雷心雨，黃怡婷，朱翠玲，于茜，孫靜華，王忠昊，秦思，周盼，徐先祥

·藥理毒理·

黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷抗炎鎮(zhèn)痛作用

雷心雨，黃怡婷，朱翠玲，于茜，孫靜華，王忠昊，秦思，周盼，徐先祥

目的：考察黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷在抗炎鎮(zhèn)痛及免疫方面的作用。方法：小鼠進(jìn)行二甲苯耳腫脹、小鼠瓊脂肉芽腫、小鼠醋酸扭體鎮(zhèn)痛等試驗(yàn)，雷公藤多苷15 mg·kg-1和黃芪總皂苷150 mg·kg-1進(jìn)行配伍，研究雷公藤多苷配伍黃芪總皂苷及雷公藤多苷、黃芪總皂苷各自的抗炎、鎮(zhèn)痛及免疫的作用。結(jié)果：黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷能有效降低小鼠的耳腫脹度，降低瓊脂肉芽腫重量，減少小鼠扭體次數(shù)，增加小鼠免疫器官重量。結(jié)論：黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷在抗炎鎮(zhèn)痛方面具有一定的增效作用。

雷公藤多苷；黃芪總皂苷；抗炎；鎮(zhèn)痛；免疫

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是常見(jiàn)疑難雜癥，雷公藤是目前公認(rèn)的治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎最有效的中藥之一［1］。雷公藤多苷（tripterygium wilfordii polyglycosidium，TWP） 是從雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook. f.）中提取的一類極性較大的混合物，含有二萜類、生物堿及一些五環(huán)三萜，為臨床上使用較多的雷公藤類制劑，具有抗炎、抑制免疫、抗生育等活性，廣泛用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎［2］。雷公藤制劑療效與毒副作用并存，限制了雷公藤的深入應(yīng)用。通過(guò)雷公藤多苷的復(fù)方組方研究，發(fā)現(xiàn)通過(guò)藥物及不同方劑的配伍可以達(dá)到增效減毒的目的［3］。

治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的復(fù)方中多用黃芪來(lái)補(bǔ)氣扶正。有研究表明黃芪與雷公藤多苷合用時(shí)可顯著增加雷公藤多苷的抗炎作用，更加顯著降低佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠血清中IL-1β的含量［4］。黃芪總皂苷是黃芪中一類重要有效組分，具有調(diào)節(jié)免疫、保護(hù)心血管等藥理作用［5］。本文將常用劑量的雷公藤多苷與黃芪總皂苷配伍，考察二者聯(lián)合在抗炎、鎮(zhèn)痛、免疫方面的作用。

1　材料

1.1動(dòng)物

健康昆明種小鼠，雄性，體重20±2g，由福建省吳氏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2藥物

黃芪總皂苷，本課題組以大孔吸附樹(shù)脂方法制備；雷公藤多苷，福建匯天生物藥業(yè)有限公司，批號(hào)130701，臨用時(shí)用蒸餾水配成所需濃度混懸液供灌胃使用。

2　方法

2.1二甲苯誘導(dǎo)小鼠耳腫脹試驗(yàn)

小鼠隨機(jī)分為4組，分別為正常對(duì)照組、雷公藤多苷15 mg·kg-1組和黃芪總皂苷150 mg·kg-1組和雷公藤多苷15 mg·kg-1+黃芪總皂苷150 mg·kg-1配伍組，每組10只。以上各組分別按20 mL·kg-1進(jìn)行灌胃給予藥液或生理鹽水，每天1次，連續(xù)7 d。末次給藥后1 h，以20 μL二甲苯涂于各組小鼠左耳兩面致炎，右耳不涂作對(duì)照，致炎后45 min處死小鼠。剪下兩耳，用直徑8 mm的打孔器分別在左右同一部位打下圓耳片，稱重，以耳片重量之差為腫脹度。

2.2小鼠瓊脂肉芽腫試驗(yàn)

小鼠分組及給藥同“2.1”。給藥前在各小鼠背中線處皮下注射2%瓊脂溶液0.4 mL。末次給藥后1 h，處死動(dòng)物，剝離出肉芽瓊脂塊，稱取濕重。

2.3小鼠醋酸扭體鎮(zhèn)痛試驗(yàn)

