黃滿婷++李海燕++賈李蓉++楊坤杰++劉靜++劉揚(yáng)

摘要：目的通過(guò)對(duì)1978年以來(lái)我國(guó)針灸實(shí)驗(yàn)研究論文主題詞的分析，了解針灸實(shí)驗(yàn)的主題內(nèi)容特征。方法檢索《中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)》（CBM）中1978年1月至2014年9月我國(guó)有關(guān)針灸實(shí)驗(yàn)研究的文獻(xiàn)，進(jìn)行主題詞詞頻排序，合并副主題詞后截取高頻主題詞，并與<醫(yī)學(xué)主題詞表》（MeSH）和<中國(guó)中醫(yī)藥學(xué)主題詞表》（TCMeSH）進(jìn)行匹配映射，參照主題詞樹(shù)狀結(jié)構(gòu)號(hào)對(duì)論文主題進(jìn)行分析。結(jié)果共檢出相關(guān)文獻(xiàn)7857篇，出現(xiàn)頻次超過(guò)100次的主題詞為73個(gè)。參照主題詞樹(shù)狀結(jié)構(gòu)號(hào)將主題詞抽象出8類(lèi)。針灸實(shí)驗(yàn)以電針為主要針刺方法，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以大鼠為主，涉及最多的穴位為足三里，疾病主要為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，出現(xiàn)頻次最高的分子物質(zhì)是核酸類(lèi)物質(zhì)mRNA信使。結(jié)論針灸實(shí)驗(yàn)研究的關(guān)注點(diǎn)主要集中于針刺對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的作用機(jī)制研究，且研究深度已達(dá)到分子遺傳學(xué)水平。

關(guān)鍵詞：針灸實(shí)驗(yàn)：電針：腦缺血：主題詞：現(xiàn)狀分析

針灸實(shí)驗(yàn)研究是實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)的具體表現(xiàn)形式，通過(guò)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)與實(shí)驗(yàn)方法研究針灸基本理論、針灸技術(shù)、針灸作用原理及針灸作用規(guī)律，用以指導(dǎo)臨床實(shí)踐，是傳統(tǒng)針灸學(xué)與現(xiàn)代科學(xué)相結(jié)合的主要實(shí)現(xiàn)方式。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步與發(fā)展，針灸實(shí)驗(yàn)研究也隨之深入，從而產(chǎn)生了大量的針灸實(shí)驗(yàn)研究的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)。本文利用主題詞統(tǒng)計(jì)和詞頻分析方法，針對(duì)這些數(shù)據(jù)進(jìn)行分類(lèi)分析，以期了解國(guó)內(nèi)針灸實(shí)驗(yàn)研究的主題內(nèi)容特征，為相關(guān)領(lǐng)域研究者提供參考。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)來(lái)源

本文所用數(shù)據(jù)來(lái)源于《中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)》（CBM）。CBM由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)信息研究所開(kāi)發(fā)研制，收錄1978年以來(lái)1800多種中國(guó)生物醫(yī)學(xué)期刊以及匯編、會(huì)議論文的文獻(xiàn)題錄共600余萬(wàn)篇，年增文獻(xiàn)量50余萬(wàn)篇，雙周更新。全部題錄均進(jìn)行主題標(biāo)引和分類(lèi)標(biāo)引等規(guī)范化加工處理，可供本研究進(jìn)行主題詞分析。該數(shù)據(jù)庫(kù)收錄的數(shù)據(jù)時(shí)間范圍為1978年1月至今。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

納入有關(guān)針灸動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的文獻(xiàn)，所選文獻(xiàn)均有主題詞標(biāo)注。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

①綜述性文獻(xiàn)；②與針灸研究有關(guān)的臨床文獻(xiàn)，即針灸用于人的群體或個(gè)案臨床治療的文獻(xiàn)。

1.4 檢索策略

采用檢索式為：針刺O(píng)R針灸OR電針（特征詞：動(dòng)物），對(duì)1978年1月-2014年9月CBM數(shù)據(jù)庫(kù)中有關(guān)針灸實(shí)驗(yàn)研究的文獻(xiàn)進(jìn)行檢索。

1.5 數(shù)據(jù)規(guī)范

文獻(xiàn)的主題詞與《醫(yī)學(xué)主題詞表》（MeSH）和《中國(guó)中醫(yī)藥學(xué)主題詞表> （TCMeSH）進(jìn)行匹配映射規(guī)范，并參照主題詞樹(shù)狀結(jié)構(gòu)號(hào)對(duì)論文主題進(jìn)行分類(lèi)規(guī)范。

