高景恒， 袁繼龍， 石 杰， 高婧囡

評 論

二論脂肪移植的當今與未來

高景恒， 袁繼龍， 石 杰， 高婧囡

納米脂肪； 脂肪移植； 美容

2003年,自日本吉村浩太郎(Yoshimura)提出細胞輔助脂肪移植技術(cell-assisted lipotranusfer, CAL)以來，到目前為止尚有許多問題需要進一步深入地研究。據文獻報道[1-15]，脂肪來源干細胞實用再生研究是對自體基質血管細胞群(stromal vascular fraction cell, SVFCs)和自體納米脂肪移植(nanofat grafting)的研究?，F(xiàn)筆者對上述2項研究作一評述。

1 SVFCs的研究與應用

SVFCs是皮下脂肪組織中去除白色脂肪細胞以外的細胞群，包括1%～10%的干細胞、血管內皮細胞、纖維細胞、單核細胞、血液細胞、組織型巨噬細胞、平滑肌細胞、造血祖細胞、周圍細胞、褐色脂肪細胞等10余種。其中，主要為干細胞、血管內皮細胞、褐色脂肪細胞，以及豐富的細胞生長因子。SVFCs的作用和功能有[16-24]：⑴內分泌功能。具有能量調控、炎癥反應和免疫應答功能。⑵再生作用。干細胞是多功能分化干細胞，具有加速再生和血管化以及組織再修復的作用。⑶SVF具有抗皺紋，提升下垂松弛的皮膚，去斑、潤膚、水化、美白等作用，能達到面、頸、手部年輕化的效果。美國學者認為，SVFCs具有軟黃金的作用。SVF的應用包括：自體脂肪移植(adipose grafting, AG)+SVF-CAL技術,CAL+PRP,CAL+PRF,以及純SVF皮內移植技術等[2]。提取SVFCs的關鍵技術：[25-29]⑴結構型脂肪抽取。最好的技術是Colemvan技術，采用水動刀和注射器抽取。⑵利用0.2%膠原酶-1，在37 ℃恒溫連續(xù)振蕩，間斷搖晃30～60 min消化。⑶消化后，將整體物離心1200 r/min,10～30 min,去除脂肪，保留液體部分。⑷將液體部分置入HBSS，室溫，清洗細胞團，保護細胞。⑸置入FBS(胎牛血清)中，終止膠原酶活性。⑹過濾后的液體部分為SVFCs，其細胞數(shù)為1×106-7。

2 納米脂肪移植的基礎研究與應用

2.1 基本知識與技術 納米是英文nanofat的音譯，是物理學上的一個長度單位。物質在1～100 nm的范圍內，其物質性能就會發(fā)生突變，表現(xiàn)出突出的性能。1 nm是1×10-9m，即1 m=1×103mm=1×106μm=1×109nm，相當于45個原子排列起來的長度，如一根頭發(fā)絲的直徑就有7萬～8萬 nm。納米技術是在0.1～100.0 nm的范圍內，研究原子、分子的運動規(guī)律和特性，操作其原子和分子對材料進行加工，從而制造出有特點的功能性產品。

納米醫(yī)學是隨著納米生物醫(yī)藥的發(fā)展而發(fā)展起來的，是用納米技術來解決醫(yī)學問題的學科，它將給醫(yī)學領域帶來一場深刻的革命。據估測，納米科技在醫(yī)學領域的應用，全球市場在2015年有望達到700億～1600億美元。納米科學技術和納米醫(yī)學的出現(xiàn)，將會改變人類對物質結構和功能的認知，甚至產生認知的困惑和帶來哲學的迷思。1979年，世界衛(wèi)生組織公開呼吁全球必須研究順勢醫(yī)學/順勢療法，由于基因、納米技術、量子醫(yī)學的發(fā)展，對順勢醫(yī)學的機制予以強大的理論支持，如此，順勢療法日益風靡歐美。量子點又稱半導體納米微晶體，直徑為1～100 nm，其半徑小于或接近激子玻爾半徑的一類半導體納米粒子。因此，納米醫(yī)學與量子醫(yī)學或稱粒子醫(yī)學都是有著一個問題，兩種認知的基礎理論。納米醫(yī)學和量子醫(yī)學的科學發(fā)展是相輔相成、相得益彰、相互促進的，是深入認知和發(fā)展的科學[30-38]。