小鼠分組及給藥同“2.1”。末次給藥后1 h，每鼠腹腔注射0.6%冰醋酸水溶液 0.2 mL，觀察并記錄15 min內(nèi)的小鼠扭體次數(shù)。

2.4免疫器官臟體指數(shù)測(cè)定

小鼠分組及給藥同“2.1”。末次給藥1 h后處死小鼠，分離免疫器官胸腺、脾臟，計(jì)算臟體指數(shù)。

2.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，所得結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。各組間均數(shù)比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA），采用LSD法進(jìn)行組間兩兩比較。

3　結(jié)果

3.1對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響

與對(duì)照組比較，雷公藤多苷組和配伍組在致炎45 min后小鼠耳腫脹度顯著性降低（P＜0.05）；黃芪總皂苷組有降低作用趨勢(shì)但無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。與雷公藤多苷組和黃芪總皂苷組比較，配伍組均無(wú)顯著性差異（P＞0.05），表明配伍組降低小鼠耳腫脹度作用主要來(lái)源于雷公藤多苷。

表1　黃芪總皂苷聯(lián)合雷公藤多苷對(duì)小鼠耳腫脹的影響（x±s，n=10）

3.2對(duì)瓊脂致小鼠肉芽腫的影響

與對(duì)照組比較，雷公藤多苷組、黃芪總皂苷組和配伍組肉芽腫的質(zhì)量顯著性降低（P＜ 0.05，P＜0.05，P＜ 0.01）；此外，配伍組與黃芪總皂苷組致炎后小鼠耳肉芽腫的質(zhì)量組間具有顯著性差異（P＜0.05），表明雷公藤多苷配伍黃芪總皂苷后具有明顯的增效作用。

表2　黃芪總皂苷聯(lián)合雷公藤多苷對(duì)小鼠瓊脂肉芽腫的影響±s，n=10）

表2　黃芪總皂苷聯(lián)合雷公藤多苷對(duì)小鼠瓊脂肉芽腫的影響±s，n=10）

注：與黃芪總皂苷組比較，#P＜ 0.05

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3.3對(duì)小鼠醋酸扭體反應(yīng)的影響

與對(duì)照組比較，雷公藤多苷組和配伍組在注射 0.6%冰醋酸水溶液后小鼠扭體次數(shù)均顯著性降低（P＜ 0.05），結(jié)果見(jiàn)表3。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷后，具有顯著鎮(zhèn)痛作用，而該作用主要來(lái)源于雷公藤多苷。

表3　黃芪總皂苷聯(lián)合雷公藤多苷對(duì)小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)的影響（x±s，n=10）

3.4藥物對(duì)小鼠免疫器官的影響

與對(duì)照組比較，黃芪總皂苷組胸腺臟體指數(shù)顯著性增加（P＜ 0.05），表明黃芪總皂苷具有增強(qiáng)免疫作用；與對(duì)照組比較，雷公藤多苷組小鼠脾臟體指數(shù)顯著性降低（P＜ 0.05），表明雷公藤多苷有抑制免疫作用，而在配伍黃芪總皂苷后與對(duì)照組比較則無(wú)顯著性差異（P＞0.05），表明二者聯(lián)用后能提高免疫器官的功能。