1.6 數(shù)據(jù)處理

以Access2010和Excel2010為數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析工具，對(duì)全部文獻(xiàn)的主題詞進(jìn)行頻次統(tǒng)計(jì)，并從高到低排序，截取高頻主題詞進(jìn)行分類(lèi)統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果

從CBM數(shù)據(jù)庫(kù)中檢出與針灸實(shí)驗(yàn)研究相關(guān)的文獻(xiàn)7857篇，對(duì)全部文獻(xiàn)的主題詞進(jìn)行詞頻統(tǒng)計(jì)并從高到低排序，截取詞頻超過(guò)100的主題詞73個(gè)（見(jiàn)表1），這些高頻詞的累計(jì)頻次占全部主題詞頻次百分比達(dá)到43.44%。

2.2 高頻主題詞分類(lèi)結(jié)果

將出現(xiàn)頻次較高的主題詞與MeSH和TCMeSH進(jìn)行匹配映射，根據(jù)樹(shù)狀結(jié)構(gòu)號(hào)進(jìn)行抽象分類(lèi)統(tǒng)計(jì)并降序排列，共形成8個(gè)類(lèi)別（見(jiàn)表2）：（l）針灸方法；（2）實(shí)驗(yàn)方法；（3）疾?。唬?）心理、生理及遺傳學(xué)現(xiàn)象和過(guò)程；（5）身體結(jié)構(gòu)部位；（6）穴位；（7）實(shí)驗(yàn)對(duì)象；（8）分子觀測(cè)指標(biāo)。

將高頻主題詞降序排列后，得出8個(gè)類(lèi)別出現(xiàn)頻次較高的主題詞分別為：（1）電針；（2）疾病模型，動(dòng)物；（3）腦缺血；（4）記憶；（5）腦；（6）穴，足三里；（7）大鼠，SpragueDawley；（8）RNA，信使。

3 分析與討論

3.1 常用針灸方法與實(shí)驗(yàn)對(duì)象

所選文獻(xiàn)主題詞中涉及到的針灸方法主要有電針、艾炷灸等方法，其中出現(xiàn)頻次最高的主題詞是電針，因此可以確定針灸實(shí)驗(yàn)研究中運(yùn)用最多的針灸方法是電針。

電針是傳統(tǒng)毫針刺激與電的生理效應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，與傳統(tǒng)毫針刺激相比，提高了毫針治療效果，擴(kuò)大了毫針的治療范圍。教科書(shū)中提到電針可調(diào)節(jié)人體生理功能，有止痛、鎮(zhèn)靜、促進(jìn)氣血循環(huán)、調(diào)節(jié)肌張力等作用，其適用范圍基本和毫針刺法相同，故其治療范圍較廣。臨床常用于治療各種痛證、痹證，以及心、胃、腸、膀胱、子宮等器官的功能失調(diào)，還可治療癲狂和肌肉、韌帶、關(guān)節(jié)的損傷性疾病等，并可用于針刺麻醉。電針的刺激強(qiáng)度和頻率是通過(guò)電針儀調(diào)試的，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中較易操作和控制，從而減少實(shí)驗(yàn)誤差，因此電針作為主要針灸手法是必然的。

實(shí)驗(yàn)對(duì)象中出現(xiàn)頻次最高的是大鼠，因此可知針灸實(shí)驗(yàn)主要以大鼠為研究動(dòng)物來(lái)制備疾病模型。大鼠的結(jié)構(gòu)更接近于人體，且有關(guān)大鼠的解剖、生理、藥理等方面的實(shí)驗(yàn)資料比較豐富；大鼠價(jià)格較低，有利于大樣本實(shí)驗(yàn)的實(shí)施。研究中建立最多的模型為局灶性腦缺血再灌注模型，此模型多采用由Longa等改良的線栓法阻斷一側(cè)大腦中動(dòng)脈來(lái)制備。線栓法具有不開(kāi)顱、手術(shù)創(chuàng)傷小、可以準(zhǔn)確控制缺血的時(shí)間等優(yōu)點(diǎn)，有利于掌控針刺介入時(shí)間。

3.2 常用穴位

本文所收錄文獻(xiàn)中涉及到的穴位大約有150個(gè)，包括十四經(jīng)穴、阿是穴、經(jīng)外奇穴和局部穴位，使用頻率較高的穴位有足三里、內(nèi)關(guān)、百會(huì)、關(guān)元及頭頸部穴，前4個(gè)穴為十四經(jīng)穴，頭頸部穴為局部穴位，其中最常選用的是足三里。