脂肪移植分為大脂肪細胞團移植(macrofat grafting)、細小脂肪細胞團移植(microfat grafting)和納米脂肪移植(nanofat grafting)。大脂肪細胞團移植，也是常規(guī)典型的脂肪抽吸和脂肪移植；細小脂肪細胞團移植，是用多孔的細小吸管抽吸脂肪進行移植的方法；納米脂肪移植是用直徑為3.0 mm抽吸管來抽吸脂肪，經機械性乳化后，其過濾后的液體為納米脂肪[30-33]。

表1顯示，納米脂肪中SVFCs細胞數(shù)明顯少于前兩種。納米脂肪中亦無成活和完整的脂肪細胞，完全被乳化物所代替。從3種抽吸脂肪中分離SVF和CD34+亞群細胞；從SVF中提取活的脂肪干細胞;在SVF中,其CD34+的細胞群數(shù)為(0.1～0.2)×104/ml脂肪;兩者比例為4.5∶6.5。納米脂肪仍存在大量良好的間充質干細胞。如果將常規(guī)高頻吸脂獲得的脂肪經沖洗和酶的消化后，再經機械乳化和過濾，提取物與納米脂肪或超微(米)脂肪相比，有何區(qū)別呢？應需驗證。所以，將其總結為4種脂肪移植：⑴大脂肪團移植；⑵小脂肪團移植;⑶超微(米)脂肪團移植(supermicrofat grafting);⑷納米脂肪團移植[30]。

Tonnard 等[30]報道，采用納米脂肪移植應用于57例患者，6個月后呈現(xiàn)明顯的面部皮膚年輕化的臨床療效，無任何并發(fā)癥和不良反應發(fā)生。并認為，納米脂肪移植是一項新的概念，經臨床觀察其可明顯改善面部皮膚的年輕化。但需進一步深入研究的是納米脂肪移植技術及概念[30,38-41]。

表1 3種脂肪移植物的細胞數(shù)量

2.2 與SVF注射技術的關系 自體脂肪細胞移植的發(fā)展，是從CAL技術開始的,即為增加抽吸脂肪的移植成活率，是從抽吸的脂肪中提取SVF且加入移植脂肪中的一種技術，稱為CAL。填充劑是醫(yī)學生物材料之一，亦是治療組織缺損的主要手段之一。近年來，醫(yī)學生物材料的發(fā)展是由物理、化學性技術向生物性技術的發(fā)展，生物性技術從生物性材料，如細胞外基質向細胞學技術和再生醫(yī)學技術的發(fā)展，也是從單純的填充劑向再生劑的發(fā)展。如此，再生劑才是永久性的、安全的，是有生物活性的填充劑。

美國Edwara Weston′s Nude報道，納米脂肪移植也稱納米脂肪干細胞移植(nanostem cell grafting)。均為細胞群，僅有細胞數(shù)量以及提取、分離技術的不同而已。但最大的不同之處，納米脂肪的提取是經機械乳化，將其脂肪細胞完全破壞，再經過濾后，所提取的液體部分為納米脂肪/超微粒脂肪[25-29]。

2.3 納米脂肪的獲取 2013年，P Tonnard報道，采用Klein腫脹麻醉(利多卡因800 mg/L和腎上腺素1∶100萬)的方法行吸脂術，并將抽吸的脂肪部分經過沖洗后，再經機械性乳化，即通過改變2個連接在一起的10 ml注射器內的脂肪位置，相互推移30次，機械化達到脂肪乳化的目的。然后，將乳化的溶液經0.5 mm孔的無菌尼龍紗布過濾，流至筒內的液體部分，稱為納米脂肪。納米脂肪中，SVF僅為Macrofat的2/3。2014年，MT Friji認為，此項技術稱為超微(米)脂肪技術更確切。所分離提取細胞的大小在100 nm以上，已超出規(guī)定0.1～100 nm的技術范疇[42]。