表4　黃芪總皂苷聯(lián)合雷公藤多苷免疫器官重量臟體指數(shù)的影響（x±s，n=10）

4　討論

雷公藤制劑對(duì)風(fēng)濕性疾病有很好的療效，應(yīng)用廣泛，但雷公藤較強(qiáng)的毒性作用卻一直困擾醫(yī)藥工作者，如何降低雷公藤毒性甚至增強(qiáng)其療效漸成為學(xué)者們研究的焦點(diǎn)。雷公藤在臨床上多為單用，國(guó)內(nèi)學(xué)者從中藥方劑配伍另辟蹊徑，或通過(guò)動(dòng)物藥理實(shí)驗(yàn)，或經(jīng)臨床實(shí)踐研究了雷公藤與其他中藥配伍起減毒增效的作用機(jī)制及方法，為有毒中藥減毒增效研究打開(kāi)了新的局面。中藥配伍的目的在于：一是相互配用而減輕或消除了毒性作用；二是發(fā)揮藥物間的協(xié)同作用而增進(jìn)療效。本研究中，雷公藤多苷與黃芪總皂苷配伍能起到一定的增效作用。在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，進(jìn)行有效組分層次上的現(xiàn)代組方研究，既可提高受試藥的質(zhì)量可控性，符合中藥現(xiàn)代化要求，又可兼顧中藥復(fù)方特色和優(yōu)勢(shì)。若能在中藥配伍的基礎(chǔ)上，進(jìn)行組分中藥復(fù)方制劑的研究，進(jìn)一步開(kāi)發(fā)高效低毒的治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎藥物，將有著廣闊的市場(chǎng)前景和重要應(yīng)用價(jià)值。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病主要內(nèi)因是肝腎不足或勞累過(guò)度耗損正氣，致素體正氣虧虛，正氣既虛外邪易入侵，復(fù)感風(fēng)寒濕，氣血痹阻不行，關(guān)節(jié)閉澀，或風(fēng)、寒、濕、熱之邪留滯筋骨關(guān)節(jié)，久之損傷肝腎陰血，筋骨失養(yǎng)，故見(jiàn)關(guān)節(jié)腫痛、僵硬、屈伸不利、活動(dòng)障礙、筋攣肉卷，即為痹癥［6］?！胺稣钚啊笔侵嗅t(yī)治病和組方用藥的重要思想，黃芪是著名的常用的補(bǔ)氣扶正中藥，黃芪不但具有顯著增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)功能，本身也具有一定的抗炎抗風(fēng)濕作用。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有虛實(shí)錯(cuò)雜的臨床特點(diǎn)，選擇補(bǔ)瀉兼施的植物中藥有效組分配伍（雷公藤多昔與黃芪總皂苷），貫徹了扶正祛邪治療思想，是現(xiàn)代中醫(yī)藥在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等研究領(lǐng)域中有益的探索。此外，黃芪還具有保護(hù)腎臟、保護(hù)心血管、保護(hù)胃黏膜，增強(qiáng)免疫、增強(qiáng)機(jī)體造血功能等作用，可以對(duì)抗雷公藤腎臟損害、心血管系統(tǒng)損害、造血系統(tǒng)損害、胃粘膜刺激等毒副作用。由此推測(cè)，中藥有效組分配伍是提高類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎臨床療效的重要途徑，值得進(jìn)一步深入研究。

［1］水光興，萬(wàn)毅剛，蔣春明，等.雷公藤及其活性成分藥效學(xué)和藥理學(xué)研究的若干進(jìn)展［J］.中國(guó)中藥雜志，2010，35（4）:515.

［2］郭雪紅.雷公藤多苷的藥理作用及臨床應(yīng)用概述［J］.中成藥，2010，32（7）:1199.

［3］饒毅，魏惠珍，陳銀芳，等.中藥配伍應(yīng)用于雷公藤減毒增效的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)中藥雜志，2008，33（14）:1658.

［4］王瑞輝，劉力，李暉.黃芪等中藥對(duì)雷公藤多甙抗炎療效影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究［J］.陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，27（5）:4.

［5］陳曉寧.黃芪總皂苷的藥理研究［J］.數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2005，18（6）:602.

［6］陸柳丹，韋嵩.中醫(yī)治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎研究進(jìn)展［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，15（10）:110.

（責(zé)任編輯：陳思敏）

Anti-inflammatory and analgesic effects of total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium

LEI Xin-yu, HUANG Yi-ting, ZHU Cui-ling, YU Qian, SUN Jing-hua, WANG Zhong-hao, QIN Si, ZHOU Pan, XU Xian-xiang
(School of Biomedical Science, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian)

Objective: To evaluate anti-infl ammatory，analgesic and immune effects of total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium. Method: The analgesic，anti-infl ammatory and immunity effects were investigated by dimethylbenzene-induced ear swell，agar granuloma and ethylic acid-induced writhing tests performed on mice. 15 mg· kg-1tripterygium wilfordii polyglycosidium combined with 150 mg·kg-1total saponins of Huangqi and their respective antiinflammatory，analgesic and immune effects were observed. Result: Total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium could effectively alleviate the acute inflammation reactivity，reduce writhing mice number，reduce agar granuloma weight and increase immune viscera weight of mice. Conclusion: Total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium have some synergistic anti-infl ammatory and analgesic effects.

Tripterygium wilfordii polyglycosidium； total saponins of Huangqi； anti-infl ammatory； analgesic； immunity

R 285.5

A

1674-926X（2015）06-010-03

華僑大學(xué)中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)“福建省杰出青年基金培育計(jì)劃”專項(xiàng)（JB-SJ1012）

華僑大學(xué)生物醫(yī)學(xué)學(xué)院，福建 泉州 362021

雷心雨（1994-），女，華僑大學(xué)生物醫(yī)學(xué)學(xué)院2012級(jí)藥學(xué)本科生 Email:454539866@qq.com

徐先祥（1978-），男，博士，助理研究員，主要從事中藥藥理學(xué)研究

Tel:0595-22692300Email:xuxianxiang@163.com 2015-04-20