足三里為足陽(yáng)明胃經(jīng)的下合穴，因能治理腹部上中下三部諸證而得名，又稱(chēng)之為下陵、鬼邪、中俞醪；為回陽(yáng)九針穴之一，土經(jīng)中之土穴；是強(qiáng)壯要穴和治療肚腹疾病的常用穴。大量的研究結(jié)果證明，足三里對(duì)人體許多系統(tǒng)有明顯的調(diào)整作用，對(duì)多種疾病有顯著療效。針灸實(shí)驗(yàn)中多用足三里與其他穴配用，作為針灸靶點(diǎn)觀察不同針灸方法對(duì)疾病模型及其相關(guān)分子觀測(cè)指標(biāo)的影響，相關(guān)的疾病模型多為消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的疾病或現(xiàn)象。如江欣等通過(guò)刺激“曲池”“足三里”觀察電針對(duì)局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能的影響，文中明確說(shuō)明選穴原因?yàn)殡娽槨扒亍薄白闳铩睂?duì)腦缺血再灌注損傷大鼠神經(jīng)功能缺損具有相對(duì)特異性的調(diào)節(jié)作用，其結(jié)論為電針能有效改善腦缺血大鼠神經(jīng)功能障礙，這一效應(yīng)可能是通過(guò)調(diào)控Norch信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)的。也有部分文獻(xiàn)以研究足三里對(duì)機(jī)體的調(diào)節(jié)和治療作用機(jī)制為主，如鐘毓賢等通過(guò)電針失血性休克模型大鼠的“足三里”，研究電針“足三里”對(duì)失血性休克延遲補(bǔ)液大鼠肝組織缺血性損傷的影響，結(jié)果顯示電針“足三里”可以在一定程度上改善失血性休克狀態(tài)下大鼠的肝損傷程度，在特殊情況下可能能夠部分替代輸液療法對(duì)失血性休克的治療作用。

3.3 主要疾病模型

詞頻分類(lèi)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，針灸實(shí)驗(yàn)涉及到的疾病達(dá)500多種，涉及24類(lèi)疾病。根據(jù)表2發(fā)現(xiàn)，研究較多的疾病有神經(jīng)系統(tǒng)疾病類(lèi)（如腦缺血、疼痛、腦梗塞、脊髓損傷等）、血管疾病類(lèi)（如心肌缺血、再灌注損傷）以及病理狀態(tài)類(lèi)（如急性?。┑龋渲猩窠?jīng)系統(tǒng)疾病類(lèi)疾病達(dá)100多種，占比例最大，且對(duì)腦缺血的研究最多。故可推測(cè)針灸實(shí)驗(yàn)研究主要以腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病為主要疾病模型開(kāi)展研究。

腦缺血又稱(chēng)缺血性腦血管病，是臨床常見(jiàn)急性病，其對(duì)人體的損傷嚴(yán)重危害人們的生命和生活質(zhì)量，而針灸對(duì)缺血性腦血管病的相關(guān)癥狀具有很好的改善和治療作用。參閱針灸實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)中以腦缺血為主題的論文，發(fā)現(xiàn)針灸實(shí)驗(yàn)主要研究針刺對(duì)腦缺血損傷的病理生理機(jī)制的調(diào)節(jié)作用和影響原理，從而為針灸治療腦缺血類(lèi)疾病的有效性提供理論依據(jù)。同時(shí)已有大量實(shí)驗(yàn)證明，電針能改善腦電活動(dòng)、增加腦血流量，抗自由基，抑制興奮性氨基酸，維持細(xì)胞內(nèi)外離子穩(wěn)態(tài)，抑制細(xì)胞凋亡，從而達(dá)到對(duì)腦缺血損傷的治療效果。

3.4 治療疾病的作用原理

根據(jù)詞頻分類(lèi)匹配結(jié)果發(fā)現(xiàn)，針灸實(shí)驗(yàn)研究涉及到的分子物質(zhì)主要有核酸類(lèi)（RNA）、無(wú)機(jī)化合物（一氧化氮、鈣）、酶類(lèi)（超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶）、有機(jī)化學(xué)品類(lèi)（丙二醛、血清素）、蛋白質(zhì)類(lèi)（腫瘤壞死因子-α）以及激素類(lèi)（β內(nèi)啡肽、雌二醇），所以針灸實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)觀測(cè)針灸對(duì)這些分子物質(zhì)的影響來(lái)闡釋針灸的分子作用機(jī)制，其中觀測(cè)最多的是與“RNA，信使”主題相關(guān)的分子物質(zhì)。信使RNA是基因表達(dá)過(guò)程中產(chǎn)生的攜帶遺傳信息的中間產(chǎn)物，因此針灸實(shí)驗(yàn)已開(kāi)始從分子遺傳學(xué)的角度來(lái)闡釋針灸治療疾病的作用原理。