2.4 納米脂肪移植技術的應用 2013年,P Tonnard首先報道了57例皮內注射治療面部表淺皺紋，使皺紋消除，改善了皮膚質量，達到了局部年輕化；術后無感染、囊腫和硬結，僅有輕微瘀斑，持續(xù)1.5～2.0 d，瘀斑消失，并由此認為，其機制和作用與干細胞有關。但其臨床應用的療效，尚需進一步的臨床觀察和機制證據。同年，印度MT FHji和MS Ch醫(yī)師認為，納米脂肪移植是常規(guī)脂肪移植技術的進一步發(fā)展，稱為超微脂肪移植更確切。2013年，M Omeed指出，成功的脂肪移植取決于移植脂肪團的大小。同年，Hartog報道了顯露頸肩部皮膚年輕化治療。2015年，M Mukherjee報道了將此技術用于治療黑眼圈，均取得了較好的效果。Carpaneda和Ribeiro認為，理想的脂肪移植直徑應小于3.0 mm。Stuzin[33]在對P Tonnard一文的討論中認為，近年來面部年輕化的進展是再生醫(yī)學的干細胞移植技術。Stuzin指出，納米脂肪移植是Tonnard等首先報道的，是結構脂肪移植和面部年輕化技術的新發(fā)展，尤其在改善面部表淺皺紋方面，取得了較好的效果。將納米脂肪注射后，容量立刻略有增加，但需要注射數(shù)周后，才能呈現(xiàn)年輕化的效果，其機制尚需進一步觀察和研究。Stuzin認為，其是活性納米脂肪中的干細胞進一步分化的結果。同時指出，其可以成功治療貧血性放射性潰瘍和掌腱膜(dupuytren)攣縮，以及相關的乳房再造和改善面部皮膚質地，達到年輕化的效果。

2.5 納米技術與美容抗衰老 納米技術已問世20余年，其在生物美容醫(yī)學和抗衰老應用技術中已有很大進展。納米技術在美容化妝品中的應用，理論上是將化妝品制成納米量級或毫微米級，其粒子直徑僅有100～200 nm，很容易被皮膚細胞吸收，明顯增加其療效；納米技術應用在美容醫(yī)學中，例如納米性美容整形材料，包括納米級羥磷灰石、自體顆粒脂肪(SVF，納米脂肪)、膠原、A型肉毒毒素等；納米技術在中藥美容化妝品的應用，如丹參、益母草、人參、黃芪、當歸、苦參、珍珠等，納米或毫微米級產品。納米技術還可應用在整體抗衰老醫(yī)學中。衰老涉及到多系統(tǒng)、多器官、多組織和多細胞及亞細胞甚至到分子、基質、免疫力等的功能和形態(tài)衰老改變；納米技術在皮膚美白中應用，如維生素A與維甲酸、維生素E、輔酶Q10、中草藥提取物；抗氧化作用藥物，如人參、丹參，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化酶、過氧化氫酶、金屬硫蛋白和木瓜巰基酶等。由此可見，納米的生物材料在皮膚美容和抗衰老醫(yī)學領域中的應用越來越多[43-45]。筆者在文中提到，SVF和納米脂肪是從皮下脂肪提取的去除白色脂肪細胞以外的細胞群，SVF是從膠原酶-1消化的脂肪中提取的；而納米脂肪是從機械性乳化的白色脂肪細胞過濾后的細胞群；納米脂肪中的細胞少于SVF的細胞群；兩者均不含有白色脂肪細胞，均含有脂肪干細胞等；納米脂肪中的CD34+細胞群少于SVF；兩者細胞內容是相似的，僅在數(shù)量上，SVF中的細胞數(shù)量多于納米脂肪，兩者的功能與作用是相同的。然而，SVF與納米脂肪還有哪些相同和不同之處？納米脂肪是一種新的物質，新的概念嗎？所含細胞數(shù)量各有什么不同？干細胞的活性又如何？它們的內分泌、修復功能和作用又如何？納米脂肪與脂肪細胞及其他細胞和其他生物材料，如PRP、PRF、透明酸、膠原、細胞因子等聯(lián)合應用的臨床效果如何等，均需要進一步地深入研究。

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110016 遼寧 沈陽，《中國美容整形外科雜志》編輯部(高景恒)；遼寧省人民醫(yī)院 整形外科(袁繼龍,石 杰,高婧囡)

高景恒(1935-)，男，河北人，主任醫(yī)師，教授.

10.3969/j.issn.1673-7040.2015.05.022

2015-04-02)