、中劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均振幅顯著降低（JD<0.05，，）<0.01）；與運(yùn)動(dòng)組比較，高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均振幅顯著增加（P<0.05）。4討論

胃腸運(yùn)動(dòng)主要受腸神經(jīng)系統(tǒng)支配和體液因素的影響。通過檢測(cè)血液、下丘腦和胃腸局部組織中的胃腸激素含量的變化可反映胃腸運(yùn)動(dòng)機(jī)能狀況。

胃動(dòng)素（ MTLilin MTL）是一種重要的胃腸激素，分布在大多數(shù)哺乳動(dòng)物十二指腸近端，空腸粘膜隱窩中的上皮胃動(dòng)素細(xì)胞，還存在于神經(jīng)組織及垂體、下丘腦、大腦皮層、小腦中，也屬于一種腦腸肽激素.MTL對(duì)消化道異型性收縮起重要作用，促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)，提高胃腸道、膽道、oddis括約肌收縮力和張力。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，大鼠負(fù)重游泳后，血漿胃動(dòng)素水平平明顯增加，可能胃動(dòng)素使小腸運(yùn)動(dòng)明顯加速 與運(yùn)動(dòng)組比較，低、中劑量組大鼠血漿MTL均有不同程度的降低，中劑量組血漿MTL降低最明顯，表明中劑量補(bǔ)中益氣湯可有效降低血漿中的MTL，可能胃動(dòng)素會(huì)使小腸運(yùn)動(dòng)減緩，而補(bǔ)中益氣湯高劑量的大鼠血漿MTL與運(yùn)動(dòng)組比較，雖然沒有統(tǒng)汁學(xué)意義，但有增加趨勢(shì)，不知是否與該組樣本數(shù)量不夠十個(gè)有關(guān).這提示我們，補(bǔ)中益氣湯對(duì)腸管平滑肌的調(diào)節(jié)可能與胃動(dòng)素有關(guān)，并是否可進(jìn)一步推測(cè)，不同劑量的補(bǔ)中益氣湯對(duì)胃動(dòng)素的釋放有雙向調(diào)節(jié)作用。

中藥對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)功能的調(diào)節(jié)有雙向調(diào)節(jié)作用[2]。補(bǔ)中益氣湯由黃芪、升麻、柴胡、當(dāng)歸、白術(shù)、人參、陳皮、甘草組成有補(bǔ)中益氣，升陽(yáng)舉陷之功效。有實(shí)驗(yàn)表明[3]，補(bǔ)中益氣湯對(duì)小腸動(dòng)力的影響比較復(fù)雜.當(dāng)小腸蠕動(dòng)亢進(jìn)時(shí)呈現(xiàn)抑制作用，張力降低且蠕動(dòng)減慢；當(dāng)小腸的運(yùn)動(dòng)處于抑制狀態(tài)時(shí)，則出現(xiàn)促進(jìn)腸管蠕動(dòng)的作用。本實(shí)驗(yàn)利用生物信號(hào)記錄系統(tǒng)，記錄不同組別大鼠的離體腸管平滑肌收縮的振幅和頻率變化情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與運(yùn)動(dòng)組大鼠離體腸道平滑肌的平均振幅和頻率比空白組顯著提高，表明經(jīng)過負(fù)重游泳后形成疲勞的大鼠小腸運(yùn)動(dòng)明顯加速，出現(xiàn)飲食物的消化和排泄的過速現(xiàn)象，也表明造模成功；低、中劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均振幅和頻率與運(yùn)動(dòng)組比較顯著降低，表明補(bǔ)中益氣湯中、低劑量均可顯著延緩運(yùn)動(dòng)后大鼠的加速的小腸運(yùn)動(dòng)，說明補(bǔ)中益氣湯中、低劑量對(duì)于疲勞運(yùn)動(dòng)后所造成的胃腸道損傷有治療作用；高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率與運(yùn)動(dòng)組比較，有增加趨勢(shì)，高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均振幅與運(yùn)動(dòng)組比較顯著增加，表明補(bǔ)中益氣湯高劑量使運(yùn)動(dòng)后本米就加速的小腸運(yùn)動(dòng)更加快，說明補(bǔ)中益氣湯高劑量對(duì)于疲勞運(yùn)動(dòng)后所造成的胃腸道損傷并無治療作用，反而有可能加速小腸運(yùn)動(dòng)。根據(jù)以上離體實(shí)驗(yàn)結(jié)果，低、中劑量的補(bǔ)中益氣湯能夠延緩運(yùn)動(dòng)后大鼠的加速的小腸運(yùn)動(dòng)，而高劑量的補(bǔ)中益氣湯能夠使運(yùn)動(dòng)后大鼠的加速的小腸運(yùn)動(dòng)更加加快，是否可推測(cè)，不同劑量的補(bǔ)中益氣湯對(duì)疲勞大鼠的腸道具有雙向調(diào)節(jié)作用。參考文獻(xiàn)：[1]段富津.方劑學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1995，ll6.[2]湯斌.補(bǔ)中益氣湯的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].廣東醫(yī)院學(xué)報(bào)，1994，12（4）：324-327.[3]李巖.補(bǔ)巾益氣湯對(duì)小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)雙向調(diào)節(jié)作用和抗炎作用的研究[J].醫(yī)藥論壇雜志，2011，32（ 22）：l8-19（收稿日期：2014-10-07）