下面以針灸治療腦缺血的分子作用機(jī)制研究舉例說(shuō)明。腦缺血損傷的病理生理機(jī)制較為復(fù)雜，主要有（l）腦組織病理學(xué)改變；（2）與腦內(nèi)免疫反應(yīng)的關(guān)系；（3）腦缺血后基因表達(dá)；（4）能量耗竭，酸中毒；（5）興奮性氨基酸毒性作用；（6）細(xì)胞內(nèi)鈣離子超載；（7）氧自由基損傷；（8）炎癥細(xì)胞因子損害；（9）一氧化氮的作用；（10）細(xì)胞凋亡；（11）級(jí)聯(lián)反應(yīng)發(fā)生等，使針刺對(duì)腦缺血作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究呈現(xiàn)出多樣化，主要涉及到以下3個(gè)方面的研究。

第一，針刺對(duì)腦細(xì)胞凋亡過(guò)程中相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的影響。神經(jīng)細(xì)胞凋亡是各類(lèi)腦損傷引起神經(jīng)元丟失的一種重要形式，及時(shí)防治神經(jīng)細(xì)胞凋亡是治療腦損傷的關(guān)鍵。細(xì)胞凋亡與許多基因和蛋白的表達(dá)有關(guān)，關(guān)系較為密切的是bcl-2基因家族和Caspase蛋白家族。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，針刺可通過(guò)促進(jìn)bcl-2基因家族中bcl-2的表達(dá)，抑制bax的表達(dá)，從而抑制細(xì)胞凋亡過(guò)程；亦可抑制腦缺血后缺血半暗帶Caspase的表達(dá)而有效抑制細(xì)胞凋亡。

第二，針刺對(duì)相關(guān)細(xì)胞因子的干預(yù)。腦缺血再灌注后腦組織局部過(guò)度的炎癥反應(yīng)是造成再灌注損傷的主要病理機(jī)制之一，白細(xì)胞介素-1β和腫瘤壞死因子-α等細(xì)胞因子介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，具有參與免疫調(diào)節(jié)和趨化作用，同時(shí)可促進(jìn)白細(xì)胞粘附于內(nèi)皮細(xì)胞，使白細(xì)胞自血管內(nèi)向缺血腦組織遷移，從而加重了缺血性腦損傷。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，電針干預(yù)可有效減少白細(xì)胞介素-1β、腫瘤壞死因子-α等炎性細(xì)胞因子的含量從而達(dá)到抗炎作用來(lái)防治腦缺血再灌注損傷。

第三，針刺對(duì)相關(guān)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的干預(yù)。作為神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子之一，腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）在腦組織中分布廣泛，對(duì)損傷的神經(jīng)元有保護(hù)、預(yù)防退變和促進(jìn)再生的作用。有研究證明，針刺可對(duì)抗應(yīng)激引起的皮層和海馬神經(jīng)元的BDNF的減少，增加BDNF陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)量，提高BDNF mRNA的表達(dá)水平，從而防治應(yīng)激引起的腦神經(jīng)元損傷。

4 結(jié)論

針灸實(shí)驗(yàn)研究多選擇以電針作為主要針灸方法來(lái)干預(yù)大鼠疾病模型，從而探討針灸治療疾病的作用機(jī)制，針刺的主要靶點(diǎn)為具有多系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用的穴位或相關(guān)疾病的特效穴，如足三里、內(nèi)關(guān)、百會(huì)、關(guān)元等。針灸實(shí)驗(yàn)所研究的疾病種類(lèi)繁多，如神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心腦血管疾病及代謝性疾病等，試驗(yàn)中多選用針灸臨床療效較好的疾病建立模型展開(kāi)研究，從而為針灸的臨床診療提供更為堅(jiān)實(shí)可靠的理論依據(jù)，而且實(shí)驗(yàn)中分子遺傳學(xué)的介入對(duì)針灸的作用機(jī)制進(jìn)行了基因?qū)用娴拿枋?，使得中醫(yī)理論指導(dǎo)下的針灸治療效果有了更加科學(xué)性的解釋。